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公开(公告)号：CN120005927A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510151084.7
申请日：2025-02-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
Abstract: 本发明提供了一种高效表达猪链球菌广谱抗原GDH的方法，属于生物技术领域。本发明结合代谢工程原理与蛋白高效表达理论，通过宿主菌理性改造、培养基组分筛选、以及发酵过程调控，实现了具有免疫原性GDH蛋白的高效表达；在500 L发酵罐上，应用pH值及溶氧分阶段控制策略，结合溶氧反馈控制补料策略，乙酸积累量降低至2.48 g/L，细胞浓度为48.47（OD600），GDH蛋白表达水平为4.13 g/L，实现了GDH蛋白高效表达的工业化生产。本发明高效表达GDH蛋白以可溶性表达为主，且具有良好的免疫原性，以采用蜂胶作为佐剂，免疫保护率达到70%，可作为猪链球菌亚单位疫苗的有效抗原成分。
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公开(公告)号：CN119065431A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411190203.1
申请日：2024-08-28
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 滨州医学院附属医院
IPC: G05D27/02
Abstract: 本发明涉及数据分析技术领域，具体涉及一种生物产品高效制备发酵过程调控系统，包括：捕捉层、识别层及控制层；制备物的状态样本数据通过捕捉层捕捉，并于捕捉层中储存，识别层同步获取捕捉层中储存的制备物状态样本数据，基于制备物状态样本数据识别制备物状态样本生物活性，控制层接收识别层中制备物状态样本生物活性识别结果，实时监测制备物环境参数，基于制备物状态样本生物活性识别结果对制备物环境参数进行实时调控，本发明通过提取样本，并配合显微镜下样本中菌群活动影像数据分析，对制备物中菌群活性进行综合分析，进而根据分析结果，对制备物的制备环境进行适应性调控。
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公开(公告)号：CN107308445A
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201710616191.8
申请日：2017-07-26
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
CPC classification number: A61K39/08 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , C07K14/33 , C07K2319/00 , C12N15/62
Abstract: 本发明公开了一种羊三联四防亚单位疫苗及其制备方法，属于动物疫病防控领域。本发明由产气荚膜梭菌β-ε融合蛋白、腐败梭菌α毒素重组蛋白和佐剂组成。本发明克隆、表达的产气荚膜梭菌C58-1株的β-ε(β和ε融合蛋白)和腐败梭菌C55-2株α毒素蛋白，纯化后与佐剂混合后配制成疫苗免疫小白鼠和家兔，利用《中国兽药典》二〇一五年版三部关于羊“三联四防疫苗”检验标准检验合格，并且攻毒保护试验结果表明，免疫上述蛋白的动物对产气荚膜梭菌B型、C型、D型和腐败梭菌具有100％保护力。因此，本发明可替代传统“三联四防”疫苗。
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公开(公告)号：CN117965354B
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202410023192.1
申请日：2024-01-04
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
IPC: C12N1/20 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵培养方法及培养基，通过在线活细胞检测系统实时监测禽多杀性巴氏杆菌生长情况，基于活细菌所带电荷，根据在线检测活细胞电容值准确掌握活菌浓度变化，精准确定葡萄糖及其他营养组分的补加时机和补加方式，并结合溶氧反馈，理性调控发酵过程，实现禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵。本发明完成禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵及产业化应用，细菌浓度及活菌数目分别是现用生产工艺的5.21倍、5.26倍。
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公开(公告)号：CN112877246B
公开(公告)日：2022-01-18
申请号：CN202110200360.6
申请日：2021-02-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种高效制备霍乱弧菌菌影的方法，包括：在霍乱弧菌工程菌的培养过程中加入阿拉伯糖进行诱导，诱导培养1～3h后，再次加入阿拉伯糖进行二次诱导：在诱导阶段，当检测到溶氧值突然下降时，添加卡那霉素，继续培养0.5～1.5h后活菌数目为0；诱导培养4～6h后，菌影形成率达到99％以上。本发明利用二次诱导策略，缩短诱导时间，收获菌影量提高了16％以上，且内毒素含量降低至初始工艺的1/5以下，显著提高了生产效率，降低生产成本；本发明制备的霍乱弧菌菌影形态均匀、完整，活菌数目为0，无需再进行灭活处理，安全性更高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112877246A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110200360.6
申请日：2021-02-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种高效制备霍乱弧菌菌影的方法，包括：在霍乱弧菌工程菌的培养过程中加入阿拉伯糖进行诱导，诱导培养1～3h后，再次加入阿拉伯糖进行二次诱导：在诱导阶段，当检测到溶氧值突然下降时，添加卡那霉素，继续培养0.5～1.5h后活菌数目为0；诱导培养4～6h后，菌影形成率达到99％以上。本发明利用二次诱导策略，缩短诱导时间，收获菌影量提高了16％以上，且内毒素含量降低至初始工艺的1/5以下，显著提高了生产效率，降低生产成本；本发明制备的霍乱弧菌菌影形态均匀、完整，活菌数目为0，无需再进行灭活处理，安全性更高。
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公开(公告)号：CN109355221B
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN201811313599.9
申请日：2018-11-06
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用于高密度发酵制备霍乱弧菌菌影的培养基及方法。其培养基组分包括：葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、KCl、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、甜菜碱、VB1、VH、氨苄霉素和氯化胆碱，其pH值为7.30～7.50。其方法是在培养过程中，加入国产阿拉伯糖进行诱导；诱导阶段，以一定的补加速率补加一定营养物质与抗生素进行诱导，菌影形成率达到99％以上。本发明可以实现大量生产霍乱弧菌菌影，能满足大规模生产霍乱弧菌菌影佐剂的需求。
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公开(公告)号：CN117965354A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410023192.1
申请日：2024-01-04
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
IPC: C12N1/20 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵培养方法及培养基，通过在线活细胞检测系统实时监测禽多杀性巴氏杆菌生长情况，基于活细菌所带电荷，根据在线检测活细胞电容值准确掌握活菌浓度变化，精准确定葡萄糖及其他营养组分的补加时机和补加方式，并结合溶氧反馈，理性调控发酵过程，实现禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵。本发明完成禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵及产业化应用，细菌浓度及活菌数目分别是现用生产工艺的5.21倍、5.26倍。
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公开(公告)号：CN112225781B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN202010915134.1
申请日：2020-09-03
Applicant: 清源生物(深圳)有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 滨州医学院附属医院 , 清源之光(武汉)生物科技有限公司 , 清源生物(江苏)有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P21/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于免疫技术领域，具体涉及一种高效表达新型冠状病毒N蛋白的方法。本发明按照2.0％‑3.0％的接种量将种子液接种至发酵培养基中，培养温度为35‑37℃，pH值维持在7.3‑7.5，维持溶氧水平在30％左右；当初始碳源耗尽后，根据溶氧反馈补料策略，溶氧水平升至50％‑60％时补加50％‑80％甘油溶液；溶氧水平降至20％‑30％时停止补加，如此反复；当细菌浓度达到1.0‑3.0时，加入0.3‑1mM IPTG进行诱导，且继续培养2h后，再次加入0.3mM IPTG进行二次诱导，总诱导为6‑8h。可以实现新冠病毒截短N蛋白的可溶性高效表达，能满足大规模生产可溶性新冠病毒N蛋白的需求。
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公开(公告)号：CN107308445B
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN201710616191.8
申请日：2017-07-26
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了一种羊三联四防亚单位疫苗及其制备方法，属于动物疫病防控领域。本发明由产气荚膜梭菌β‑ε融合蛋白、腐败梭菌α毒素重组蛋白和佐剂组成。本发明克隆、表达的产气荚膜梭菌C58‑1株的β‑ε(β和ε融合蛋白)和腐败梭菌C55‑2株α毒素蛋白，纯化后与佐剂混合后配制成疫苗免疫小白鼠和家兔，利用《中国兽药典》二〇一五年版三部关于羊“三联四防疫苗”检验标准检验合格，并且攻毒保护试验结果表明，免疫上述蛋白的动物对产气荚膜梭菌B型、C型、D型和腐败梭菌具有100％保护力。因此，本发明可替代传统“三联四防”疫苗。
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