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公开(公告)号:CN101907603A
公开(公告)日:2010-12-08
申请号:CN201010233232.3
申请日:2010-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属分析化学技术领域,具体为一种基于18O标记的N-糖链相对定量方法。具体是将糖苷内切酶催化生成的同位素18O标记的N-糖链与糖苷内切酶催化生成的不标记的N-糖链按等摩尔比混合为溶液,由生物质谱检测峰强度,再经计算消除同位素峰重叠后,进行相对定量。本发明成功解决了同位素18O标记的糖链与不标记的糖链在质谱中同位素峰重叠的问题。本发明在两个数量级的动态范围内,取得了良好的线性和较低的变异系数,为糖苷内切酶催化同位素标记N-糖链的方法在定量糖组学中的应用提供了有效的修正和计算方法。
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公开(公告)号:CN101368890A
公开(公告)日:2009-02-18
申请号:CN200710045047.X
申请日:2007-08-17
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生化分析领域,涉及一种利用具有微观相分离结构的嵌段聚合物涂层,对多肽和蛋白质样品进行靶上无需洗脱的原位除盐和同步富集,能避免样品损失,并对所富集的样品直接进行基质辅助激光解析离子化质谱的分析和鉴定的方法。本发明无需额外的洗脱除盐步骤也无需点覆过量体积的基质溶液就可实现除盐,并可直接进行MALDI质谱分析;本发明不仅首次成功实现了样品靶上原位免洗除盐与富集的特性,而且具有灵敏度高、重现性高、通量高、耐盐能力强、经济和省时等特点。可广泛用于蛋白质组学领域,同时也大大拓展了聚合物涂层技术的应用范围。
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公开(公告)号:CN101280334A
公开(公告)日:2008-10-08
申请号:CN200810037855.6
申请日:2008-05-22
Applicant: 复旦大学
IPC: C12P21/06
Abstract: 本发明属蛋白质组学技术领域,具体涉及一种交流电辅助蛋白高效酶解方法。本发明将蛋白质与蛋白水解酶如胰蛋白酶按一定比例溶解于缓冲溶液中,使溶液与一对施加有交流电压的电极接触。在电极间交变电场的作用下,带电荷的蛋白、酶以及无机离子等迅速改变在电场中的运动方向,引起蛋白和酶等分子的振动、碰撞、旋转和摩擦等运动。同时,蛋白分子中肽链中荷电基团也会在交变电场的作用下发生震动,使更多的酶切位点暴露出来,这些运动提高了蛋白和酶分子的能量水平及相互作用频率,从而大幅提高蛋白酶解效率。采用交流电辅助蛋白酶解,酶解时间从传统溶液酶解的12小时大幅缩短到5到10分钟,而酶解效率得到显著提高。
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公开(公告)号:CN1302282C
公开(公告)日:2007-02-28
申请号:CN200410093483.0
申请日:2004-12-23
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物检测技术领域,具体为一种本体修饰聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片的制备方法。将甲基丙烯酸甲酯与修饰剂混合,将少量热引发剂和光引发剂溶解在该混合溶液中,于水浴中加热使单体溶液预聚,将预聚溶液注入芯片模具中,用紫外光照射,引发本体聚合,制作得微流控芯片基片,然后用盖膜封装得微流控芯片。本发明将功能性修饰剂如甲基丙烯酸或对乙烯基吡啶等引入聚甲基丙烯酸甲酯的主链,对单体表面的荷电性进行调控,从芯片材料的分子水平控制电渗流,从而改善分离、提高芯片性能和拓宽芯片的用途。该芯片制作技术简便、成本低,可进行大规模生产,在环境监测、临床诊断、生命科学研究、食品分析和工业在线分析等领域中有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN1821777A
公开(公告)日:2006-08-23
申请号:CN200610025276.0
申请日:2006-03-30
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/08 , G01N30/72 , B01J20/281
Abstract: 本发明属生化分析鉴定技术领域,具体为一种对微量蛋白或多肽溶液同步富集、脱盐并直接进行鉴定的方法。该方法以氧化硅纳米粒子作为吸附剂,对蛋白质以及蛋白质酶解多肽进行高效吸附,并能克服高浓度盐的干扰。由于氧化硅纳米粒子与MALDI-MS有很好的相容性,被吸附的样品无需洗脱步骤可直接进行MALDI-TOF/MS分析,操作简单,避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明可克服4M氯化钠或8M尿素对质谱的干扰,对蛋白的富集效率可达100倍。
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公开(公告)号:CN1673378A
公开(公告)日:2005-09-28
申请号:CN200510024614.4
申请日:2005-03-24
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于蛋白分离纯化领域。本发明提供了一种用于哺乳细胞的串联亲和纯化载体,其制备方法及其纯化蛋白复合物的方法。串联亲合纯化(TAP)用于分离蛋白复合物,研究生理条件下蛋白-蛋白相互作用。本发明的串联亲合纯化载体适于研究高等哺乳细胞中蛋白质相互作用,用两个Flag标签序列取代了最初TAP载体上蛋白A标签序列,使得标签分子量大大减小,有利于外源目的基因与TAP载体有效融合表达,减小标签对融合蛋白的功能或稳定性的影响;同时双重Flag标签序列有利于与抗Flag的单克隆抗体发生高亲和力结合。因此,本发明的TAP载体用于分离纯化高等哺乳细胞中的蛋白复合物,将更为高效和简便。
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公开(公告)号:CN1558230A
公开(公告)日:2004-12-29
申请号:CN200410016100.X
申请日:2004-02-03
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明是一种质谱分析用的纳升喷雾装置。它由一个三通、喷雾头、注射针头和钼丝组成,喷雾头与三通的一端口密封连接,钼丝焊接固定于针头的尖端,针头由三通的一端口插入,穿过三通的另一端,钼丝前端伸入喷雾头的尖端部;三通的第三端口为气体通路。其中钼丝提供电接触,由气体通路提供辅助气体,帮助喷雾。本装置制作方便,操作简单,喷雾稳定性好,具有广阔应用前景。
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公开(公告)号:CN2504633Y
公开(公告)日:2002-08-07
申请号:CN01254735.2
申请日:2001-11-16
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N27/327 , G01N13/16
Abstract: 本实用新型为一种用分子筛修饰的谐振式微梁化学生物传感器。由压电式谐振悬臂梁和高选择性分子筛膜组成,其中微悬臂由上、中、下3层电极和2层压电层相互间隔构成,其上、下两侧为绝缘层,分子筛膜层设置于微悬臂梁上表面。本传感器选择性强、灵敏度高,可重复性好,适合大规模生产,并可降成本。
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公开(公告)号:CN2729722Y
公开(公告)日:2005-09-28
申请号:CN200420090405.0
申请日:2004-09-23
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N27/453 , G01N27/447
Abstract: 本实用新型涉及一种阴阳离子毛细管电泳电导检测芯片。该芯片系统由双十字交叉聚甲基丙烯酸甲酯毛细管电泳芯片和移动式非接触电导检测电极构成,可进行阴阳离子双向同时进样、同时分离和同时检测。采用光刻与化学湿法蚀刻相结合的技术制作硅片阳模,将聚合物单体甲基丙烯酸甲酯与引发剂混合,注入模具中紫外光引发本体聚合制作毛细管电泳芯片。配套的移动式非接触电导检测电极为一对制作在塑料薄片上的条状金属薄膜电极。该检测系统操作简便、重现性好、灵敏度高、线性范围宽、样品用量少,可对阴阳离子同时进行分离和检测,分析效率高。可用于临床诊断、生命科学研究、环境监测、食品分析和工业在线分析等领域中阴阳离子的高通量分析。
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公开(公告)号:CN2784926Y
公开(公告)日:2006-05-31
申请号:CN200520041034.1
申请日:2005-04-21
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N27/447
Abstract: 本实用新型属环境监测技术领域,具体为一种纤维电泳芯片。该纤维电泳芯片由纤维束代替原电泳芯片中的玻璃毛细管而构成。其中纤维束由单丝的玻璃纤维无捻粗纱或化学纤维长丝无捻粗纱组成。其制备方法是将纤维束经脱脂、清洗和干燥后浸入浸渍液如甘油,得甘油浸渍纤维束。将纤维束按进样和分离毛细管的结构形成置于有机玻璃片或膜上,利用甲基丙烯酸甲酯注模原位聚合和光引发冷法聚合方法,将纤维束包埋,最后在纤维束一端注水加压,将甘油洗出。该电泳芯片利用纤维束中的孔隙作为电泳的进样和分离通道。该纤维电泳芯片制作简便、价格低廉,可批量生产,在环境监测、临床诊断和食品分析等领域中有良好的应用前景。
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