公开(公告)号：CN112266903B

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202011113601.5

申请日：2020-10-17

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙爱东 ,  韦玉龙 ,  于宁 ,  朱月 ,  甘芝霖 ,  郝静怡 ,  史君彦 ,  甲承立

IPC: C12N9/02

Abstract: 本发明涉及一种蓝莓果中儿茶酚氧化酶的提取和纯化方法。提取方法具体为：在0～4℃的条件下，将蓝莓果按料液比为1：1～4的比例加入弱酸性缓冲液中，制成均匀浆质；然后再离心处理，取上清液，即得蓝莓果儿茶酚氧化酶提取液；其中，所述弱酸性缓冲液中添加有酚类螯合剂和表面活性剂，所述酚类螯合剂的添加量1～7％；所述表面活性剂的添加量为0～1.5％。纯化方法包括粗酶液的硫酸铵分级沉淀，粗酶液的透析处理，粗酶液的离子交换层析纯化，酶液的凝胶层析纯化以及非变性凝胶电泳纯化。本发明能够准确地将几种分子量不同的儿茶酚氧化酶进行分离，最终获得纯度较高的酶。

公开(公告)号：CN112266903A

公开(公告)日：2021-01-26

申请号：CN202011113601.5

申请日：2020-10-17

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 孙爱东 ,  韦玉龙 ,  于宁 ,  朱月 ,  甘芝霖 ,  郝静怡 ,  史君彦 ,  甲承立

IPC: C12N9/02

Abstract: 本发明涉及一种蓝莓果中儿茶酚氧化酶的提取和纯化方法。提取方法具体为：在0～4℃的条件下，将蓝莓果按料液比为1：1～4的比例加入弱酸性缓冲液中，制成均匀浆质；然后再离心处理，取上清液，即得蓝莓果儿茶酚氧化酶提取液；其中，所述弱酸性缓冲液中添加有酚类螯合剂和表面活性剂，所述酚类螯合剂的添加量1～7％；所述表面活性剂的添加量为0～1.5％。纯化方法包括粗酶液的硫酸铵分级沉淀，粗酶液的透析处理，粗酶液的离子交换层析纯化，酶液的凝胶层析纯化以及非变性凝胶电泳纯化。本发明能够准确地将几种分子量不同的儿茶酚氧化酶进行分离，最终获得纯度较高的酶。