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公开(公告)号：CN101402959B
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN200810235133.1
申请日：2008-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高枯草芽孢杆菌surfactin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。采用DNA同源整合技术使启动子Pspac置换枯草芽孢杆菌fmbR surfactin合成酶基因本身的启动子。通过PCR方法从fmbR菌株基因组中扩增得到1081bp的同源序列，连接到质粒pMUTIN4的HindIII和BamH I酶切位点上，并将构建好的载体转化到野生枯草芽孢杆菌fmbR中，经过抗生素培养基筛选并通过分子生物学方法鉴定获得。本发明方法可以直接从遗传上改良抗菌肽生产菌株，在工业上具潜在的应用价值。菌株surfactin产量提高约4.85倍，在IPTG诱导下，surfactin产量约提高10倍。
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公开(公告)号：CN101475944B
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200810243721.X
申请日：2008-12-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了本发明涉及一种提高淀粉液化芽孢杆菌fengycin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。是通过PCR方法从淀粉液化芽孢杆菌ES-2菌株基因组中扩增得到450bp的同源序列，从质粒pHB201上扩增启动子P59序列，将上述两个DNA片段连接到一起，并克隆到质粒pMD19-T上，并连接上新霉素抗性基因做为筛选标记，从而构建了一个同源整合载体。将构建好的同源整合载体转化到野生淀粉液化芽孢杆菌ES-2中，启动子置换菌株的fengycin产量为5704.77±258.89mg/L，比野生菌的fengycin产量提高了约0.65倍。
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公开(公告)号：CN101475944A
公开(公告)日：2009-07-08
申请号：CN200810243721.X
申请日：2008-12-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高淀粉液化芽孢杆菌fengycin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。是通过PCR方法从淀粉液化芽孢杆菌ES－2菌株基因组中扩增得到450bp的同源序列，从质粒pHB201上扩增启动子P59序列，将上述两个DNA片段连接到一起，并克隆到质粒pMD19－T上，并连接上新霉素抗性基因做为筛选标记，从而构建了一个同源整合载体。将构建好的同源整合载体转化到野生淀粉液化芽孢杆菌ES－2中，启动子置换菌株的fengycin产量为5704.77±258.89mg/L，比野生菌的fengycin产量提高了约0.65倍。
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公开(公告)号：CN101402959A
公开(公告)日：2009-04-08
申请号：CN200810235133.1
申请日：2008-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种提高枯草芽孢杆菌surfactin产量的启动子置换方法，属于生物技术领域。采用DNA同源整合技术使启动子Pspac置换枯草芽孢杆菌fmbR surfactin合成酶基因本身的启动子。通过PCR方法从fmbR菌株基因组中扩增得到1081bp的同源序列，连接到质粒pMUTIN4的HindIII和BamH I酶切位点上，并将构建好的载体转化到野生枯草芽孢杆菌fmbR中，经过抗生素培养基筛选并通过分子生物学方法鉴定获得。本发明方法可以直接从遗传上改良抗菌肽生产菌株，在工业上具潜在的应用价值。菌株surfactin产量提高约4.85倍，在IPTG诱导下，surfactin产量约提高10倍。
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