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公开(公告)号：CN103472182A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310385454.0
申请日：2013-08-29
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N30/89
Abstract: 本发明公开了一种鉴定菊花远缘杂交胚胎败育相关蛋白的方法，属于菊花育种与蛋白质组学领域。该方法包括：以栽培小菊作母本，野菊菊花脑作父本开展远缘杂交工作。授粉后不同时间剪下已授粉的花序，分别取形态发育完整、饱满的子房和形态发育异常、不饱满的子房，取样后立即在液氮中速冻后保存于-80℃冰箱中。样品用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质，保存于-80℃。最后运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白，并进行生物信息学分析，获得与菊花远缘杂交育种中胚胎败育的相关蛋白。本发明针对菊花及其近缘属野生种，提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎发育过程中不同发育阶段的不同形态的胚胎差异蛋白，为解决菊花远缘杂交胚胎败育提供研究基础。
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公开(公告)号：CN103233074A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310170609.9
申请日：2013-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种菊花SSR引物的开发方法。利用NCBI数据库现有的序列数据，结合Perl编程语言方法，对大量序列信息进行批量处理，进行SSR序列查找和SSR标记引物设计，克服了SSR开发效率低、耗时久、成本高等障碍。以不同栽培菊花品种为材料，对设计的SSR引物进行验证，若有条带检测出，即为成功的SSR引物。应用本方法成功地设计了363对SSR引物，为菊花SSR引物开发进而实现分子标记辅助选择育种和比较基因组学研究等提供了新的方法和思路。
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公开(公告)号：CN103146712A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310096562.6
申请日：2013-03-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因及其植物表达载体和应用。本发明菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因序列如SEQ ID NO.1所示，所构建的表达载体pCAMBIA1301‐（+/‐）‐CmbHLH1是将CmbHLH1基因插入到克隆载体pMD19‐T simple vector(Takara)，后经过BamH I(Takara)和Sac I(Takara)双酶切后连接到表达载体pCAMBIA1301的BamH I和Sac I位点得到的。将该植物表达载体用于植物遗传转化，正反义CmbHLH1基因在CaMV35S启动子的启动下过量表达，从而达到影响下游目的基因的表达效果，提高植物铁离子的吸收能力并进一步验证该基因的功能。菊属中该基因是首次发现与铁离子吸收相关的bHLH转录因子。
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公开(公告)号：CN103141393A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310091445.0
申请日：2013-03-21
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种建立菊花脑高效再生体系的方法，属于生物技术育种领域。以菊花脑幼嫩无菌花蕾为外植体，根据三种激素的组合设计出八种培养基，进行最适分化培养基的筛选。经过1～2次的继代培养，花蕾直接分化出再生苗，而后转入生根培养基中进行生根培养，获得完整植株。本发明首次以菊花脑花蕾建立了其高频再生体系，为菊花脑生物技术育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其近缘种菊花的生物技术育种进程。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102161995B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110049155.0
申请日：2011-03-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及菊属异色菊耐寒基因DdICE1及其表达载体和构建方法。DdICE1基因的序列为SEQ ID NO.1，所述的表达载体是将DdICE1基因插入到gateway入门载体pENTR1A的Sal I和Not I酶切位点之间，重组的pENTR1A-DdICE1质粒Nsi I单酶切线性化后与pEarleyGate103载体质粒进行LR重组反应得到的。直接用于农杆菌介导的遗传转化，创造耐寒新种质，提高植物的耐寒性，可进行植物品种改良。
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公开(公告)号：CN102559702A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210063040.1
申请日：2012-03-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00
Abstract: 本发明属于植物基因工程和转基因育种领域，公开了耐盐基因CcSOS1及其应用。耐盐基因CcSOS1，其核苷酸序列为SEQ ID No.1。所述的耐盐基因CcSOS1在提高菊花抗盐性方面的应用。一种提高菊花抗盐性的方法，该方法包括如下步骤：(1)构建CcSOS1基因的植物表达载体；(2)采用农杆菌介导法将含CcSOS1基因的植物表达载体转入到切花菊中，进行培养初步获得抗性植株。本发明从盐生植物大岛野路菊首次克隆了一个新的耐盐基因CcSOS1，通过将该基因整合到菊花基因组中，通过高盐试验分析获得耐高盐的转基因菊花株系。利用本方法可以显著提高菊花的耐盐性。
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公开(公告)号：CN102175554B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110007021.2
申请日：2011-01-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物栽培与育种技术领域，公开了从多个切花菊品种中筛选氮利用效率相对最高的品种的方法，该方法包括以下几个步骤：a、获取水培苗；b、砂培初筛：将水培苗分为两组，一组进行低氮处理，另一组进行正常氮处理；分别测定每个品种的筛选指标：相对干物质重、相对含氮量、相对叶绿素含量，筛选出2～6个氮利用效率较高的品种和2～6个氮利用效率较低的品种作为对照；c、营养液培养复筛：将步骤b中筛选出的品种进行营养液培养，重复筛选出1个氮利用效率相对最高品种和1个氮利用效率相对最低的品种。本方法最终筛选出的切花菊品种，为进一步对现有切花菊品种进行了改良，研究其生物学特性和生理生化机制提供材料。
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公开(公告)号：CN102124950B
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201010607838.9
申请日：2010-12-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术育种领域，公开了一种获得栽培菊花单倍体的方法。本发明选择栽培菊花品种为“母本”，利用蒙导父本的灭活花粉进行授粉杂交，并采用组织培养手段进行胚珠的离体培养，以克服菊属栽培菊花单倍体的生产和鉴定障碍。对获得的单倍体材料进行形态学鉴定和细胞学鉴定，选择茎、叶、花序、气孔等形态学特征与“母本”不同或出现特异性状单倍体材料，进行细胞学鉴定，若染色体组成为“母本”数目的一半，即为获得的单倍体。应用本方法成功地生产了多个栽培种的单倍体，为菊属植物种质创新和起源进化研究提供了新的材料。
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公开(公告)号：CN102286527A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110252704.4
申请日：2011-08-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子育种领域，公开了DREB基因转化红掌的遗传转化方法。该方法是将红掌无菌愈伤组织切开后用含有重组质粒pCAMBIA1301-DREBa的农杆菌液侵染10min，共培养3d、抑菌培养5d、筛选培养获得具潮霉素抗性的生根苗。经PCR检测证实外源基因已转入红掌基因组DNA中。本发明首次针对红掌建立了其遗传转化体系，为红掌分子育种工作提供了理论基础和实验依据，将有效推动其分子育种进程。
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