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公开(公告)号：CN113980936A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111224621.4
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/38 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/14 , C12P19/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了β‑半乳糖苷酶突变体及其在制备长链GOS中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑半乳糖苷酶突变体R333M、N467S，在目前条件下，制备低聚半乳糖长链多糖的产率分别为41.06％、44.16％，较野生型的33.47％分别提高了24.29％、33.55％，提升了低聚半乳糖的益生效果，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN112094835A
公开(公告)日：2020-12-18
申请号：CN202011015343.7
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/14 , C12P19/02 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/04 , C12P19/44 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑葡萄糖苷酶突变体G224A、G224N、G224V，在最优条件下，制备低聚半乳糖产率分别为46.7％、43.8％和38.4％，分别是野生型的1.84倍、1.73倍和1.51倍；制备己基糖苷的产率分别为51.8％、56.9％和38.8％，分别是野生型的2.79倍、3.07倍和2.09倍，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN114214304A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111219626.8
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了GOS转化率提升的β‑半乳糖苷酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明中所使用的野生型β‑半乳糖苷酶已经具备良好的GOS合成能力，在此基础上，对其进行改造，得到的突变体在制备GOS的总转化率上相较于野生型有着一定的提升，其中突变体Y406F、R441K和Y563F的转化率分别为63.80％、64.27％以及64.02％，此转化率已属于行业内领先水平。同时，在本发明中，野生型生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖产率为23.33％，突变体Y406F和Y563F生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖的产率较野生型有进一步的提升。长链GOS产率也较野生型有了显著提升，增加了GOS的益生作用。
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公开(公告)号：CN112063605A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202011015802.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用，属于酶工程技术领域。本发明在Thermotoga sp.KOL6来源的β‑葡萄糖苷酶基础上，通过定点突变的方式获得突变体，以巴斯德毕赤酵母KM71为表达宿主，实现突变体基因在毕赤酵母中的高效表达。同时，本发明的复合酶可有效转化纤维素生成低聚龙胆糖；以磷酸膨胀纤维素和葡萄糖为底物酶催化转化制备低聚龙胆糖，复配纤维素酶和β‑葡萄糖苷酶突变体Q34G/Y200F时，原料的总转化率19.1％，相比野生型β‑葡萄糖苷酶分别提高74.7％。本发明的技术方案具有很高的工业应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113980936B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202111224621.4
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/38 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/14 , C12P19/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了β‑半乳糖苷酶突变体及其在制备长链GOS中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑半乳糖苷酶突变体R333M、N467S，在目前条件下，制备低聚半乳糖长链多糖的产率分别为41.60％、44.16％，较野生型分别提高了8.13％、11.14％，提升了低聚半乳糖的益生效果，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN114214304B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202111219626.8
申请日：2021-10-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了GOS转化率提升的β‑半乳糖苷酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明中所使用的野生型β‑半乳糖苷酶已经具备良好的GOS合成能力，在此基础上，对其进行改造，得到的突变体在制备GOS的总转化率上相较于野生型有着一定的提升，其中突变体Y406F、R441K和Y563F的转化率分别为63.81％、64.27％以及63.58％，此转化率已属于行业内领先水平。同时，在本发明中，野生型生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖产率为23.33％，突变体Y406F和Y563F生产的GOS中具有1,6键型的异乳糖的产率较野生型有进一步的提升。长链GOS产率也较野生型有了显著提升，增加了GOS的益生作用。
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公开(公告)号：CN116083404A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211386511.2
申请日：2022-11-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了β‑葡萄糖苷酶突变体及其在昆布二糖制备中的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的一系列β‑葡萄糖苷酶突变体，其中最优组合突变体W324M/H298F在最优条件下合成昆布二糖最高产率可达11.41％，产物浓度达到91.3g/L，高于目前已有报道，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN112094835B
公开(公告)日：2022-09-06
申请号：CN202011015343.7
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/42 , C12N15/56 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/14 , C12P19/02 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/04 , C12P19/44 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑葡萄糖苷酶突变体G224A、G224N、G224V，在最优条件下，制备低聚半乳糖产率分别为46.7％、43.8％和38.4％，分别是野生型的1.84倍、1.73倍和1.51倍；制备己基糖苷的产率分别为51.8％、56.9％和38.8％，分别是野生型的2.79倍、3.07倍和2.09倍，具有较好的工业化应用潜力。
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公开(公告)号：CN112063605B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN202011015802.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用，属于酶工程技术领域。本发明在Thermotoga sp.KOL6来源的β‑葡萄糖苷酶基础上，通过定点突变的方式获得突变体，以巴斯德毕赤酵母KM71为表达宿主，实现突变体基因在毕赤酵母中的高效表达。同时，本发明的复合酶可有效转化纤维素生成低聚龙胆糖；以磷酸膨胀纤维素和葡萄糖为底物酶催化转化制备低聚龙胆糖，复配纤维素酶和β‑葡萄糖苷酶突变体Q34G/Y200F时，原料的总转化率19.1％，相比野生型β‑葡萄糖苷酶分别提高74.7％。本发明的技术方案具有很高的工业应用价值。
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