一种新型多功能酶基因HG32及应用

    公开(公告)号:CN112852845A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110156059.X

    申请日:2021-02-04

    Abstract: 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用,该酶来源于中华竹鼠肠道微生物,能够兼容真核生物细胞表达系统,表达高生物活性的纤维素酶,其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用,以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题,减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序,序列拼接,与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比,筛选高表达的、同源性高于50%的疑似纤维素酶的基因,预测其信号肽,并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽,按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上,通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达,收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。

    提高基因组定点整合效率的抑制剂及其应用

    公开(公告)号:CN111394393A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010116317.7

    申请日:2020-02-25

    Abstract: 本发明公开了通过筛选出可以提高基因组定点整合效率的抑制剂,包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂或JAK抑制剂中的至少一种。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以在基因组定点整合时,抑制组蛋白的去乙酰化,而促进组蛋白的乙酰化,进而有利于DNA与组蛋白八聚体的解离,核小体结构松弛,从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合,激活基因的转录及定点整合效率。JAK抑制剂通过抑制细胞JAK自发性磷酸化,影响其与STAT蛋白结合,使STAT转录因子磷酸化不能有效转移至细胞核内,影响非DNA连接因子的结合,有利于NHEJ/HDR因子的结合,进而有效增加基因整合至基因组的概率,提高基因组定点整合效率。

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