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公开(公告)号：CN113005045A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110269600.8
申请日：2021-03-12
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用。以枯草芽孢杆菌基因为模板，PCR扩增得纳豆激酶前导肽‑成熟肽基因片段NKt；以NKt基因片段为模板，扩增NKt194突变片段；将NKt194突变片段按毕赤酵母X33密码子偏好性进行优化和合成得NKt2；构建PGAPZα‑A‑NKt2，将PGAPZα‑A‑NKt2转化毕赤酵母X33构建真核表达系统的纳豆激酶重组基因工程菌株；培养纳豆激酶重组基因工程菌株，诱导纳豆激酶表达。本发明成功构建一株突变纳豆激酶重组基因工程菌LNF012及在真核系统中表达，使原核生物的纳豆激酶基因在真核生物体系中成功表达，为今后纳豆激酶大规模的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113005045B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202110269600.8
申请日：2021-03-12
Applicant: 辽宁大学
Abstract: 本发明涉及一株含突变纳豆激酶重组基因的工程菌及其构建方法和应用。以枯草芽孢杆菌基因为模板，PCR扩增得纳豆激酶前导肽‑成熟肽基因片段NKt；以NKt基因片段为模板，扩增NKt194突变片段；将NKt194突变片段按毕赤酵母X33密码子偏好性进行优化和合成得NKt2；构建PGAPZα‑A‑NKt2，将PGAPZα‑A‑NKt2转化毕赤酵母X33构建真核表达系统的纳豆激酶重组基因工程菌株；培养纳豆激酶重组基因工程菌株，诱导纳豆激酶表达。本发明成功构建一株突变纳豆激酶重组基因工程菌LNF012及在真核系统中表达，使原核生物的纳豆激酶基因在真核生物体系中成功表达，为今后纳豆激酶大规模的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109576277A
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201910043737.4
申请日：2019-01-17
Applicant: 辽宁大学
IPC: C12N15/25 , C12N15/70 , C07K14/545
Abstract: 本发明涉及一种小鼠截短IL-36α蛋白的生产方法。包括以下步骤：小鼠截短IL-36α蛋白基因密码子优化与合成；PCR扩增获得小鼠截短IL-36α片段；构建pET28a-mIL-36α重组载体；将pET28a-mIL-36α转化大肠杆菌BL21，构建重组工程菌；诱导小鼠截短IL-36α蛋白表达，该工程菌表达的重组小鼠截短IL-36α主要为可溶蛋白；用Ni-NAT对表达的小鼠截短IL-36α蛋白进行纯化即可得到较高纯度的小鼠截短IL-36α蛋白。本发明小鼠截短IL-36α蛋白的成功制备，为探究IL-36α在各种小鼠炎症疾病模型中的作用及其分子机制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109576277B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN201910043737.4
申请日：2019-01-17
Applicant: 辽宁大学
IPC: C12N15/25 , C12N15/70 , C07K14/545
Abstract: 本发明涉及一种小鼠截短IL‑36α蛋白的生产方法。包括以下步骤：小鼠截短IL‑36α蛋白基因密码子优化与合成；PCR扩增获得小鼠截短IL‑36α片段；构建pET28a‑mIL‑36α重组载体；将pET28a‑mIL‑36α转化大肠杆菌BL21，构建重组工程菌；诱导小鼠截短IL‑36α蛋白表达，该工程菌表达的重组小鼠截短IL‑36α主要为可溶蛋白；用Ni‑NAT对表达的小鼠截短IL‑36α蛋白进行纯化即可得到较高纯度的小鼠截短IL‑36α蛋白。本发明小鼠截短IL‑36α蛋白的成功制备，为探究IL‑36α在各种小鼠炎症疾病模型中的作用及其分子机制奠定了基础。
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