一个调控水稻叶片衰老的基因OsSWEET5及应用

    公开(公告)号:CN104131013A

    公开(公告)日:2014-11-05

    申请号:CN201410364872.6

    申请日:2014-07-28

    Inventor: 林拥军 周勇

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,具体涉及到一个调控水稻叶片衰老的基因OsSWEET5及应用。该基因的核酸序列如SEQ ID NO:1的1-1363位所示,其编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。构建了由CaMV35S启动子驱动该基因表达的双元表达载体,利用农杆菌介导法转化水稻宿主,得到超量表达的转基因水稻植株。检测结果表明,转基因水稻植株叶片衰老进程明显加速,说明该基因在水稻中具有调控叶片衰老的功能。本发明得到的超量表达转基因植株改变了叶片衰老进程,为基因工程和分子育种提供了新的资源。

    调控水稻叶片衰老和抗旱能力的基因OsNAP及应用

    公开(公告)号:CN104120137A

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201410362588.5

    申请日:2014-07-28

    Inventor: 林拥军 周勇

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,具体涉及一个调控水稻叶片衰老和抗旱能力的基因OsNAP及应用。该基因的核酸序列如SEQ ID NO:1所示;其cDNA序列如SEQ ID NO:2所示。其蛋白质的序列如SEQ ID NO:3所示。该基因在幼嫩的水稻叶片中有一定的表达,随着叶片衰老程度加深其表达量逐渐上升,当叶片衰老程度到达晚期时表达活性达到顶点。通过对超量表达和抑制表达该基因的转基因水稻植株的研究,发现超量表达转基因植株叶片衰老进程加速,同时苗期抗旱性明显提高。抑制表达转基因植株的叶片衰老进程明显延缓。表明该基因具有调控水稻叶片衰老和提高抗逆性的功能。

    一种培育转基因抗虫水稻的方法

    公开(公告)号:CN104099367A

    公开(公告)日:2014-10-15

    申请号:CN201310129273.1

    申请日:2013-04-15

    Inventor: 林拥军 陈浩

    Abstract: 本发明属于水稻基因工程技术领域。具体涉及一种转基因抗鳞翅目害虫尤其是抗螟虫水稻的培育方法。利用SEQ ID NO:1所示的人工合成的新型杀虫基因cry2A作为目标基因,以bar基因为选择标记基因,采用农杆菌介导的遗传转化法,将目标基因导入水稻优良恢复系明恢63中,获得高抗水稻鳞翅目害虫尤其是抗螟虫的转基因水稻材料T2A-1。此外,可通过有性杂交和体细胞杂交等技术将T2A-1的抗虫基因重组到新的水稻种质中去,培育成水稻抗虫新品种(系)。本发明公开了转化载体构建,水稻遗传转化和转化植物的分子鉴定,插入位点的序列分析以及室内和田间抗虫试验等系列过程的验证试验。

    利用转基因技术提高油菜对鳞翅目害虫抗性的方法

    公开(公告)号:CN103421840A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310332971.1

    申请日:2013-08-01

    Abstract: 本发明属于植物转基因技术领域,具体涉及一种利用转基因技术提高油菜对鳞翅目害虫抗性的方法。本发明的特征是:将人工合成的Bt杀虫基因cry1C*通过农杆菌介导的方法转化油菜,进一步通过PCR及Southern杂交检测外源基因是否整合到油菜基因组,利用实时定量RT-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测cry1C*基因在转录和蛋白水平上的表达情况。抗虫性鉴定的结果显示,转基因油菜对鳞翅目害虫的抗性显著增强。本发明操作简便,不仅能够显著提高油菜对鳞翅目害虫的抗性,同时对植物的正常生长无影响,适用于油菜的抗虫育种。

    叶片特异性表达人工microRNA提高水稻对白叶枯病抗性的方法

    公开(公告)号:CN101979548B

    公开(公告)日:2013-06-19

    申请号:CN201010286238.7

    申请日:2010-09-16

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域。具体涉及一条21nt水稻抗病相关DNA分子的设计、验证及应用。本发明人工设计了一条21nt的人工microRNA序列,并利用天然microRNAosa-mi528的前体作为骨架,构建了人工microRNA前体。在转基因水稻中,利用水稻或拟南芥来源的叶片特异性启动子特异性地表达这条人工microRNA的前体,可以增强转基因水稻对白叶枯病的抗性,同时不影响转基因水稻的育性等重要农艺性状。

    一种控制水稻株高和穗颈长的基因及应用

    公开(公告)号:CN103013995A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201110290509.0

    申请日:2011-09-28

    Inventor: 陈浩 江山 林拥军

    Abstract: 本发明“一种控制水稻株高和穗颈长的基因及应用”属于植物基因工程技术领域。与植物转基因技术和水稻分子育种技术领域相关。本发明通过植物基因克隆技术得到一种减弱人工microRNA干涉eui-1基因功能的target mimic基因MIMa,其核苷酸序列如序列表SEQ NO:3所示。用长穗颈的水稻材料eZS97A与MH63-MIMa进行杂交,得到株高和穗颈长恢复到野生水平的水稻材料。本发明还公开了其制备方法与应用。

    一种抗寒的草铵膦抗性基因及应用

    公开(公告)号:CN102559717A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201210001518.8

    申请日:2012-01-05

    Abstract: 本发明公开了一种抗寒的草铵膦抗性基因及应用,将深海混合菌液按1%的接种量转接到含有草铵膦的HLB的蛋白胨,酵母培养物和氯化钠液体培养基上培养。再将生长好的菌液在含有草铵膦的HLB固体培养基上划线培养。划线分离得到单菌落以后,再按照上述方法复筛一次,得到的抗性细菌。抽提该原始单菌落的基因组DNA,并以其为PCR模板,选用16S扩增通用引物1492R(5-GGTTACCTTGTTACGACTT-3)和27F(5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3)以细菌染色体DNA为模板进行PCR扩增,鉴定结果为Rhodococcusequi,原始细菌的16S序列为SEQIDNO:1所示的核苷酸序列,一种分离的草铵膦抗性的编码基因,其序列为SEQIDNO:2所示的核苷酸序列。经过生物学实验验证,证明该酶具有高活性,耐低温,可广泛用于不同抗除草剂转基因作物。

    胶体金层析法迁飞性昆虫卵黄原蛋白检测试纸及其制备方法

    公开(公告)号:CN102419371A

    公开(公告)日:2012-04-18

    申请号:CN201110234151.X

    申请日:2011-08-16

    Abstract: 本发明涉及一种胶体金层析法迁飞性昆虫卵黄原蛋白检测试纸及其制备方法。是在PVC塑料底板置搭接有金标结合垫、样品垫和吸水垫的硝酸纤维素包被膜,硝酸纤维素包被膜有包被多克隆抗体的检测线和包被羊抗鼠的质控线,金标结合垫包被胶体金颗粒标记抗体。制备是先制单克隆抗体、多克隆抗体及羊抗鼠,由单克隆抗体制备胶体金颗粒标记抗体,然后在PVC塑料底板上顺次搭接并粘贴样品垫、金标垫、硝酸纤维素包被膜、吸水垫,硝酸纤维素膜设检测线和质控线,检测线包被多克隆抗体,质控线包被羊抗鼠,金标垫包被胶体金颗粒标记抗体,即得检测试纸。采用本发明方便快捷,可在5-10min内半定量检测迁飞性昆虫样品中的卵黄原蛋白含量,以确定迁飞性昆虫的虫源性质。

    水稻胚乳特异表达基因的启动子及表达模式鉴定

    公开(公告)号:CN101831429A

    公开(公告)日:2010-09-15

    申请号:CN201010151033.8

    申请日:2010-04-15

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域。从水稻基因组中克隆了同一胚乳特异表达基因(登录号为GI:31415924)上游6个不同长度的启动子(EnP3、EnP3-859、EnP3-678、EnP3-471、EnP3-292和EnP3-110),其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1-6所示;其中5个启动子(EnP3、EnP3-859、EnP3-678、EnP3-471和EnP3-292)仅在转化植株的胚乳表达,并且随着胚乳发育阶段的不断进行,表达量呈现下降趋势;在其他组织如叶片、叶鞘、茎杆、根、花、颖壳及胚中均检测不到表达。启动子EnP3-110在叶片、叶鞘、茎杆及颖壳这些绿色组织中可以检测到表达,但是在根、花及种子(包括胚和胚乳)中却检测不到表达,成为一个短的绿色组织特异表达启动子。公开了6个启动子及其相应表达载体的制备方法,以及通过农杆菌介导的转基因方法导入水稻的应用。

    改造合成的苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因CrylC*

    公开(公告)号:CN1219883C

    公开(公告)日:2005-09-21

    申请号:CN02139081.9

    申请日:2002-09-20

    Inventor: 林拥军 张启发

    Abstract: 一个改造合成的编码苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白的基因CrylC*。其特征在于:通过系列方法,设计并合成一个苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因CrylC*;与原CrylCa5基因的5′端1890个核苷酸的序列比较,该基因编码蛋白的氨基酸组成不变,植物偏爱性密码子的使用频率如图2所示,消除了原始基因中的富含AT序列和存在的反向重复序列以及不明确的真核基因内含子序列,C+G含量为44.64%,与原始序列的同源性为84.0%,编码序列的5′端添加有引导序列(SEQ ID NO:3)和3′端添加加尾识别信号序列(SEQ ID NO:4)。

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