公开(公告)号：CN115386561A

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202210501552.5

申请日：2022-05-09

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  祁巍巍 ,  陈璇 ,  余坦特

IPC: C12N9/36 ,  C12N15/56 ,  C12N15/84 ,  C12N15/64 ,  A01H6/46 ,  A01H5/10

Abstract: 本发明涉及一种人源溶菌酶蛋白基因、其表达载体的构建方法及其应用，本发明运用PTF102载体与经过玉米密码子优化后人工合成的人源溶菌酶基因片段进行连接，通过农杆菌介导的玉米幼胚转化实验获得了表达人源溶菌酶蛋白的独立转基因事件。通过对后代样本进行生化成分的分析，发现人源溶菌酶蛋白可以在胚乳中稳定的表达，并且能够在成熟籽粒的胚乳中积累。经过密码子优化后的人源溶菌酶蛋白具有抑菌活性，对革兰氏阳性菌有明显的抑菌作用，而对革兰氏阴性菌的抑制作用不明显。

公开(公告)号：CN115386561B

公开(公告)日：2024-07-16

申请号：CN202210501552.5

申请日：2022-05-09

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  祁巍巍 ,  陈璇 ,  余坦特

IPC: C12N9/36 ,  C12N15/56 ,  C12N15/84 ,  C12N15/64 ,  A01H6/46 ,  A01H5/10

Abstract: 本发明涉及一种人源溶菌酶蛋白基因、其表达载体的构建方法及其应用，本发明运用PTF102载体与经过玉米密码子优化后人工合成的人源溶菌酶基因片段进行连接，通过农杆菌介导的玉米幼胚转化实验获得了表达人源溶菌酶蛋白的独立转基因事件。通过对后代样本进行生化成分的分析，发现人源溶菌酶蛋白可以在胚乳中稳定的表达，并且能够在成熟籽粒的胚乳中积累。经过密码子优化后的人源溶菌酶蛋白具有抑菌活性，对革兰氏阳性菌有明显的抑菌作用，而对革兰氏阴性菌的抑制作用不明显。

公开(公告)号：CN113637677A

公开(公告)日：2021-11-12

申请号：CN202011391351.1

申请日：2020-12-02

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  祁巍巍 ,  霍真真 ,  谷雅静 ,  王敏芝 ,  陈璇

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明涉及一种能降低玉米中α醇溶蛋白的靶点基因及其应用。该靶点基因为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列中任意一种或两种。本发明运用改造后的CRISPR/Cas9载体与同源比对后所选取的α醇溶蛋白19kD与22kD各基因簇上的20bp靶标分别进行连接，通过农杆菌介导的玉米幼胚转化实验获得了α醇溶蛋白基因编辑材料，通过对后代样本进行表型观察，发现一些转基因事件的籽粒有粉质不透明的胚乳,以及19kD和22kD醇溶蛋白含量的显著下降。同时也获得了α醇溶蛋白含量显著下降的自交系材料。而醇溶蛋白的下降可提升玉米籽粒中赖氨酸和色氨酸等必需氨基酸的含量，从而提高玉米的营养品质。