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公开(公告)号:CN110016078B
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN201910233889.0
申请日:2019-03-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/70 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用,本发明以PEDV N蛋白包被酶标板,纳米抗体BioNb2为阻断抗体,通过待检血清样品抑制纳米抗体BioNb2与PEDV N蛋白结合,以检测血清中猪流行性腹泻病毒特异性抗体;本发明的阻断ELISA方法能够排除抗原中的杂蛋白成分的干扰而具有良好的特异性,且操作简单,易于大范围推广,在猪流行性腹泻病毒的血清诊断方面具有良好的应用前景;本发明通过大量的实验优化阻断ELISA反应条件,使该方法用于猪流行性腹泻病毒抗体检测具有良好的重复性、特异性和灵敏性,与目前已有的商品化试剂盒相比,具有简便、快速、成本低廉等优势。
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公开(公告)号:CN106380516B
公开(公告)日:2019-10-25
申请号:CN201610892949.6
申请日:2016-10-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B的纳米抗体及其应用,属抗病毒研究技术领域。本发明通过构建NS5B特异的单域重链抗体文库,筛选抗NS5B特异性纳米抗体,构建稳定表达NS5B纳米抗体的MDBK细胞系并用BVDV感染,公开了特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B纳米抗体和其氨基酸序列,以及编码该纳米抗体的基因序列,还公开了NS5B纳米抗体在制备抗BVD病毒药物中的应用。
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公开(公告)号:CN110016078A
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201910233889.0
申请日:2019-03-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/70 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用,本发明以PEDV N蛋白包被酶标板,纳米抗体BioNb2为阻断抗体,通过待检血清样品抑制纳米抗体BioNb2与PEDV N蛋白结合,以检测血清中猪流行性腹泻病毒特异性抗体;本发明的阻断ELISA方法能够排除抗原中的杂蛋白成分的干扰而具有良好的特异性,且操作简单,易于大范围推广,在猪流行性腹泻病毒的血清诊断方面具有良好的应用前景;本发明通过大量的实验优化阻断ELISA反应条件,使该方法用于猪流行性腹泻病毒抗体检测具有良好的重复性、特异性和灵敏性,与目前已有的商品化试剂盒相比,具有简便、快速、成本低廉等优势。
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公开(公告)号:CN109678953A
公开(公告)日:2019-04-26
申请号:CN201811583463.X
申请日:2018-12-24
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: C07K16/10 , C07K2317/569 , C40B40/02 , C40B50/06
Abstract: 本发明公开了一种抗猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白N的VHH噬菌体展示文库的构建方法及用途,构架方法包括以下步骤:免疫后的双峰驼分离外周血淋巴细胞、淋巴细胞总RNA的提取及反转录获得cDNA,设计两对PCR扩增引物,获得目的片段,将获得的目的片段与噬菌粒载体pCANTAB-5E连接,将连接产物转化入TG1感受态细胞中并收获噬菌体抗体文库;成功构建抗猪流性腹泻病毒N蛋白的VHH噬菌体展示文库;计算文库库容量及文库的多样性;对所构建的文库进行质量评价。本发明建立的文库库容量大,多样性丰富等特点,对于建立猪流行性腹泻病毒的临床诊断方法,研究病毒的感染机理奠定了基础。
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公开(公告)号:CN109679952B
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN201811583181.X
申请日:2018-12-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种抗PRRSV感染的猪源miR‑c89,通过RT‑qPCR、TCID50和western blot的方法首次证明了来源于猪编码的miR‑c89能够显著抑制高致病性和低致病性PRRSV的复制和增殖,该micoRNA有望开发成为一种新型的防治猪蓝耳病的药物及用于抗猪蓝耳病的基因修饰猪的研制,为PRRSV的防控奠定基础。
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公开(公告)号:CN109628450A
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201811583462.5
申请日:2018-12-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/1138 , A61P31/14 , C12N2310/14
Abstract: 本发明公开了一种RXRβ基因及其siRNA在影响PRRSV复制中的应用,本发明利用siRNA特异性敲低RXRβ,然后通过qRT‑PCR、TCID50以及western blot方法检测了RXRβ对PRRSV感染宿主细胞的影响,并发现此宿主因子RXRβ被特异性敲低后具有显著抑制PRRSV复制和增殖的作用,该宿主因子RXRβ的特异性siRNA可以开发为预防和治疗PRRSV的药物,其对应基因RXRβ可用于研究抗PRRSV转基因猪。
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公开(公告)号:CN107815486A
公开(公告)日:2018-03-20
申请号:CN201711102208.4
申请日:2017-11-10
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: C12Q1/10 , G01N2333/255
Abstract: 本发明快速筛选产生沙门氏菌生物膜的方法,是在无菌条件下用接种环取出低温保存的沙门氏菌,划线接种于无菌琼脂培养基;将BHI培养物在无菌条件下放置,吸取刚果红染液,加入培养皿内对菌落及菌苔染色;产生沙门氏菌生物膜菌落及菌苔外圈颜色变红,菌落及菌苔表面呈现粗糙状;不产膜沙门氏菌菌落及菌苔无明显变化;结晶紫染色确定包括:液体培养,生物膜固定,染色。本发明将刚果红与结晶紫染色法有机结合,既可保证检测特异性,又能确保结果的准确性,达到产生沙门氏菌生物膜特异性筛选之目标。筛选效率高,成本低,具有较高的科研与实践价值。
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公开(公告)号:CN106539789A
公开(公告)日:2017-03-29
申请号:CN201610886115.4
申请日:2016-10-11
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K31/4025 , A61P31/14 , A61P1/12
CPC classification number: A61K31/4025
Abstract: 本发明涉及胆绿素在制备抗牛病毒性腹泻病毒药物上的应用,属于抗病毒研究技术领域,所述药物包括胆绿素和医药学上可接受的一种或多种辅料,其中胆绿素的抗牛病毒性腹泻病毒的有效浓度为50-200μmol/L。本发明首先采用qPCR、TCID50和Western Blot的方法检测胆绿素对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中复制的影响,进一步明确其对病毒吸附和内化的影响,然后检测不同浓度的胆绿素处理对MDBK细胞增殖活性的影响,明确了胆绿素在抗牛病毒性腹泻病毒上的作用,为制备抗牛病毒性腹泻病毒药物提供了依据。
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公开(公告)号:CN106380516A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610892949.6
申请日:2016-10-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B的纳米抗体及其应用,属抗病毒研究技术领域。本发明通过构建NS5B特异的单域重链抗体文库,筛选抗NS5B特异性纳米抗体,构建稳定表达NS5B纳米抗体的MDBK细胞系并用BVDV感染,公开了特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B纳米抗体和其氨基酸序列,以及编码该纳米抗体的基因序列,还公开了NS5B纳米抗体在制备抗BVD病毒药物中的应用。
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公开(公告)号:CN103342740A
公开(公告)日:2013-10-09
申请号:CN201310320409.7
申请日:2013-07-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种检测禽戊型肝炎病毒特异性抗体的阻断ELISA方法,本发明利用原核表达纯化的禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端268个氨基酸(aHEV-ORF2-268)为包被抗原,针对该区域的亲和层析纯化的单抗1H5为阻断抗体,通过大量实验优化阻断ELISA检测条件,使该方法具有良好重复性,特异性和敏感性。
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