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公开(公告)号:CN111705071A
公开(公告)日:2020-09-25
申请号:CN202010547528.6
申请日:2020-06-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/66 , C12N15/11 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种人工设计质粒pM5500及其在DNA marker制备中的应用,所述质粒的长度为5500bp,序列为:SEQ ID NO:1,包含高拷贝复制起始点序列和氨苄青霉素抗性基因编码序列,以及各种人工设计组合的DNA片段。该质粒在有限长度内包含了12个同种限制性内切酶识别位点,通过单酶切可产生1500、1000、750、500、250和100bp六种适用于中等分子量DNA marker制备的DNA片段,且各种片段的质量比为3:2:3:1:1:1。该质粒结构紧凑稳定,拷贝数高,易于大规模制备,以其为基础开发的DNA maker可广泛应用于生物学研究及生物技术领域。
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公开(公告)号:CN101851633B
公开(公告)日:2012-11-07
申请号:CN201010187255.5
申请日:2010-05-31
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种噬菌体核酸酶及其制备和应用。所述噬菌体核酸酶基因具有SEQ ID NO.2的序列。所述噬菌体核酸酶具有SEQ ID NO.1的序列。所述的噬菌体核酸酶的制备方法,包括如下步骤:1)通过重叠延伸PCR方法人工合成该噬菌体核酸酶基因;2)将步骤1)所得基因与表达载体连接,构建重组载体;3)用所述重组载体转化大肠杆菌感受态细胞,培养,表达;4)收集菌体,破碎,亲和纯化。上述核酸酶具有随机切刻和切割双链DNA的能力。本发明提供的方法能高效表达纯化获得该酶蛋白。
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公开(公告)号:CN101851633A
公开(公告)日:2010-10-06
申请号:CN201010187255.5
申请日:2010-05-31
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种噬菌体核酸酶及其制备和应用。所述噬菌体核酸酶基因具有SEQ ID NO.2的序列。所述噬菌体核酸酶具有SEQ ID NO.1的序列。所述的噬菌体核酸酶的制备方法,包括如下步骤:1)通过重叠延伸PCR方法人工合成该噬菌体核酸酶基因;2)将步骤1)所得基因与表达载体连接,构建重组载体;3)用所述重组载体转化大肠杆菌感受态细胞,培养,表达;4)收集菌体,破碎,亲和纯化。上述核酸酶具有随机切刻和切割双链DNA的能力。本发明提供的方法能高效表达纯化获得该酶蛋白。
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公开(公告)号:CN1382692A
公开(公告)日:2002-12-04
申请号:CN02114579.2
申请日:2002-05-17
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种小麦储藏蛋白HMW-GS 14基因的核酸序列和对应的蛋白序列,以及基于该序列通过生物技术方法改良小麦加工品质的应用。本发明涉及的HMW-GS 14基因是出现在中国优质面包小麦种子的一种储藏蛋白基因,该基因产可显著提高小麦的面筋弹性。根据该基因序列可以通过基于PCR分子标记方法进行定向育种,培育出新的优质小麦。根据该基因序列可以克隆该基因,构建该基因的各种表达载体,并通过基因枪、农杆菌介导、花粉管通道等转化方法将该基因导入小麦,以培育出加工品质优良的小麦品种及种质。
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公开(公告)号:CN116411001A
公开(公告)日:2023-07-11
申请号:CN202310387704.8
申请日:2023-04-12
Applicant: 西北农林科技大学 , 西安赛恩泽生物科技有限公司
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12Q1/6806 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种用于DNAMarker制备的紧凑型质粒的构建方法,该构建方法为:在参考质粒P1中的筛选标记基因S1内找到或引入一个目标限制性内切酶X的切点Q1,在不改变筛选标记基因S1对应蛋白序列和复制起始点序列Ori的前提下,以Q1为锚定点,引入更多限制性内切酶X识别位点,设计出目标质粒P2序列;以P2序列为蓝本,通过化学合成及扩增拼接方法获得目标质粒P2,即紧凑型质粒pM4850。本发明还提供了所述质粒的应用,该质粒长度4850bp,核苷酸序列为SEQ ID NO:5,包含36个限制性内切酶BamHI切点,单酶切可获得12种特征片段,大小依次为700bp、600bp、500bp、400bp、300bp、250bp、200bp、150bp、100bp、75bp、50bp和25bp,各片段的相对质量比为7:6:5:4:3:2.5:6:3:3:3:3:3,可作为小片段DNAMarker应用于科学研究和生物技术领域。
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公开(公告)号:CN111748610A
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN202010587867.7
申请日:2020-06-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6858
Abstract: 本发明公开了一种T7EI-like核酸酶反应缓冲体系、DNA错配检测方法及应用,涉及一种T7EI-like核酸酶的反应缓冲溶液配方,以及利用该缓冲体系增强该类核酸酶错配识别切割能力的应用。常规的反应缓冲体系中,T7EI-like核酸酶对插入缺失(InDel)导致的错配DNA具有较好的识别切割能力,而对单核苷酸多态性(SNP)导致的错配DNA的识别切割能力较差;本发明的反应缓冲体系中,T7EI-like核酸酶对两类错配DNA均有良好的识别切割能力。该反应缓冲体系的核心在于其特定的缓冲溶质配比、去垢剂浓度、二价金属离子及辅助蛋白配比。该发明可应用于基因编辑效率的检测、DNA样品中错误序列的消除、基因编辑个体的筛查、样本中InDel和SNP位点的检测筛选、将InDel和SNP位点转化为分子标记进行分子辅助育种。
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公开(公告)号:CN1683531A
公开(公告)日:2005-10-19
申请号:CN200310122234.5
申请日:2003-12-30
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及一种小麦低分子量麦谷蛋白亚基基因及其胚乳特异表达启动子的连续核酸序列及其应用,本发明以我国优质小麦品种小偃6号为材料,提供一种小麦低分子量麦谷蛋白亚基基因及其胚乳特异表达启动子的核酸序列及其应用,首次从小偃6号中克隆了Glu-D3位点的一种LMW-GS基因(XYGluD3-LMWGS1);并开展了基于该基因的分子标记和转基因研究,以培育出新的优质种质或品种。
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公开(公告)号:CN1191359C
公开(公告)日:2005-03-02
申请号:CN02114579.2
申请日:2002-05-17
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种小麦储藏蛋白HMW-GS 14基因的核酸序列和对应的蛋白序列,以及基于该序列通过生物技术方法改良小麦加工品质的应用。本发明涉及的HMW-GS 14基因是出现在中国优质面包小麦种子的一种储藏蛋白基因,该基因产可显著提高小麦的面筋弹性。根据该基因序列可以通过基于PCR分子标记方法进行定向育种,培育出新的优质小麦。根据该基因序列可以克隆该基因,构建该基因的各种表达载体,并通过基因枪、农杆菌介导、花粉管通道等转化方法将该基因导入小麦,以培育出加工品质优良的小麦品种及种质。
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公开(公告)号:CN111705071B
公开(公告)日:2023-03-10
申请号:CN202010547528.6
申请日:2020-06-16
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/66 , C12N15/11 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种人工设计质粒pM5500及其在DNA marker制备中的应用,所述质粒的长度为5500bp,序列为:SEQ ID NO:1,包含高拷贝复制起始点序列和氨苄青霉素抗性基因编码序列,以及各种人工设计组合的DNA片段。该质粒在有限长度内包含了12个同种限制性内切酶识别位点,通过单酶切可产生1500、1000、750、500、250和100bp六种适用于中等分子量DNA marker制备的DNA片段,且各种片段的质量比为3:2:3:1:1:1。该质粒结构紧凑稳定,拷贝数高,易于大规模制备,以其为基础开发的DNA maker可广泛应用于生物学研究及生物技术领域。
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