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公开(公告)号：CN105586365B
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201510875864.2
申请日：2015-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产混合醇的方法。本发明通过调控胞内还原性辅因子（NADPH/NADH）供给水平实现异丙醇、丁醇和乙醇的高效联产。由于异丙醇的合成，菌体在产醇期还原力需求增大，尤其是NADPH，造成胞内还原力供给失衡，在进行厌氧发酵时，总醇产量仅3.88g/L，细胞生长较差，最高细胞量OD600值达到4.19。通过在发酵培养基中添加2g/L氯化钙，促进NADH向NADPH转化，恢复了细胞生长和混合醇的合成，混合醇产量有较大的提高。通过在发酵培养基中添加10g/L的碳酸钙，不仅改善了发酵培养基的pH同时有利于产醇的进行，加强了异丙醇通路的NADPH供给，提高了混合醇的总产量。利用本发明发酵生产混合醇的方法，能提高混合醇的生产强度及产量。
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公开(公告)号：CN106148310B
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201610659707.2
申请日：2016-08-11
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水解酶突变体及其在烟酸制备中的应用，所述突变体是将序列SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的第168位苯丙氨酸突变为缬氨酸和192位丝氨酸突变为苯丙氨酸。以含腈水解酶突变体编码基因的重组工程菌在经诱导表达后获得的湿菌体为酶源，以3‑氰基吡啶为反应底物，以pH=7.0的PBS缓冲液为反应介质构成反应体系，在40℃下水浴反应，反应结束获得烟酸。
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公开(公告)号：CN105861463B
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201610222929.8
申请日：2016-04-12
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种环氧琥珀酸水解酶，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还设计了含有环氧琥珀酸水解酶的重组质粒以及含有重组质粒的大肠杆菌重组菌，并公开了大肠杆菌重组菌在超声辅助全细胞生产D‑酒石酸中的应用，同时对超声辅助大肠杆菌全细胞催化环氧琥珀酸转化为酒石酸的条件进行了优化。本发明可实现更高的全细胞环氧琥珀酸转化率，节约了时间，超声条件下的全细胞催化稳定性也比振荡条件下要好。
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公开(公告)号：CN109370971A
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201811346790.3
申请日：2018-11-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株发酵产L-天冬氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用，所述菌株分类命名为Escherichia coli △iclR，其保藏号为CCTCC NO：M 2018521。其构建过程主要包括敲除重组菌保藏号为CGMCC NO：2301中aceBAC操纵子的阻遏基因iclR，从而打开乙醛酸途径分流通量，充分利用发酵过程中积累的乙酸，以其为原料通过发酵获得富马酸，提高碳源的利用效率，从而进一步提高L-天冬氨酸的产率。本发明还公布了该基因工程菌发酵制备L-天冬氨酸的培养基和培养条件，实现了完全采用葡萄糖为原料发酵制备L-天冬氨酸的路线，提高L-天冬氨酸产率，绿色、环保，具有经济性。
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公开(公告)号：CN109266664A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811239155.5
申请日：2018-10-23
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合截短表达策略提高谷氨酸氧化酶稳定性的方法，利用融合截短表达策略，将位于谷氨酸氧化酶的α与β链之间的40个氨基酸残基进行删除，构建了新的重组蛋白(αβγ)2，融合截短表达后的谷氨酸氧化酶基因，核苷酸序列如SEQ ID NO．1所示，融合截短表达后的谷氨酸氧化酶基因编码的谷氨酸氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，其得到具有相同功能的蛋白质，且重组蛋白的比酶活和稳定性均得到提升。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109265500A
公开(公告)日：2019-01-25
申请号：CN201811071999.3
申请日：2018-09-14
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种鼠李糖脂酸沉淀的方法，采用离心的方法去除菌体，收集上清液，然后将收集的上清液置于水浴锅中水浴除蛋白，采用离心的方法去除沉淀的蛋白，收集上清液，加入磷酸调节pH至2让鼠李糖脂析出，产生沉淀，在4℃静置18h。最后经过离心收集鼠李糖脂沉淀。本发明的方法通过水浴去蛋白结合磷酸沉淀获取鼠李糖脂，鼠李糖脂回收率高、纯度高，此外，本发明的方法操作简单、经济，高效，适合工业化的批量生产。
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公开(公告)号：CN109234259A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811409331.5
申请日：2018-11-23
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了丙酮酸氧化酶的固定化方法，采用聚赖氨酸载体将丙酮酸氧化酶固定在电极上。采用本发明的方法固定化丙酮酸氧化酶，可提高丙酮酸氧化酶约20%活力，获得的固定化丙酮酸氧化酶酶活高，对pH、温度的耐受性好，对后续生物传感器的开发与应用具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN108969879A
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201810574787.0
申请日：2018-06-05
Applicant: 南京工业大学
IPC: A61M37/00
Abstract: 本发明公开了一种复合微针及微针贴片以及其制备方法。该复合微针包括微针形状的基质和包埋于基质中的活性成分，所述基质为大分子量水溶性葡聚糖与小分子量水不溶性葡聚糖的混合物，所述活性成分为具有医疗或美容功效的物质。本发明的所述的复合微针具有良好的韧性和硬度，良好的长期稳定性，良好的生物相容性和生物降解性且具有高度安全性，无毒副作用，可快速溶于皮内不会产生医疗废物，符合绿色发展理念，且占用体积小，运输方便，制作工艺简单，生产成本低，可大规模批量生产。
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公开(公告)号：CN108441431A
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201810262573.X
申请日：2018-03-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一株能直接利用L-苯丙氨酸发酵产2-苯乙醇的高抗逆性解脂耶氏酵母及应用。本发明公开了一株解脂耶氏酵母，分类命名为Yarrowia lipolytica Y66，其保藏登记号为CCTCC NO：M 2017753。本发明通过离子束诱变，经含有高浓度醇类抑制物的平板和摇瓶发酵筛选，得到的突变菌株以葡萄糖作为碳源，在摇瓶发酵中对苯乙醇的耐受性和产物的产量分别达到了4.0g/L和3.2g/L，分别是同等条件培养的出发菌株的4倍和2.13倍；其抗逆性强、产物产量高、重复性好，是一种适合利用L-苯丙氨酸发酵产2-苯乙醇的优良菌种。
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公开(公告)号：CN108342431A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201810462322.6
申请日：2018-05-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种鼠李糖脂的高效发酵工艺，其发酵菌种具有良好的遗传稳定性，可满足生产需求。经过发酵条件优化后，该菌利用30g/L甘油、60g/L菜籽油作为复合碳源，5L发酵罐经过192h发酵，其鼠李糖脂最高产量达到53.3g/L。与现有技术相比，本发明在等量碳源供给的情况下，可获得同等的鼠李糖脂产量；同时，由于工业甘油的价格低廉，利用甘油作为底物降低了其生产成本，从而提高了生物表面活性剂鼠李糖脂的应用潜力。
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