一种沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备方法及筛选方法

    公开(公告)号:CN112457398A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011478073.3

    申请日:2020-12-15

    Inventor: 马喆 范红结 郭晓

    Abstract: 本发明公开了一种沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备方法及筛选方法,通过使用纯化的PagC蛋白免疫Balb/c小鼠,按照杂交瘤细胞制备技术,得到6株产抗PagC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞;合成属间特异的含有线性表位的氨基酸序列DRQASGSVEPEGIH(P1)和FKEHSTQDGDSFNKISSRKTGFA(P2)做为筛选抗原,得到抗原表位在线性的P1序列上的单抗细胞株J,其他5株单抗表位都不在线性的P1和P2氨基酸序列上;Western‑bloting结果表明mAb J能够与纯化的PagC蛋白、野生型的鸡白痢和鼠伤寒PagC蛋白反应而与其他肠杆菌科PagC蛋白无反应,说明筛选到的mAb J抗原表位P1在沙门菌属内保守、属间特异。本发明通过制备单克隆抗体,能够用于建立沙门菌抗体阻断ELISA检测方法,具有特异性好,灵敏度高的特点,具有广泛推广的潜力。

    一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒

    公开(公告)号:CN106290918A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610720048.9

    申请日:2016-08-24

    CPC classification number: G01N33/68 G01N33/56911 G01N2333/255 G01N2800/065

    Abstract: 本发明公开一种检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒,该试剂盒包括:包被有重组蛋白PagC的固相载体、酶标抗体、沙门氏菌阴性血清和阳性血清。本发明的检测沙门氏菌抗体的ELISA试剂盒及方法,对沙门氏菌属内广泛适用,应用范围广,该试剂盒具有较高的特异性和重复性,且温度对反应板的影响较小,稳定性强,相比以多糖抗原为检测抗原的ELISA方法,本发明可最大限度降低假阳性出现率,避免肠杆菌科其他细菌抗原给检测带来的干扰。与现在临床中使用较多的玻板凝集抗原检测方法相比,本发明具有更高的灵敏度与准确性,同时极大的提高了检测的通量。

    一种兽疫链球菌基因缺失株、活疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN120025956A

    公开(公告)日:2025-05-23

    申请号:CN202411804181.3

    申请日:2024-12-10

    Abstract: 本发明适用于基因工程技术领域,以兽疫链球菌ATCC 35246株为亲本株,利用pSET4S温度敏感型自杀性基因敲除质粒,敲除其吡咯啉‑5‑羧酸还原酶基因(proC),得到兽疫链球菌基因缺失株ATCC 35246ΔproC。此缺失株具有低毒力,以该突变株活菌大剂量免疫小鼠,可使小鼠体内抗体效价明显升高,成功建立针对性的免疫保护;ATCC 35246ΔproC制备方便,成本低,培养简单,且作为疫苗不需其他复杂的处理,洗菌后调至相应浓度即可使用。通过对小鼠进行免疫实验,结果显示,该疫苗能够有效刺激受动物机体的免疫水平,抵抗兽疫链球菌感染,且缺失株在小鼠中安全性高,免疫保护效果显著,具有作为兽疫链球菌活菌疫苗的潜力。

    一种猪链球菌9型疫苗株、疫苗及其应用

    公开(公告)号:CN117603858A

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN202311563824.5

    申请日:2023-11-22

    Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌9型疫苗株、疫苗及其应用,所述猪链球菌9型疫苗株保藏在中国典型培养物保藏中心,命名为猪链球菌SS9‑CZ(Streptococcus suis SS9‑CZ),保藏日期为2023年11月03日,保藏编号为CCTCC NO:M20232125。与现有技术相比,本发明SS9‑CZ菌株分离自临床发病猪的肺脏组织,血清型鉴定为猪链球菌9型,在THB培养基中生长良好,对仔猪具有较强的致病性,具有良好的免疫原性,是良好的猪链球菌9型疫苗株。用SS9‑CZ菌株制备的疫苗免疫仔猪后能有效抵抗猪链球菌强毒菌株攻击,显示出良好的免疫原性,为有效预防猪链球菌病提供了技术支撑。

    一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、疫苗及其应用

    公开(公告)号:CN114836356A

    公开(公告)日:2022-08-02

    申请号:CN202210629474.7

    申请日:2022-06-06

    Abstract: 本发明公开了一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、疫苗及其应用,所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌株保藏在中国典型培养物保藏中心,命名为LJS19051‑P80,保藏日期为2022年5月12日,保藏编号为CCTCC NO:V202239。所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌株用于制作胞内劳森菌弱毒疫苗菌株疫苗,能有效预防猪增生性回肠炎。本发明以前期分离的胞内劳森菌LJS19051菌株为疫苗候选菌株,使用体外传代致弱方式对其进行致弱,并选择合适代次的致弱菌株制备胞内劳森菌弱毒疫苗,为猪增生性回肠炎商品化弱毒疫苗的研制及猪场猪增生性回肠炎的有效防控奠定了基础。

    一种重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN113444175B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202110855204.3

    申请日:2021-07-28

    Abstract: 本发明公开了一种重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体及其应用,所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;所述单克隆抗体的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所制备的重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体纯度高、特异性好、灵敏度高,与其它肠道致病菌无交叉反应性,可用于ELISA、IFA检测,对于临床LI诊断和实验室LI诊断技术研发具有重要意义。

    一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN113292651B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202110750619.4

    申请日:2021-07-01

    Abstract: 本发明公开了一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用,所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示;所述单克隆抗体的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3,其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所得猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体能够用于胞内劳森菌,以制备的单克隆抗体为一抗,IFTC‑标记的羊抗鼠抗体为二抗,检测感染细胞中的胞内劳森菌,为肠上皮细胞中胞内劳森菌抗原检测方法的建立奠定基础。

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