公开(公告)号：CN102146422B

公开(公告)日：2013-08-07

申请号：CN201110025759.1

申请日：2011-01-24

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 郝宁 ,  严明 ,  郝思清 ,  李艳 ,  许晟 ,  蔡萍 ,  安明东 ,  欧阳平凯

IPC: C12P7/46

Abstract: 本发明公开了一种丁二酸的发酵生产工艺，以谷氨酸棒杆菌为生产菌株，先进行好氧富集，再进行厌氧发酵生产丁二酸，在厌氧发酵过程中CO2的提供以添加NH4HCO3、或(NH4)2CO3、或NH4OH与CO2的形式，或上述三种形式中任意两种或三种的组合。利用本发明的方法，最终回收有机酸时，避免大量金属离子的污染处理问题，同时可以回收利用NH4Cl，或者由于废液成分简单，可以制成氮肥，用于农业生产，从而在产品处理上节约成本，同时降低环境污染。

公开(公告)号：CN102286556A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110225388.1

申请日：2011-08-08

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 严明 ,  郝宁 ,  安明东 ,  许晟 ,  蔡萍 ,  许琳 ,  李艳 ,  欧阳平凯

IPC: C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种山梨糖还原酶在生物法制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达5.6U/mg，其对底物的得率高达90%、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。

公开(公告)号：CN102559528B

公开(公告)日：2013-08-21

申请号：CN201210029158.2

申请日：2012-02-09

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 严明 ,  李艳 ,  刘欢 ,  许琳 ,  郝宁 ,  魏淼 ,  许昇 ,  安明东 ,  王珊珊 ,  安芳芳 ,  郝思清 ,  顾金海

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63 ,  C12N9/10 ,  C12P19/56 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌；其中，所述的UGT76G1编码基因为GenBank，No.GenBank：AY345974.1，该基因序列命名为UGT。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及在生产莱鲍迪甙A中的应用。本发明在不外加昂贵UDPG的情况下，以廉价碳源葡萄糖为底物，调节酵母体内UDPG的代谢途径，全细胞催化St甙生成rebaudioside A。

公开(公告)号：CN102146422A

公开(公告)日：2011-08-10

申请号：CN201110025759.1

申请日：2011-01-24

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 郝宁 ,  严明 ,  郝思清 ,  李艳 ,  许晟 ,  蔡萍 ,  安明东 ,  欧阳平凯

IPC: C12P7/46

Abstract: 本发明公开了一种丁二酸的发酵生产工艺，以谷氨酸棒杆菌为生产菌株，先进行好氧富集，再进行厌氧发酵生产丁二酸，在厌氧发酵过程中CO2的提供以添加NH4HCO3、或(NH4)2CO3、或NH4OH与CO2的形式，或上述三种形式中任意两种或三种的组合。利用本发明的方法，最终回收有机酸时，避免大量金属离子的污染处理问题，同时可以回收利用NH4Cl，或者由于废液成分简单，可以制成氮肥，用于农业生产，从而在产品处理上节约成本，同时降低环境污染。

公开(公告)号：CN102286556B

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201110225388.1

申请日：2011-08-08

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 严明 ,  郝宁 ,  安明东 ,  许晟 ,  蔡萍 ,  许琳 ,  李艳 ,  欧阳平凯

IPC: C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种山梨糖还原酶在生物法制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶为催化剂，以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物，以NADPH为辅因子，不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯。本发明首次将氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的山梨糖还原酶应用于4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(S)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中，取得很好的效果，其酶活高达5.6U/mg，其对底物的得率高达90%、产物的对映体过量值为100％，且产量高，大大降低了生产成本。

公开(公告)号：CN102559528A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201210029158.2

申请日：2012-02-09

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 严明 ,  李艳 ,  刘欢 ,  许琳 ,  郝宁 ,  魏淼 ,  许昇 ,  安明东 ,  王珊珊 ,  安芳芳 ,  郝思清 ,  顾金海

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63 ,  C12N9/10 ,  C12P19/56 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces cerevisiaeYPH499中得到的工程菌；其中，所述的UGT76G1编码基因为GenBank，No.GenBank：AY345974.1，该基因序列命名为UGT。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及在生产莱鲍迪甙A中的应用。本发明在不外加昂贵UDPG的情况下，以廉价碳源葡萄糖为底物，调节酵母体内UDPG的代谢途径，全细胞催化St甙生成rebaudioside A。