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公开(公告)号：CN110042068A
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201910308247.2
申请日：2019-04-17
Applicant: 美药星(南京)制药有限公司 , 江南大学 , 南京汉欣医药科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种改造信号肽提高肠激酶分泌表达量的方法，属于基因工程技术领域。本发明是以毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115作为出发菌株，通过同源重组的方法替换掉α-factor信号肽的Pre-region区域，提高肠激酶分泌效率的一种方法。本发明的Sekd信号肽与原始的α-factor信号肽相比，酶活提高4.2倍，解决了肠激酶胞外分泌量低的问题，为进一步提高工业化生产肠激酶的表达量奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106282084B
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201610865126.4
申请日：2016-09-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产2‑酮基‑L‑古龙酸的氧化葡萄糖酸杆菌的基因工程菌，属于代谢工程领域。本发明采用分子生物学手段引入sdh、sndh，并通过SH3lig和SH3支架结构使SDH和SNDH空间位置上接近并调节两酶比例，从而实现山梨醇通过氧化葡萄糖酸杆菌生产2‑KLG，简化了2‑KLG生产工艺，摇瓶水平2‑KLG产量最高可达45.39g·L‑1，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN106497858B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201611094235.7
申请日：2016-12-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产5‑氨基乙酰丙酸的大肠杆菌工程菌，属于代谢工程和微生物发酵领域。本发明在使用载体pRSFDuet‑1‑hemA过量表达5‑氨基乙酰丙酸C4合成途径关键酶5‑氨基乙酰丙酸合酶hemA的基础上，将来源于大肠杆菌CoA合成途径中编码泛酸激酶的的基因coaA、编码磷酸泛酰半胱氨酸合成酶和脱羧酶的基因dfp、编码磷酸CoA焦磷酸化酶的基因coaD，使用pUC19和pETDuet‑1载体共表达三个基因，构建重组菌株。通过摇瓶培养验证，共表达CoA途径基因的重组菌ALA产量均明显提高，其中产量最高为700mg/L，相对于对照提高约46％。
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公开(公告)号：CN105838688B
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201610396747.2
申请日：2016-06-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种透明质酸合酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明将兽疫链球菌来源的透明质酸合酶在枯草芽孢杆菌中进行胞内结构域突变，获得产量和分子量均有正向效果的突变体。同时，对枯草芽孢杆菌中UDP‑GlcUA和UDP‑N‑GlcNAc合成途径的基因，进行模块化组装表达分析，通过调控不同的UDP‑GlcA和UDP‑GlcNAc浓度及比例，实现枯草芽孢杆菌高产大分子量范围的透明质酸。本发明为食品级微生物高效生产制备透明质酸奠定了一定的基础，适合于工业化生产应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109097421A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201810920301.4
申请日：2018-08-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种水解制备奇数聚合度透明质酸寡糖的方法，属于生物工程技术领域。本发明以大分子透明质酸为底物，通过控制水蛭型透明质酸酶(LHase)和牛睾丸型透明质酸酶(BTH)两种透明质酸水解酶的添加量和反应时间，同时制备得到两种不同结构的奇数聚合度透明质酸寡糖(三、五、七糖)。本发明提出来一种新的、简单易行的制备奇数聚合度透明质酸寡糖的方法，为奇数聚合度透明质酸寡糖的功能及特性研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104561158B
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201510017646.5
申请日：2015-01-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种添加Fe2+提高大肠杆菌工程菌合成5‑氨基乙酰丙酸的方法，属于代谢工程和微生物发酵领域。本发明以已构建的合成5‑氨基乙酰丙酸的大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)LADF‑6为出发菌株，考察培养基中添加Fe2+对ALA合成的影响，通过发酵验证，目的产物ALA产量有明显提高，30h时ALA产量为2.25g/L。在此基础上，经过优化Fe2+的初始添加量并在3L发酵罐中放大培养，当添加10mg/L的Fe2+时，ALA产量为3.85g/L。
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公开(公告)号：CN107227284A
公开(公告)日：2017-10-03
申请号：CN201710390552.1
申请日：2017-05-27
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2474 , C12P19/26 , C12Y302/01035
Abstract: 本发明公开了一种发酵小分子透明质酸的重组兽疫链球菌，属于生物工程技术领域。本发明将水蛭来源的透明质酸酶在兽疫链球菌中进行异源表达，选取9种信号肽与透明质酸酶N端融合，并采用Pspac诱导型启动子和链球菌RBS，通过比较酶活，筛选合适的信号肽，实现了透明质酸酶在兽疫链球菌中的高效分泌表达，同时通过降解兽疫链球菌自身所产大分子透明质酸，获得了活性小分子透明质酸，并有一定的产量提升。本发明为微生物系统高效发酵制备小分子透明质酸奠定了基础，适合于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN104560852B
公开(公告)日：2017-08-25
申请号：CN201510003494.3
申请日：2015-01-05
Applicant: 江南大学 , 江苏汉光生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种L‑苯丙氨酸糖酸转化率提高的谷氨酸棒杆菌重组菌，属于代谢工程领域。本发明的重组菌株缺失了基因aroP、aceE、ldh、pstI，在原pstI位点整合了iolT2‑ppgk基因，同时转入了含有L‑Phe合成途径八个关键酶的调控表达质粒。本发明的重组菌株明显提高了L‑Phe中间产物PEP积累量，L‑Phe产量以及L‑Phe对葡萄糖的糖酸转化率，改变碳源流向降低或者阻断副产物积累，此代谢工程的手段能被应用于以PEP为前体的其他代谢产物的合成。
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公开(公告)号：CN106244613A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610726181.5
申请日：2016-08-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/75 , C12N1/21 , C07K14/435 , C12R1/125
CPC classification number: C12N15/75 , C07K14/32 , C07K14/43595 , C12N2800/101
Abstract: 本发明公开了一种稳定期自裂解的枯草芽孢杆菌及其应用，属于基因工程领域。本发明的表达宿主是一种进入稳定期后菌体就自降解的枯草芽孢杆菌。该枯草芽孢杆菌在培养至进入稳定期以后，能够促进细胞裂解的蛋白分子就会在稳定期启动子的促进下过量表达，从而使宿主快速裂解，达到释放胞内物质的目的。利用本发明表达宿主表达了绿色荧光蛋白基因(gfp)，通过发酵培养，与利用传统的枯草芽孢杆菌标的宿主相比，最终的菌体浓度降低至少63.2％，而胞外荧光蛋白含量提高至少78.8％～141.5％。
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