一种联合微生物和提金剂的绿色环保提金方法

    公开(公告)号:CN116790900B

    公开(公告)日:2024-02-23

    申请号:CN202310842796.4

    申请日:2023-07-10

    Abstract: 本发明公开了一种联合微生物和提金剂的绿色环保提金方法,属于黄金矿物加工领域。本发明利用高效的嗜酸菌群对矿石进行氧化和浸出处理:通过微生物氧化矿石中的硫、铁进行生长代谢产生三价铁和硫酸,同时将砷、锑等有毒重金属释放到溶液中;金单质由于其不溶性,和无法被生物氧化的二氧化硅等物质一起形成沉淀,因此通过固液分离的方法可以实现液体和固体物的分离。微生物浸出液中的重金属可以通过吸附、沉淀的方式回收,菌液可实现循环利用。微生物处理后的固体物实现了金的富集和有毒离子的去除,再利用环保低毒的提金剂对金进行提取,提取后的废渣由于毒性较低,对环境危害较小,同时大大提供了金浸出率。

    一种获得D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体的方法

    公开(公告)号:CN117187227A

    公开(公告)日:2023-12-08

    申请号:CN202311145779.1

    申请日:2023-09-06

    Abstract: 本发明提出了一种获得D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体的方法,属于蛋白质工程领域,具体属于生物酶酶制剂技术领域。本发明中通过同源建模、及模型优化获得DPE三维结构;同源序列比对,确定DPE催化位点和活性口袋;底物分子与过渡态DPE分子对接获得二元结构复合物;对复合物进行分子动力学优化;底物与DPE蛋白结合差异化分析,挑选能量差异最大的氨基酸作为潜在突变位点;确定突变原则后对潜在突变位点进行突变,获得目标突变体。本发明方法利用计算机辅助酶分子改造技术,可以显著增加酶蛋白有效突变体获取概率。

    一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的方法

    公开(公告)号:CN107881189A

    公开(公告)日:2018-04-06

    申请号:CN201711145752.7

    申请日:2017-11-17

    Applicant: 山东大学

    CPC classification number: C12N15/74 C12N1/20 C12N1/38

    Abstract: 本发明公开了一种有效提高嗜酸性氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的方法,是以如下方式实现:(1)构建重组菌A.ferrooxidans(pJRD215-taq-afeI),实现增加酰基高丝氨酸内酯合成酶基因(afeI)的拷贝数,通过过表达afeI基因增加酰基高丝氨酸内酯(AHL)的含量,达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力;或(2)在野生型A.ferrooxidans培养过程中,添加5.4×10-3~10×10-3mg/mL量外源的酰基高丝氨酸内酯(AHL),通过增加AHL含量达到提高A.ferrooxidans的硫氧化能力。本发明提供的提高氧化亚铁硫杆菌硫氧化能力的策略在提高生物冶金工业浸矿效率上具有广阔的开发前景。

    一种带侧链的D-阿洛酮糖3-差向异构酶固定化酶的制备方法

    公开(公告)号:CN106480005A

    公开(公告)日:2017-03-08

    申请号:CN201610898960.3

    申请日:2016-10-14

    Applicant: 山东大学

    CPC classification number: C12N11/08 C12N9/90 C12Y501/03

    Abstract: 本发明提供了一种带侧链的D-阿洛酮糖3-差向异构酶固定化酶的制备方法,是构建表达带侧链的D-阿洛酮糖3-差向异构酶的工程菌,进行发酵培养得到菌体,然后破碎细胞获得带侧链的D-阿洛酮糖3-差向异构酶的上清液,再用离子交换树脂吸附酶,得到带侧链的D-阿洛酮糖3-差向异构酶固定化酶。利用这种方法固定化酶,无需对酶进行分离纯化,可以根据调节pH值的大小改变酶蛋白的带电量,并利用酶分子连接的带电荷的寡聚氨基酸侧链与离子交换树脂之间的电荷吸附作用将酶蛋白固定在树脂上,操作简单,并且酶与载体之间的结合力强不易脱落,可以反复多次使用,在降低成本的基础上可用于连续生产或在反应器中进行搅拌反应,应用前景广阔。

    嗜酸性喜温硫杆菌的基因无痕敲除和整合方法

    公开(公告)号:CN102604929B

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201210089108.3

    申请日:2012-03-29

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明公开了一种无痕敲除嗜酸性喜温硫杆菌染色体基因或将外源基因插入染色体的方法,是将含有大范围核酸内切酶I-SceI酶切位点的同源重组质粒采用接合转移的方式转入喜温硫杆菌中,同时利用细胞自身的同源重组系统,将同源重组质粒定向插入到喜温硫杆菌染色体中,筛选到的单交换子用电转化法转入I-SceI表达质粒,在I-SceI酶切断染色体的压力下,单交换子染色体发生第二次同源重组,优化筛选到双交换菌株,实现了基因的敲除或插入。本发明同时构建了用于同源重组的自杀型质粒载体pSDUDI,和有效表达I-SceI酶的质粒pSDU1-I-SceI,为喜温硫杆菌中染色体基因的无痕敲除或整合提供了便利。本发明方法为喜温硫杆菌的深入研究和改造提供了新的途径。

    利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法

    公开(公告)号:CN101250569A

    公开(公告)日:2008-08-27

    申请号:CN200810015482.2

    申请日:2008-04-02

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用博德特氏菌转化胆固醇生产低分子量透明质酸的方法,其涉及的步骤为:(1)菌种选择;(2)斜面培养;(3)种子培养;(4)扩大培养;(5)收集发酵产物;(6)低分子量透明质酸分离;(7)乙醇沉淀;(8)产物干燥。本发明利用微生物转化胆固醇生成重要的甾体类药物的过程中,同时获得高附加值的低分子量透明质酸,工艺步骤简单,成本低,产率较高,具有重要的理论意义和极好的市场前景,能产生巨大的经济效益。

    用于嗜酸性喜温硫杆菌的IPTG诱导型启动子载体及其应用

    公开(公告)号:CN115011625A

    公开(公告)日:2022-09-06

    申请号:CN202210622934.3

    申请日:2022-06-02

    Applicant: 山东大学

    Abstract: 本发明公开了一种适用于嗜酸性喜温硫杆菌的IPTG诱导型启动子载体,该载体命名为pJRD215‑lacI‑Ptac(I(II)‑luc,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;本发明还公开了所述IPTG诱导型启动子载体在嗜酸性喜温硫杆菌中诱导表达目的基因的应用或在嗜酸性喜温硫杆菌中研究基因表达调控规律的应用。本发明为嗜酸性喜温硫杆菌的基因功能研究提供了有效的诱导型启动子载体,将其可用于人为高效表达目的基因,利用IPTG诱导型启动子可以在A.caldus中高效的研究基因表达调控规律,为这种微生物在工业应用过程中的开发和设计提供了有力的分子工具。

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