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公开(公告)号:CN1274835C
公开(公告)日:2006-09-13
申请号:CN200410067343.6
申请日:2004-10-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域,具体为一种结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的融合表达方法。它将esat-6基因和人α-2a干扰素基因串联起来,两者间的linker为人肠激酶识别序列,将重组融合基因的DNA片段插入表达载体p PIC9K,电击导入毕赤氏酵母菌株SMD1168中,实现ESAT-6融合蛋白的高效分泌表达。经疏水层析和离子交换获得纯的ESAT-6蛋白。
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公开(公告)号:CN1320119C
公开(公告)日:2007-06-06
申请号:CN200410089315.4
申请日:2004-12-09
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物工程技术领域,具体为一种人载脂蛋白ApoA I在毕赤氏酵母胞内表达的方法。它将人工合成的apoA I基因插入胞内表达质粒pPIC3.5k,电击导入毕赤氏酵母菌株GS115,经摇瓶发酵和甲醇诱导,在酵母细胞内有明显的rApoA I蛋白表达,其分子质量与人血浆中提取的ApoA I相同。
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公开(公告)号:CN101144061B
公开(公告)日:2012-05-02
申请号:CN200710094018.2
申请日:2007-08-14
Applicant: 上海华冠生物芯片有限公司 , 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种产人胃蛋白酶原的酵母工程菌,该酵母工程菌是由重组表达载体转化的酵母菌,该重组表达载体包含人胃蛋白酶原基因。本发明还公开了该酵母工程菌的制备方法和应用。本发明的酵母工程菌,实现了人胃蛋白酶原C在毕赤氏甲醇酵母中高效分泌表达,其表达量在600mg/L以上,且本发明的重组PGC与人胃组织提取的PGC在免疫原性和蛋白酶活性上都保持一致,可广泛应用于医药、食品、化工等众多领域,具有非常好的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号:CN101144061A
公开(公告)日:2008-03-19
申请号:CN200710094018.2
申请日:2007-08-14
Applicant: 上海华冠生物芯片有限公司 , 复旦大学
Abstract: 本发明公开了一种产人胃蛋白酶原的酵母工程菌,该酵母工程菌是由重组表达载体转化的酵母菌,该重组表达载体包含人胃蛋白酶原基因。本发明还公开了该酵母工程菌的制备方法和应用。本发明的酵母工程菌,实现了人胃蛋白酶原C在毕赤氏甲醇酵母中高效分泌表达,其表达量在600mg/L以上,且本发明的重组PGC与人胃组织提取的PGC在免疫原性和蛋白酶活性上都保持一致,可广泛应用于医药、食品、化工等众多领域,具有非常好的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号:CN1603415A
公开(公告)日:2005-04-06
申请号:CN200410067343.6
申请日:2004-10-21
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域,具体为一种结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤氏酵母中的融合表达方法。它将esat-6基因和人α-2a干扰素基因串联起来,两者间的linker为人肠激酶识别序列,将重组融合基因的DNA片段插入表达载体p PIC9K,电击导入毕赤氏酵母菌株SMD1168中,实现ESAT-6融合蛋白的高效分泌表达。经疏水层析和离子交换获得纯的ESAT-6蛋白。
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公开(公告)号:CN101126088B
公开(公告)日:2011-08-03
申请号:CN200710044022.8
申请日:2007-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体为一种重组人载脂蛋白Al米兰突变体(rAIM)在毕赤酵母中分泌表达的方法。将突变后的apoAI—milano cDNA插入表达质粒pPIC9k,电击导入毕赤酵母GS115,通过对摇瓶培养基和培养条件的优化,发酵上清液中有明显的rAIM表达,其分子量与人血浆中提取的ApoAI相同。纯化后的rAIM具有磷脂结合活性。
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公开(公告)号:CN101126088A
公开(公告)日:2008-02-20
申请号:CN200710044022.8
申请日:2007-07-19
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体为一种重组人载脂蛋白AI米兰突变体(rAIM)在毕赤酵母中分泌表达的方法。将突变后的apoAI-milano cDNA插入表达质粒pPIC9k,电击导入毕赤酵母GS115,通过对摇瓶培养基和培养条件的优化,发酵上清液中有明显的rAIM表达,其分子量与人血浆中提取的ApoAI相同。纯化后的rAIM具有磷脂结合活性。
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公开(公告)号:CN1637145A
公开(公告)日:2005-07-13
申请号:CN200410089315.4
申请日:2004-12-09
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物工程技术领域,具体为一种人载脂蛋白ApoA I在毕赤氏酵母胞内表达的方法。它将人工合成的apoA I基因插入胞内表达质粒pPIC3.5k,电击导入毕赤氏酵母菌株GS115,经摇瓶发酵和甲醇诱导,在酵母细胞内有明显的rApoA I蛋白表达,其分子质量与人血浆中提取的ApoA I相同。
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公开(公告)号:CN1594582A
公开(公告)日:2005-03-16
申请号:CN200410025581.0
申请日:2004-06-30
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,涉及一种制备人载脂蛋白A-I(ApoA-I)的方法。具体涉及利用毕赤酵母系统,通过构建重组工程菌株、表达、分离纯化获得高效生产人载脂蛋白A-I的方法。本发明通过基因工程手段将来源于天然的apoA-I基因重组至P.pastoris宿主菌,表达水平可高达200mg/L,表达产物经冷丙酮分级沉淀和-Sepharose分离纯化获得电泳纯的ApoA-I蛋白。经Western-blot鉴定、蛋白质谱检测、N端氨基酸测序、细胞结合活性测定均与人血来源的ApoA-I蛋白一致。
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