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公开(公告)号：CN114164114B
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202111495124.8
申请日：2021-12-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因编辑虫株及其应用。本发明公开了一个有潜力的疫苗和药物设计靶点和一种预防弓形虫感染的基因敲除虫株。所述疫苗和药物设计靶点为弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述基因敲除虫株敲除了TgRPI基因，该基因敲除虫株在体外生长速度减缓，但是可以传代培养，在动物体内具有毒力小、繁殖少等特性，能提高动物对弓形虫的免疫能力。由于TgRPI对弓形虫体内外生长有重要作用，故有成为疫苗和药物靶点的潜力，且该基因敲除虫株有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN114164114A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111495124.8
申请日：2021-12-08
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因编辑虫株及其应用。本发明公开了一个有潜力的疫苗和药物设计靶点和一种预防弓形虫感染的基因敲除虫株。所述疫苗和药物设计靶点为弓形虫核酮糖‑5‑磷酸异构酶TgRPI基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。所述基因敲除虫株敲除了TgRPI基因，该基因敲除虫株在体外生长速度减缓，但是可以传代培养，在动物体内具有毒力小、繁殖少等特性，能提高动物对弓形虫的免疫能力。由于TgRPI对弓形虫体内外生长有重要作用，故有成为疫苗和药物靶点的潜力，且该基因敲除虫株有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN114933970B
公开(公告)日：2023-03-24
申请号：CN202210723393.3
申请日：2022-06-24
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/53 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株，该虫株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形虫6‑磷酸葡萄糖酸脱氢酶1基因(Tg6PGDH1)。本发明还公开了该虫株的构建方法以及在制备弓形虫疫苗中的应用。所述弓形虫基因敲除虫株在体外可以正常培养，虫体可以正常生长复制，但是在体内毒力减弱且对动物具有很高的免疫保护力，有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN114933970A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210723393.3
申请日：2022-06-24
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12N1/11 , C12N15/53 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/79 , A61K39/002 , A61P33/02 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一种弓形虫基因敲除虫株，该虫株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形虫6‑磷酸葡萄糖酸脱氢酶1基因(Tg6PGDH1)。本发明还公开了该虫株的构建方法以及在制备弓形虫疫苗中的应用。所述弓形虫基因敲除虫株在体外可以正常培养，虫体可以正常生长复制，但是在体内毒力减弱且对动物具有很高的免疫保护力，有成为抗弓形虫基因工程疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN119351466B
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411503015.X
申请日：2024-10-25
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/30 , A61K39/002 , A61P33/02
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种弓形虫基因敲除疫苗虫株的构建方法及其应用，通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TGGT1_202920基因得到ΔTGGT1_202920虫株，该虫株具有在体外能够正常培养、在体内几乎无毒的特性；对动物免疫接种ΔTGGT1_202920虫株后，可以产生良好的免疫保护力，能抵抗野生型弓形虫的感染，能用于制备抗弓形虫病疫苗，以预防弓形虫感染。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118750592A
公开(公告)日：2024-10-11
申请号：CN202411247790.3
申请日：2024-09-06
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种缺失TgAROM基因的弓形虫减毒疫苗，含有缺失了TgAROM基因的弓形虫疫苗虫株Δarom，所述TgAROM基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明发现直接敲除弓形虫TgAROM基因对弓形虫的胞内生长无明显影响；Δarom虫株可以在体外正常传代培养，但Δarom虫体在动物体内不繁殖，几乎没有毒力；免疫接种Δarom虫株可以产生良好的免疫保护力；综上表明Δarom虫株具有成为弓形虫疫苗的潜力。
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公开(公告)号：CN118546788A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410651467.6
申请日：2024-05-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株弓形虫琥珀酸脱氢酶α亚基基因缺失疫苗虫株及其应用，该虫株(Δsdhα)通过基因编辑技术直接敲除弓形虫的TgSDHα得到；敲除TgSDHα后，显著影响弓形虫的生长，减缓虫体体外的增殖速度，并能降低弓形虫体内繁殖数量；Δsdhα虫株具有体外可以传代培养，体内几乎无毒力的特性，感染Δsdhα虫株的小鼠全部存活；对动物免疫接种Δsdhα虫株后可以产生良好的免疫保护力，能抵抗野生型弓形虫的感染。Δsdhα虫株能用于制备抗弓形虫病的疫苗，为防治弓形虫病提供安全、有效的疫苗候选。同时，TgSDHα可以作为弓形虫药物设计靶点，为防治弓形虫病提供更多有效药物靶标与基因资源。
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公开(公告)号：CN118146955A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410301081.2
申请日：2024-03-15
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种微小隐孢子虫23kDa黏蛋白CP23基因缺失虫株及其应用。本发明基于CRISPR/Cas9基因编辑技术对微小隐孢子虫IIdA20G1亚型分离株的CP23基因进行敲除，获得了CP23基因缺失虫株；研究显示CP23缺失后影响微小隐孢子虫的体外入侵和生长发育，其基因缺失虫株可以在体外培养，在体外生的长荷虫量明显降低；通过体内免疫后，在小鼠体内其荷虫量也显著降低，排卵高峰期推迟并且排卵维持时间缩短，不会导致C57BL/6J小鼠在感染后死亡；采用CP23基因缺失虫株免疫后能减轻微小隐孢子虫对宿主的感染强度，具有毒力减弱的优点，能用于预防微小隐孢子虫感染，制备隐孢子虫减毒疫苗。
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公开(公告)号：CN116840473A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310581514.X
申请日：2023-05-23
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/535 , C07K16/20 , C07K16/06
Abstract: 本发明公开了一种检测微小隐孢子虫的双抗体夹心ELISA检测方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原，采用单克隆抗体制备技术，经过融合、克隆、筛选制备获得识别微小隐孢子虫胞内期所有阶段的单克隆抗体，作为检测抗体；利用微小隐孢子虫全虫蛋白作为抗原免疫新西兰兔，获得针对微小隐孢子虫的多克隆抗体，作为捕获抗体，并通过最佳稀释度的确定、封闭剂的选择、最佳孵育时间的确定等系列优化，建立了可用于临床样本中微小隐孢子虫的检测及鉴定的双抗体夹心ELISA检测方法及其试剂盒。该方法及试剂盒特异性较强，具有较好的灵敏度。
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公开(公告)号：CN109735513B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN201811497728.4
申请日：2018-12-07
Abstract: 本发明公开了一种隐孢子虫蛋白激酶的纯化方法，先通过构建隐孢子虫蛋白激酶的体外重组表达载体，再进行质粒转导、IPTG低温诱导表达，成功表达后的菌体裂解后，经割胶回收纯化蛋白；本发明纯化方法通过低温诱导以及改善IPTG浓度的方式，提高了表达蛋白的可溶性，同时通过割胶回收的方法解决了隐孢子虫蛋白激酶在体外表达中易出现的自切降解包涵体表达等问题，能够得到高纯度条带单一且具备酶学活性的重组蛋白，并且能够提高对难以表达、分子量较大蛋白的纯化效果。所纯化得到的蛋白能够进一步用于功能性分析研究，为解决隐孢子虫蛋白功能领域的诸多问题奠定基础。
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