公开(公告)号：CN112457398A

公开(公告)日：2021-03-09

申请号：CN202011478073.3

申请日：2020-12-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 马喆 ,  范红结 ,  郭晓

IPC: C07K16/12 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种沙门菌PagC蛋白单克隆抗体的制备方法及筛选方法，通过使用纯化的PagC蛋白免疫Balb/c小鼠，按照杂交瘤细胞制备技术，得到6株产抗PagC蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞；合成属间特异的含有线性表位的氨基酸序列DRQASGSVEPEGIH(P1)和FKEHSTQDGDSFNKISSRKTGFA(P2)做为筛选抗原，得到抗原表位在线性的P1序列上的单抗细胞株J，其他5株单抗表位都不在线性的P1和P2氨基酸序列上；Western‑bloting结果表明mAb J能够与纯化的PagC蛋白、野生型的鸡白痢和鼠伤寒PagC蛋白反应而与其他肠杆菌科PagC蛋白无反应，说明筛选到的mAb J抗原表位P1在沙门菌属内保守、属间特异。本发明通过制备单克隆抗体，能够用于建立沙门菌抗体阻断ELISA检测方法，具有特异性好，灵敏度高的特点，具有广泛推广的潜力。

公开(公告)号：CN112457398B

公开(公告)日：2023-01-03

申请号：CN202011478073.3

申请日：2020-12-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 马喆 ,  范红结 ,  郭晓

IPC: C07K16/12 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种沙门菌PagC蛋白的抗原表位肽，合成属间特异的含有线性表位的氨基酸序列DRQASGSVEPEGIH和FKEHSTQDGDSFNKISSRKTGFA做为筛选抗原，得到抗原表位在线性的P1序列上的单抗细胞株J，筛选到的mAb J抗原表位P1在沙门菌属内保守、属间特异。本发明通过制备单克隆抗体，能够用于建立沙门菌抗体阻断ELISA检测方法，具有特异性好，灵敏度高的特点，具有广泛推广的潜力。