公开(公告)号：CN116814659A

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202310765089.X

申请日：2023-06-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 洪青 ,  朱倩 ,  张明亮 ,  邱吉国 ,  闫新 ,  何健 ,  蒋建东

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/18 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  B09C1/10 ,  C02F3/34 ,  C12R1/19 ,  C02F101/38

Abstract: 本发明公开了水解酶基因ipcH及其编码的蛋白质和应用。本发明水解酶基因ipcH全长为1983bp，序列如SEQ ID NO.1所示，其编码产物水解酶IpcH含660个氨基酸，序列为SEQ ID NO.2。IpcH能降解氨基甲酸酯类杀虫剂异丙威。水解酶IpcH可用于降解水体、土壤中异丙威的残留，具有非常重要的理论和应用价值。

公开(公告)号：CN113789343B

公开(公告)日：2024-07-09

申请号：CN202110904455.6

申请日：2021-08-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吴巨友 ,  张皓 ,  刘雪莹 ,  曹鹏 ,  张明亮 ,  王鹏 ,  张绍铃 ,  谢智华 ,  齐开杰

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/66 ,  C12N15/56 ,  C12N15/29 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82 ,  C12Q1/34 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种体内检测ROP蛋白活性的方法，包括(1)构建融合蛋白表达载体并转化农杆菌感受态细胞；(2)植物叶片注射；(3)植物活体成像仪定性检测荧光强度；(4)酶标仪定量检测荧光素酶活性：使用酶标仪进行荧光扫描，以显示荧火素酶分解底物后产生荧光的强度来判断荧光素酶活性的强弱，从而检测目标蛋白AtROP1的活性强弱的程度。该方法基于RIC1作为ROP蛋白的下游效应子能特异地与活性形式的ROP结合这一特点，通过荧火素酶互补实验，借助烟草瞬时表达系统，利用植物活体成像仪和酶标仪进行定性定量检测荧光强度，从而实现体内检测ROP蛋白的活性。同时该方法还具有高灵敏度、可视化、可定量化和操作简单高效等特点。

公开(公告)号：CN113789343A

公开(公告)日：2021-12-14

申请号：CN202110904455.6

申请日：2021-08-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 吴巨友 ,  张皓 ,  刘雪莹 ,  曹鹏 ,  张明亮 ,  王鹏 ,  张绍铃 ,  谢智华 ,  齐开杰

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/66 ,  C12N15/56 ,  C12N15/29 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82 ,  C12Q1/34 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种体内检测ROP蛋白活性的方法，包括(1)构建融合蛋白表达载体并转化农杆菌感受态细胞；(2)植物叶片注射；(3)植物活体成像仪定性检测荧光强度；(4)酶标仪定量检测荧光素酶活性：使用酶标仪进行荧光扫描，以显示荧火素酶分解底物后产生荧光的强度来判断荧光素酶活性的强弱，从而检测目标蛋白AtROP1的活性强弱的程度。该方法基于RIC1作为ROP蛋白的下游效应子能特异地与活性形式的ROP结合这一特点，通过荧火素酶互补实验，借助烟草瞬时表达系统，利用植物活体成像仪和酶标仪进行定性定量检测荧光强度，从而实现体内检测ROP蛋白的活性。同时该方法还具有高灵敏度、可视化、可定量化和操作简单高效等特点。