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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111961686A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010888329.1
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体，通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，造成DNA双链断裂，使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复，再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除，从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑，可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号：CN111876422A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010778704.7
申请日：2020-08-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种可用于富集CRISPR/Cas9介导的精确NHEJ修复细胞的筛选报告系统，包括精确NHEJ修复筛选报告载体以及与该筛选报告载体共转染于目标编辑细胞的细胞基因组长片段打靶载体，精确NHEJ修复筛选报告载体包括筛选报告基因表达盒及两个sgRNA表达盒，所述筛选报告基因表达盒的转录区包括用于插入在药物筛选基因序列选定隔断位置的双sgRNA靶位点构建序列，双sgRNA靶位点分别以两个sgRNA表达盒转录的sgRNA作为打靶筛选报告基因表达盒的导引序列。本发明的筛选报告系统通过共转染并进行药物筛选，可以高效的富集目的基因长片段精确删除的阳性细胞克隆。
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公开(公告)号：CN116515904A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310388217.3
申请日：2023-04-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N9/22 , C12N15/113 , G01N21/64 , G01N15/14 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种红绿光切换式交通信号灯基因编辑阳性报告富集系统。构建了新型的红绿光“切换式”报告载体以及相应的验证用CRISPR/Cas系统的表达载体。通过CRISPR/Cas系统同时打靶基因组、报告载体，利用SSA修复机制对报告载体中的双荧光报告基因及抗性基因一体化表达盒进行修复。该报告富集系统可以简单、快速检测被转染细胞中的核酸酶活性，并高效富集基因编辑阳性细胞。
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公开(公告)号：CN111961686B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202010888329.1
申请日：2020-08-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9和PiggyBac实现双等位精确基因组编辑的系统。构建CRISPR/Cas9表达载体、PiggyBac系统介导的供体载体以及PiggyBac转座酶表达载体，通过CRISPR/Cas9表达载体打靶基因组，造成DNA双链断裂，使用PiggyBac系统介导的供体载体进行HDR修复，再利用PiggyBac转座酶表达载体进行筛选标记的删除，从而实现高效、精确的双等位无筛选标记的基因组编辑，可应用于畜禽转基因育种。
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公开(公告)号：CN111876422B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202010778704.7
申请日：2020-08-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种可用于富集CRISPR/Cas9介导的精确NHEJ修复细胞的筛选报告系统，包括精确NHEJ修复筛选报告载体以及与该筛选报告载体共转染于目标编辑细胞的细胞基因组长片段打靶载体，精确NHEJ修复筛选报告载体包括筛选报告基因表达盒及两个sgRNA表达盒，所述筛选报告基因表达盒的转录区包括用于插入在药物筛选基因序列选定隔断位置的双sgRNA靶位点构建序列，双sgRNA靶位点分别以两个sgRNA表达盒转录的sgRNA作为打靶筛选报告基因表达盒的导引序列。本发明的筛选报告系统通过共转染并进行药物筛选，可以高效的富集目的基因长片段精确删除的阳性细胞克隆。
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