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公开(公告)号：CN119592488A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411785995.7
申请日：2024-12-06
Applicant: 南开大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , A62D3/02 , C12R1/01 , A62D101/04 , A62D101/28
Abstract: 本发明属于基因工程菌株构建技术领域，具体涉及一种降解除草剂2,4‑D的工程菌及其构建方法和应用。本发明提供一种降解除草剂2,4‑D的工程菌，所述工程菌以渴望盐单胞菌(Halomonas cupida)J9为基础菌；所述渴望盐单胞菌J9的基因组非功能位点插入有tfdA、tfdB、tfdC、tfdD、tfdE和tfdF基因。本发明所述工程菌(J9U2,4‑D)以H.cupida J9作为基础菌，能够在高盐浓度环境中生存并维持活性，迅速高效地降解2,4‑D，并将其完全矿化，能够有效地将有害的污染物转化为无害的物质，减少了环境中的持久性污染，并减少处理成本，降低对环境的负面影响。
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公开(公告)号：CN117802027A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410041341.7
申请日：2024-01-11
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种盐单胞菌J9U及其衍生菌的构建方法、PHA制备方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明将upp基因的上下游同源臂序列与自杀质粒pK18mobsacB连接，得到打靶载体pK18Δupp，将其转入到渴望盐单胞菌J9中，发生两次同源重组，即得J9U，该构建方法同源重组效率极高，高达100％。J9UΔxylD‑P8xylA菌株利用木糖为唯一碳源发酵生产PHA的最高产量为2.81g/L，且该菌株在木糖和葡萄糖共利用方面是一株优势的底盘菌株，在木质纤维素生物转化方面具有优越的生长和PHA产量优势，极大地降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN116808276A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310805214.5
申请日：2023-07-03
Abstract: 本发明公开了一种具有表皮细胞活化功能的重组三元融合蛋白敷料的制备方法。该敷料是基于国际同行以及本实验室对COL3A1和IFN‑κ蛋白功能和性质的研究而设计的融合蛋白。具体方法为运用overlap extension PCR技术，获得了以氨基酸序列GGSGG为linker的COL3A1与IFN‑κ共价连接的融合基因片段并添加6×His标签。将目的基因克隆入原核表达载体pET30(本实验室改造)后获得带有MBP标签的融合蛋白COL3A1‑IFN‑κ。扩大培养后，经Ni‑NTA柱亲和层析，即可获得纯度达到90％以上的MBP‑IFN‑κ‑COL3A1。我们在THP‑1细胞中验证了该融合蛋白对沙门氏菌的抵抗作用，同时在小鼠上我们验证了该融合蛋白促进创口愈合和抵抗沙门氏菌侵染的作用。最终证明MBP‑IFN‑κ‑COL3A1均一性好，易于纯化，活性高，无副作用，非常适合作为活化表皮细胞的敷料。
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公开(公告)号：CN117327666A
公开(公告)日：2024-01-02
申请号：CN202311407966.2
申请日：2023-10-27
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种铜绿假单胞菌噬菌体及其应用，属于噬菌体技术领域。本发明提供的铜绿假单胞菌噬菌体为铜绿假单胞菌噬菌体PAOP1，保藏编号为CGMCC No.45672，为一种新型噬菌体。本发明噬菌体对高温和酸碱的耐受性强，能有效裂解铜绿假单胞菌，其分离鉴定不仅可丰富噬菌体种质资源库，还可为铜绿假单胞菌的生物防控提供一种可选择的基础材料；可有效抑制浮游态细菌生长，还能够有效破坏生物膜结构，可用于医疗器械表面及医院环境的日常消毒，安全系数高，应用范围广。
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公开(公告)号：CN106754591B
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN201611048418.5
申请日：2016-11-24
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种以恶臭假单胞菌为出发菌株建立三氯丙烷降解菌的方法。本发明属于环境技术修复领域，涉及一种在恶臭假单胞菌中稳定高效表达三氯丙烷降解途径中三个基因dhaA31，hheC和echA的方法及该工程菌的实际应用。优化外源基因的密码子，替换原始基因的启动子及核糖体结合位点，使用无痕的插入方法将优化后的表达框分别整合至恶臭假单胞菌的基因组中，得到稳定且高效表达三氯丙烷降解基因的工程菌。工程菌株接种至工业污水小试装置中，可以在两天内降解2mM/L的三氯丙烷。该发明的工程菌株在小试装置中的出色表现，使其在大规模处理工业污染废水中具有巨大的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112029698A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010958992.4
申请日：2020-09-14
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种降解有机磷农药的工程菌及其构建方法，属于微生物技术领域，将mpd基因、opd基因、vgb基因和gfp基因插入P.putida KT2440宿主菌中，得到；插入顺序为mpd-opd-vgb-gfp。本发明提供的工程菌株能够在培养条件下正常生长，并能稳定的表达外源基因。
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公开(公告)号：CN106754591A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611048418.5
申请日：2016-11-24
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种以恶臭假单胞菌为出发菌株建立三氯丙烷降解菌的方法。本发明属于环境技术修复领域，涉及一种在恶臭假单胞菌中稳定高效表达三氯丙烷降解途径中三个基因dhaA31，hheC和echA的方法及该工程菌的实际应用。优化外源基因的密码子，替换原始基因的启动子及核糖体结合位点，使用无痕的插入方法将优化后的表达框分别整合至恶臭假单胞菌的基因组中，得到稳定且高效表达三氯丙烷降解基因的工程菌。工程菌株接种至工业污水小试装置中，可以在两天内降解2mM/L的三氯丙烷。该发明的工程菌株在小试装置中的出色表现，使其在大规模处理工业污染废水中具有巨大的潜力。
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公开(公告)号：CN119638540A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411806635.0
申请日：2024-12-10
Applicant: 南开大学
IPC: C07B59/00 , C07B35/02 , C07C67/303 , C07C69/612 , C07C69/616 , C07C69/65 , C07C69/734 , C07C69/732 , C07C69/608 , C07C69/40 , C07C69/618 , C07C253/30 , C07C255/57 , C07C255/33 , C07D333/24 , C07D207/337 , C07D215/12 , C07D307/54 , C07D295/192 , C07C231/12 , C07C233/07 , C07C233/11 , C07D207/408
Abstract: 本发明提供了一种用于α,β‑不饱和酯、腈、酰胺还原的方法，包括以下步骤：将底物溶于MeOD和MeCN中，加入添加剂，搅拌，加入镁屑，得到混合物；混合物先在水浴中搅拌，之后在室温下搅拌；反应结束后，向混合物中加入有机溶剂后抽滤，抽滤后滤液洗涤，有机相干燥、抽滤、减压浓缩，剩余物提纯，得到产物；所述添加剂为I2。本发明的Mg/CH3OD体系可用于α,β‑不饱和酯、酰胺和腈的还原氘化，该反应体系条件温和，易于后处理，能够兼容多种官能团，有着较高的产率和氘代率，氘源廉价，不含溶解金属和过渡金属，试剂易于处理。
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公开(公告)号：CN118389561A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410643609.4
申请日：2024-05-23
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种大片段DNA组装方法及其应用。本发明将大片段DNA通过PCR方式转变为小片段DNA，然后将小片段DNA交替整合到含有两种不同抗性基因(氯霉素抗性基因、四环素抗性基因)的pBR322质粒上，接着再将这些新构建的质粒依次转化到底盘细胞中，实现大片段DNA的组装。本发明大片段DNA组装方法可方便、高效地对酿酒酵母染色体进行组装，为人工设计合成酿酒酵母长染色体提供了基础。同时，采用本发明组装方法能够在枯草芽孢杆菌体内组装一条完整的PNP降解途径，并成功构建了高效PNP矿化工程菌，该方法构建的工程菌具有与野生菌株相似的生长趋势，外源基因能够稳定表达，实现PNP矿化功效，为农业环境的修复提供一种可行方案。
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公开(公告)号：CN116731944A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310723544.X
申请日：2023-06-19
Applicant: 南开大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/53 , C12N15/31 , A62D3/02 , C12R1/01 , A62D101/26 , A62D101/28
Abstract: 本发明属于基因工程菌构建技术领域，涉及一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株及其构建方法和应用。本发明提供了一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株，所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株为基因组中upp基因缺失且插入强启动子和PNP矿化途径基因的渴望盐单胞菌(Halomonascupida)J9菌株。本发明所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株不仅能够高效修复PNP环境污染，而且对高盐极端环境胁迫有很好的耐受能力。
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