一种重组腺病毒及其构建方法

    公开(公告)号:CN102154225A

    公开(公告)日:2011-08-17

    申请号:CN201010614032.2

    申请日:2010-12-30

    Abstract: 本发明提供一种重组腺病毒及其构建方法,其特征在于在腺病毒的CMV启动子下游多克隆位点Bgl II和Sal I酶切位点中插入猪瘟病毒E2基因,在腺病毒的CMV启动子下游Kpn I和Not I酶切位点中插入蓝耳病病毒GP5基因。解决了E2和GP5基因融合串联表达产量低和保护效果弱的问题,仅通过一次免疫接种就能使猪同时获得对猪瘟病毒和蓝耳病病毒的抗体,该重组腺病毒为非复制型病毒,在猪体内不繁殖,解决了弱毒疫苗长期接种导致的病毒返祖,毒力增强的现象,另外该重组腺病毒仅含有猪瘟病毒和蓝耳病病毒的主要保护基因,不含病毒的其它基因,使弱毒疫苗株和野毒株之间不会发生重组,用该重组腺病毒制成的疫苗,免疫动物后对猪瘟病毒和蓝耳病病毒联合攻击的保护效果为87.5%,解决了猪瘟和蓝耳病疫苗不能同时免疫的问题,也解决了弱毒疫苗免疫后毒力返强和同源重组的问题。

    红嘴鸥IFNα蛋白克隆表达及多抗制备

    公开(公告)号:CN111925433A

    公开(公告)日:2020-11-13

    申请号:CN202010764526.2

    申请日:2020-07-30

    Abstract: 本发明涉及红嘴鸥IFNα蛋白克隆表达及多抗制备,属于生物工程技术领域,本发明提供了红嘴鸥IFNα蛋白克隆表达及多抗制备,克隆红嘴鸥α干扰素基因部分片段,构建原核表达重组载体,获得重组蛋白制备多抗,为后期其抗病毒活性,及红嘴鸥α干扰素基因抗病毒机制研究提供理论基础,为红嘴鸥疫病防控另辟新径,对兽医公共卫生也有着较深的影响。在进行免疫兔子时,选择应用弗氏完全佐剂与不完全佐剂配合蛋白注射,可高效快速的制备到多克隆抗体。制备得到的抗体,经琼扩试验验证可知,红嘴鸥IFNα基因部分片段重组蛋白有较好的免疫原性,抗体效价可以达到1:8。可以较好的用于后续红嘴鸥IFNα蛋白抗病毒机制的研究。

    一种红嘴鸥IFN-γ基因及其编码的重组蛋白的应用

    公开(公告)号:CN117050158A

    公开(公告)日:2023-11-14

    申请号:CN202311302008.9

    申请日:2023-10-10

    Abstract: 本发明涉及一种红嘴鸥IFN‑γ基因及其编码的重组蛋白的应用,属于生物学领域。首先发现红嘴鸥IFN‑γ基因,然后将红嘴鸥IFN‑γ基因与pET32a(+)载体重组得到原核表达质粒,将重组原核表达质粒转化至Transetta(DE3)表达菌,加入IPTG诱导剂诱导蛋白表达,通过纯化得到重组蛋白,用重组蛋白,新城疫病毒分别与红嘴鸥淋巴细胞共孵育后检测相关基因转录水平,再用重组蛋白和新城疫病毒(NDV)共同与红嘴鸥淋巴细胞共孵育后检测相关基因转录水平,说明NDV孵育红嘴鸥淋巴细胞后激活了红嘴鸥免疫系统,重组蛋白IFN‑γ起到抗NDV作用。

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