兼备抗吞噬及肿瘤靶向能力的外泌体载药系统及其制备与应用

    公开(公告)号:CN116271068A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202211093429.0

    申请日:2022-09-08

    Abstract: 本发明公开了一种兼备抗吞噬及肿瘤靶向能力的外泌体载药系统及其制备与应用,肿瘤靶向基团通过融合蛋白的接头柔性连接到具有抗吞噬能力跨膜蛋白的细胞膜外侧,设计融合基因序列,插入到表达载体中,形成融合表达载体,再整合到待改造细胞的染色体中获得稳定表达融合蛋白的工程化细胞,用于分泌工程化外泌体。待改造的细胞包括裸细胞(永生化细胞系、原代细胞)、稳定表达治疗性核酸分子或蛋白的工程化细胞,前者细胞产生的外泌体可进一步包装治疗性分子治疗肿瘤,后者细胞产生的外泌体可分离纯化收集后直接用于肿瘤的治疗。本发明生产的工程化外泌体在体内的半衰期显著延长,提高治疗效果,并且在体内外显示出较强肿瘤靶向性和抗肿瘤效果。

    一种融合蛋白及其在制备司美格鲁肽前体多肽中的应用

    公开(公告)号:CN119735705A

    公开(公告)日:2025-04-01

    申请号:CN202411977287.3

    申请日:2024-12-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白及其在制备司美格鲁肽前体多肽中的应用,本发明将N(N≥1)个司美格鲁肽片段GLP‑1(11‑37)通过KR连接后,再与肠激酶酶切位点及融合蛋白标签依次融合串联表达,得到融合蛋白为:融合蛋白标签‑酶切位点‑N联司美格鲁肽片段GLP‑1(11‑37),所述融合蛋白标签为白蛋白亲和肽(SEQ ID NO.1)。将融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)感受态异源表达,构建工程菌株,后利用摇瓶进行发酵表达,极大的提高了菌体发酵密度,促进了目的蛋白在包涵体中的表达,提高了目的蛋白产量,具有良好的产业应用前景。融合蛋白进一步可以被商业化的肠激酶、KEX2酶以及羧肽酶B成功识别并切割释放出司美格鲁肽前体多肽。

    一种具有Fc免疫活性的EGFR×HER2双特异性纳米抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115819606A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202210855672.5

    申请日:2022-07-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有Fc免疫活性的EGFR×HER2双特异性纳米抗体及其制备方法与应用,为修饰有鼠李糖衍生物的EGFR×HER2双特异性纳米抗体。制备步骤如下:1)化学合成含Rha基团的衍生物;2)构建EGFR×HER2双特异性纳米抗体表达菌株,发酵纯化获得EGFR×HER2双特异性纳米抗体;3)采用酶连手段对双特异性纳米进行Rha衍生物修饰,获得具有Fc免疫活性的EGFR×HER2双特异性纳米抗体。Fc免疫活性包括Fc介导的ADCC、ADCP和CDC作用及Fc介导的半衰期延长作用。本发明具备更低的脱靶风险和显著提升的抗肿瘤活性,可应用于EGFR和HER2双阳的鳞状细胞癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌等恶性肿瘤的治疗。

    一种基于主客体自组装的载体蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN114042170A

    公开(公告)日:2022-02-15

    申请号:CN202111398966.1

    申请日:2021-11-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于主客体自组装的载体蛋白及其在疫苗中的应用,其中所述载体蛋白上至少化学偶联修饰一个金刚烷结构,所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清蛋白、白喉类毒素、白喉毒素的无毒突变体、破伤风类毒素、锁孔血蓝蛋白、细菌表达的蛋白中一种或两种以上形成的融合蛋白,所述金刚烷修饰的载体蛋白与beta‑环糊精及其衍生物(beta‑环糊精‑鼠李糖)形成主客体自组装结构。本发明所述的主客体自组装的载体蛋白能够促进抗原呈递细胞的吞噬、处理和呈递,从而有效提高疫苗分子的免疫原性,提高抗原相关的免疫反应。本发明不仅增强了对缀合的外源性抗原的免疫反应,还能缩短免疫反应时间,减少免疫次数。

    用于检测肿瘤标志物PD-L1的高灵敏度量子点探针、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113777295A

    公开(公告)日:2021-12-10

    申请号:CN202111083304.5

    申请日:2021-09-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测细胞表面肿瘤标志物PD‑L1的量子点荧光探针、制备方法及应用,该探针荧光强度高,提高了相关检测的灵敏度。包括步骤:1)识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白的设计、识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白的原核表达和纯化;2)含有生物素基团多肽的制备;3)识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白与生物素化多肽的体外酶法融合;生物素化的识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白的纯化;4)生物素化的识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白与链酶亲和素标记量子点的偶联探针制备。本发明的探针荧光强度高,结合流式细胞术、免疫荧光、酶联免疫吸附技术能有效检测细胞表面肿瘤标志物PD‑L1的表达,方法简便,检测灵敏度高。

    一类基于ZZ domain的广谱二抗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110078832A

    公开(公告)日:2019-08-02

    申请号:CN201910314766.X

    申请日:2019-04-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一类基于ZZ domain的广谱二抗及其制备方法和应用,属于抗体技术领域。该广谱二抗,具备两种功能域,分别行使结合IgG抗体的功能和报告基团功能;其中,行使结合IgG抗体功能的域,为衍生于金黄色葡萄球菌Protein A的ZZ domain,且可以结合多种来源的IgG;行使报告基团的域,是具备催化功能的酶或具备发光功能的蛋白。具备两种功能域,分别行驶结合IgG抗体(一抗)和报告基团功能。本发明的广谱二抗为融合蛋白,融合表达后其IgG抗体的结合能力和报告基团功能的发挥均不受影响。该广谱二抗可以结合多种物种的IgG一抗,例如可以结合小鼠源、大鼠源、人源、兔源等IgG。

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