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公开(公告)号：CN111087468B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010069336.9
申请日：2020-01-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明采用PRRSV病毒液‑SD16作为免疫原，免疫Balb/c小鼠。经细胞融合，病毒感染Marc145细胞筛选克隆，获得高效分泌单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞系，获得鼠单克隆抗体5D9。用ELISA技术测定该单克隆抗体5D9的亚型为IgM型单克隆抗体。PRRSV‑I型和PRRSV‑II型病毒感染Marc145细胞，利用IFA技术用该单克隆抗体进行检测，证明单克隆抗体5D9对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒具有广谱反应性。随后用其进行病毒中和实验，利用Western blot技术和qPCR技术证明该单克隆抗体对PRRSV‑I和PRRSV‑II型病毒都具有中和活性，可阻止病毒入侵，保护机体免受感染。
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公开(公告)号：CN111171146B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN202010104052.9
申请日：2020-02-20
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种抗H9N2亚型禽流感病毒的纳米抗体、制备方法和应用，该纳米抗体氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过原核表达技术表达了H9N2亚型禽流感病毒的核衣壳蛋白，然后将其作为免疫原免疫双峰驼，构建噬菌体库，再利用噬菌体展示技术筛选获得了1株抗H9N2核衣壳蛋白的纳米抗体，并将该纳米抗体与辣根过氧化物酶(HRP)进行融合表达，成功制备了纳米抗体与HRP的融合蛋白，将该融合蛋白应用到检测鸡血清中抗H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗体中，发现该融合蛋白构建的检测方法灵敏度高，并且具有操作简单、不需要使用二抗、检测样品耗时短等优点。
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公开(公告)号：CN111471102B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202010325058.9
申请日：2020-04-23
Applicant: 西北农林科技大学 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明适用于生物技术领域，提供了一种编码基因、载体、抗独特型纳米抗体及其制备方法和应用，该抗独特型纳米抗体的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示。该抗独特型纳米抗体是通过噬菌体展示技术成功筛选到所需抗独特型纳米抗体的编码基因，接着，将该编码基因连接到毕赤酵母表达载体中，并电转化至毕赤酵母感受态细胞培养制得的。该抗独特型纳米抗体能够特异性地阻断单抗1E7与PCV2 Cap蛋白的结合，具有模拟PCV2 Cap关键抗原表位的作用，其可用于开发防治PCV2的抗独特性纳米抗体疫苗、诊断试剂及生物试剂等。
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公开(公告)号：CN104744572B
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201410503871.5
申请日：2014-09-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/08 , C07K5/103 , C07K16/10 , A61K39/29 , A61P31/14 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明利用传统的杂交瘤细胞技术制备了两株分泌抗禽和猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)共有抗原表位的单克隆抗体杂交瘤细胞系，命名为3E8和1B5，其细胞保藏号分别为CCTCC No：C201395和CCTCC No：C201396。本发明利用噬菌体随机7肽库试剂盒鉴定了上述两株单抗识别的共有抗原表位的氨基酸序列，分别为V/IPHD(SEQ ID No:1)和VKLYM(SEQ ID No:2)，同时分析了两个表位的模拟肽在禽和猪HEV血清学诊断中的应用。本发明公布的禽和猪HEV衣壳蛋白两个共有抗原表位的模拟肽，可以用于禽和猪HEV的快速诊断以及疾病流行的监控。另外，本发明公布的两株识别上述共有表位的单克隆抗体，也可以快速诊断禽和猪HEV。
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公开(公告)号：CN109705212A
公开(公告)日：2019-05-03
申请号：CN201811476025.3
申请日：2018-12-04
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , A61K39/395 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种抑制PRRS病毒复制的抗体、表达载体及治疗剂，所述抑制PRRS病毒复制的抗体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明的表达载体能够表达抗体治疗剂，所述抗体治疗剂能够进入细胞，并且特异性结合PRRS病毒非结构蛋白Nsp9，能抑制PRRS病毒在PAMs细胞中的增殖。抗体治疗剂，可用于开发成治疗PRRS的药物。利用酶联免疫实验，证明抗体治疗剂与PRRS病毒Nsp9的互作。将细胞与抗体治疗剂共孵育，利用间接免疫荧光实验证明了抗体治疗剂能够进入细胞。同时利用抗体治疗剂进行病毒抑制试验，证明了抗体治疗剂能够抑制PRRS病毒的复制。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103342740B
公开(公告)日：2018-01-12
申请号：CN201310320409.7
申请日：2013-07-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种检测禽戊型肝炎病毒特异性抗体的阻断ELISA方法,本发明利用原核表达纯化的禽戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端267个氨基酸(aHEV‑ORF2‑268)为包被抗原，针对该区域的亲和层析纯化的单抗1H5为阻断抗体，通过大量实验优化阻断ELISA检测条件，使该方法具有良好重复性，特异性和敏感性。
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公开(公告)号：CN106399313A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610866123.2
申请日：2016-09-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种抗PRRSV的microRNA样病毒小RNA序列及其用途和检测方法。本发明公布了该PRRSV-vsRNA1的成熟体序列以及编码PRRSV-vsRNA1的前体序列和二级结构。本发明通过不同方法验证了此PRRSV-vsRNA1在PRRSV感染的猪肺泡巨噬细胞(PAMs)及对于PRRSV高致病性毒株具有抑制作用。本发明阐明了抗PRRSV的PRRSV-vsRNA1可以特异性靶向PRRSV病毒非结构蛋白2(Nsp2)，从而具有抑制PRRSV在PAMs细胞中增殖的功能。本发明涉及的PRRSV-vsRNA1有望成为一种新型的防治猪蓝耳病的药物，为PRRSV的防控提供有效的方法。
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公开(公告)号：CN104710528A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201510111199.X
申请日：2015-03-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/85 , A61K39/395 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一株特异性抗PRRS病毒非结构蛋白Nsp9的纳米抗体，同时公布了该纳米抗体的VHH序列以及编码该纳米抗体的DNA序列。本发明还提供了一种表达载体，其可以在Marc145细胞中表达纳米抗体-eGFP融合蛋白。本发明的抗Nsp9的纳米抗体可以特异性结合PRRS病毒非结构蛋白Nsp9，并且具有抑制PRRS病毒经典毒株和高致病毒株在Marc-145细胞中增殖的功能。本发明的纳米抗体可开发成治疗PRRS的药物，其对应的基因可用于抗PRRS转基因猪的研制。
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公开(公告)号：CN112226408B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202011057070.2
申请日：2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/0784 , C12N5/071 , C12N5/0786 , G01N27/62 , G01N33/569 , C07K14/08 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明通过对免疫原（病原或蛋白抗原）上的有效抗原肽序列进行筛选，去除免疫原中对机体不具有免疫活性（即不能激活机体适应性免疫应答）的无用肽段，筛选出免疫活性较强，可高效刺激机体产生免疫应答的抗原肽。抗原肽相对于原始免疫原，因其序列较短，亲水性较强，因此易于在体外进行表达，并且可随意将不同抗原肽或不同免疫原来源的抗原肽串联制备复合抗原肽，或将同一抗原肽进行多次重复以增强T细胞识别，同时可与其他具有免疫增强蛋白等融合表达，进一步增强机体免疫系统对抗原肽所产生的免疫应答反应。
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公开(公告)号：CN112285347B
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202011062115.5
申请日：2020-09-30
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569 , G01N27/62 , C07K14/08
Abstract: 为阳性的抗原肽序列串联后在大肠杆菌中进行本发明涉及一种通过使用特异性抗体捕获 重组表达，作为人工抗原用于给定病原的特异性猪源抗原加工提呈细胞APCs上负责加工提呈抗 抗体检测。原的猪白细胞抗原II类DR分子（SLA‑DR），将SLA‑DR上提呈的抗原肽以三氟乙酸洗脱后，脱盐处理重悬后进行质谱分析以测定抗原肽氨基酸序列，鉴定出猪特定病原所有编码的蛋白中可被机体抗原提呈细胞所加工提呈的抗原肽序列，并通过基因工程的方法将以上方法获得的CD4+T表位抗原肽分别与NanoLuc荧光素酶融合后使用大肠杆菌进行体外重组表达并纯化，作为一种人工抗原与相应病原感染的猪血清样本进行ELISA检测，
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