公开(公告)号：CN106939303B

公开(公告)日：2021-02-23

申请号：CN201710343933.4

申请日：2017-05-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 吴强 ,  李金环 ,  寿佳

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑R919P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）是将野生型Cas9核酸酶第919位精氨酸突变成脯氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

公开(公告)号：CN107012250B

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN201710344514.2

申请日：2017-05-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 吴强 ,  李金环 ,  寿佳

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/44 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种适用于CRISPR/Cas9系统的基因组DNA片段编辑精准度的分析方法及其应用。本发明所述分析方法将Cas9核酸酶对基因组DNA双链进行切割的方式区分为钝末端切割与突出末端切割，钝末端切割方式对应的切割末端占比为钝断裂末端占比，突出末端切割方式对应的切割末端占比为突出断裂末端占比，通过预测候选sgRNA组合在每种切割方式下对应的断裂末端序列，并结合所述钝断裂末端占比与突出断裂末端占比，来预测采用候选sgRNA组合及选用的Cas9核酸酶对基因组DNA片段编辑的精准度。采用所述分析法可先对编辑方法进行精准度预测，能够略去繁杂的实验，从而提高实验效率。

公开(公告)号：CN106947750B

公开(公告)日：2020-12-08

申请号：CN201710347002.1

申请日：2017-05-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 吴强 ,  李金环 ,  寿佳

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑Q920P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑Q920P）是将野生型Cas9核酸酶第920位谷氨酰胺突变成脯氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑Q920P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

公开(公告)号：CN106967697A

公开(公告)日：2017-07-21

申请号：CN201710344429.6

申请日：2017-05-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 吴强 ,  李金环 ,  寿佳

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10

CPC classification number: C12N9/22 ,  C12N15/102 ,  C12N15/63 ,  C12N2310/10

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑G915F），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑G915F）是将野生型Cas9核酸酶第915位的甘氨酸突变成苯丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑G915F）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

公开(公告)号：CN106957831A

公开(公告)日：2017-07-18

申请号：CN201710343397.8

申请日：2017-05-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 吴强 ,  李金环 ,  寿佳

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑K918A），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑K918A）是将野生型Cas9核酸酶第918位赖氨酸突变成丙氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑K918A）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。

公开(公告)号：CN106939303A

公开(公告)日：2017-07-11

申请号：CN201710343933.4

申请日：2017-05-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 吴强 ,  李金环 ,  寿佳

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Cas9核酸酶及用途。本发明的Cas9核酸酶（Cas9‑R919P），具有Cas9核酸酶活性，适用于CRISPR/Cas9系统，所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）是将野生型Cas9核酸酶第919位精氨酸突变成脯氨酸获得。采用所述Cas9核酸酶（Cas9‑R919P）对DNA双链进行切割可产生突出断裂末端，以补平连接的方式可加入与突出断裂末端互补的碱基，能够实现对基因组DNA片段的特定位置的精准编辑。