公开(公告)号：CN101640085A

公开(公告)日：2010-02-03

申请号：CN200910069541.9

申请日：2009-07-03

Applicant: 南开大学

Inventor： 张奇 ,  白钢 ,  高智慧 ,  汤宇 ,  王龙 ,  白芳 ,  曹宇

IPC: H01F1/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/10 ,  C12P21/02 ,  C12R1/19 ,  C07H21/02

Abstract: 一种分离mRNA的纤维素磁性微米材料的制备及应用。本发明采用基因工程技术将浅紫灰链霉菌的链霉亲和素基因定向克隆至含有纤维素结合域标签的pET系列载体，构建了同时具有生物素结合活性和纤维素结合活性的双功能融合蛋白CBD-SA的载体，并转入E.coli BL21感受态菌株，经IPTG低温诱导表达，获得高含量的CBD-SA融合表达蛋白。利用CBD-SA作为生物桥联剂，以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法，使纤维素磁性微米材料活化，活化后能够高效率的结合生物素化的试剂，得到可用于蛋白或核酸分离的磁性微米材料。本发明提供的纤维素磁性微米材料可用于生物样品中mRNA的分离提取等。

公开(公告)号：CN101640085B

公开(公告)日：2011-06-01

申请号：CN200910069541.9

申请日：2009-07-03

Applicant: 南开大学

Inventor： 张奇 ,  白钢 ,  高智慧 ,  汤宇 ,  王龙 ,  白芳 ,  曹宇

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/10 ,  C12P21/02 ,  C07H21/02 ,  H01F1/00 ,  C12R1/19

Abstract: 一种分离mRNA的纤维素磁性微米材料的制备及应用。本发明采用基因工程技术将浅紫灰链霉菌的链霉亲和素基因定向克隆至含有纤维素结合域标签的pET系列载体，构建了同时具有生物素结合活性和纤维素结合活性的双功能融合蛋白CBD-SA的载体，并转入E.coli BL21感受态菌株，经IPTG低温诱导表达，获得高含量的CBD-SA融合表达蛋白。利用CBD-SA作为生物桥联剂，以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法，使纤维素磁性微米材料活化，活化后能够高效率的结合生物素化的试剂，得到可用于蛋白或核酸分离的磁性微米材料。本发明提供的纤维素磁性微米材料可用于生物样品中mRNA的分离提取等。