一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN110016078B

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN201910233889.0

    申请日:2019-03-26

    Abstract: 本发明公开了一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用,本发明以PEDV N蛋白包被酶标板,纳米抗体BioNb2为阻断抗体,通过待检血清样品抑制纳米抗体BioNb2与PEDV N蛋白结合,以检测血清中猪流行性腹泻病毒特异性抗体;本发明的阻断ELISA方法能够排除抗原中的杂蛋白成分的干扰而具有良好的特异性,且操作简单,易于大范围推广,在猪流行性腹泻病毒的血清诊断方面具有良好的应用前景;本发明通过大量的实验优化阻断ELISA反应条件,使该方法用于猪流行性腹泻病毒抗体检测具有良好的重复性、特异性和灵敏性,与目前已有的商品化试剂盒相比,具有简便、快速、成本低廉等优势。

    一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN110016078A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910233889.0

    申请日:2019-03-26

    Abstract: 本发明公开了一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用,本发明以PEDV N蛋白包被酶标板,纳米抗体BioNb2为阻断抗体,通过待检血清样品抑制纳米抗体BioNb2与PEDV N蛋白结合,以检测血清中猪流行性腹泻病毒特异性抗体;本发明的阻断ELISA方法能够排除抗原中的杂蛋白成分的干扰而具有良好的特异性,且操作简单,易于大范围推广,在猪流行性腹泻病毒的血清诊断方面具有良好的应用前景;本发明通过大量的实验优化阻断ELISA反应条件,使该方法用于猪流行性腹泻病毒抗体检测具有良好的重复性、特异性和灵敏性,与目前已有的商品化试剂盒相比,具有简便、快速、成本低廉等优势。

    一种抗PEDV N蛋白的VHH噬菌体展示文库的构建方法及用途

    公开(公告)号:CN109678953A

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201811583463.X

    申请日:2018-12-24

    CPC classification number: C07K16/10 C07K2317/569 C40B40/02 C40B50/06

    Abstract: 本发明公开了一种抗猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白N的VHH噬菌体展示文库的构建方法及用途,构架方法包括以下步骤:免疫后的双峰驼分离外周血淋巴细胞、淋巴细胞总RNA的提取及反转录获得cDNA,设计两对PCR扩增引物,获得目的片段,将获得的目的片段与噬菌粒载体pCANTAB-5E连接,将连接产物转化入TG1感受态细胞中并收获噬菌体抗体文库;成功构建抗猪流性腹泻病毒N蛋白的VHH噬菌体展示文库;计算文库库容量及文库的多样性;对所构建的文库进行质量评价。本发明建立的文库库容量大,多样性丰富等特点,对于建立猪流行性腹泻病毒的临床诊断方法,研究病毒的感染机理奠定了基础。

    快速筛选产生沙门氏菌生物膜的方法

    公开(公告)号:CN107815486A

    公开(公告)日:2018-03-20

    申请号:CN201711102208.4

    申请日:2017-11-10

    CPC classification number: C12Q1/10 G01N2333/255

    Abstract: 本发明快速筛选产生沙门氏菌生物膜的方法,是在无菌条件下用接种环取出低温保存的沙门氏菌,划线接种于无菌琼脂培养基;将BHI培养物在无菌条件下放置,吸取刚果红染液,加入培养皿内对菌落及菌苔染色;产生沙门氏菌生物膜菌落及菌苔外圈颜色变红,菌落及菌苔表面呈现粗糙状;不产膜沙门氏菌菌落及菌苔无明显变化;结晶紫染色确定包括:液体培养,生物膜固定,染色。本发明将刚果红与结晶紫染色法有机结合,既可保证检测特异性,又能确保结果的准确性,达到产生沙门氏菌生物膜特异性筛选之目标。筛选效率高,成本低,具有较高的科研与实践价值。

    胆绿素在制备抗牛病毒性腹泻病毒药物上的应用

    公开(公告)号:CN106539789A

    公开(公告)日:2017-03-29

    申请号:CN201610886115.4

    申请日:2016-10-11

    CPC classification number: A61K31/4025

    Abstract: 本发明涉及胆绿素在制备抗牛病毒性腹泻病毒药物上的应用,属于抗病毒研究技术领域,所述药物包括胆绿素和医药学上可接受的一种或多种辅料,其中胆绿素的抗牛病毒性腹泻病毒的有效浓度为50-200μmol/L。本发明首先采用qPCR、TCID50和Western Blot的方法检测胆绿素对牛病毒性腹泻病毒在MDBK细胞中复制的影响,进一步明确其对病毒吸附和内化的影响,然后检测不同浓度的胆绿素处理对MDBK细胞增殖活性的影响,明确了胆绿素在抗牛病毒性腹泻病毒上的作用,为制备抗牛病毒性腹泻病毒药物提供了依据。

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