公开(公告)号：CN100357451C

公开(公告)日：2007-12-26

申请号：CN200510048736.7

申请日：2005-12-22

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  孙健 ,  蔡红 ,  吴建宇 ,  秦西云 ,  孔宝华 ,  兰平秀 ,  杨金广

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明提供一种烟草扭脉病毒检测方法，属植物保护领域。根据烟草扭脉病毒核苷酸序列设计的特异性引物TVCPF/TVCPR，提取植株组织的总RNA后，采用RT-PCR的方法，检测烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术和总核酸提取法的缺点，方便、特异、灵敏的检测烟草扭脉病毒。

公开(公告)号：CN1827779A

公开(公告)日：2006-09-06

申请号：CN200510048736.7

申请日：2005-12-22

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 李凡 ,  王钰丽 ,  陈海如 ,  孙健 ,  蔡红 ,  吴建宇 ,  秦西云 ,  孔宝华 ,  兰平秀 ,  杨金广

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明提供一种烟草扭脉病毒检测方法，属植物保护领域。根据烟草扭脉病毒核苷酸序列设计的特异性引物TVCPF/TVCPR，提取植株组织的总RNA后，采用RT－PCR的方法，检测烟草扭脉病毒。该发明能有效克服指示植物法、电镜技术、酶联免疫技术和总核酸提取法的缺点，方便、特异、灵敏的检测烟草扭脉病毒。

公开(公告)号：CN1793858A

公开(公告)日：2006-06-28

申请号：CN200510048726.3

申请日：2005-12-22

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 李凡 ,  孙健 ,  陈海如 ,  李正跃 ,  王钰丽 ,  刘云龙 ,  范静华 ,  姬广海 ,  孔宝华 ,  王扬 ,  杨斌 ,  蒋小龙 ,  白松 ,  蔡红 ,  胡先奇

IPC: G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/02 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明提供了一种同步检测百合斑驳病毒(LMoV)、百合无症病毒(LSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过提取总RNA、多重RT－PCR以及电泳检测等步骤，在同一反应管及同一个热循环条件下对百合感染的LMoV、LSV和CMV三种病毒中的1～3种进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT－PCR具有的快速、特异、灵敏的优点外，主要是实现了三种病毒同步检测，降低了成本。

公开(公告)号：CN100538339C

公开(公告)日：2009-09-09

申请号：CN200510048726.3

申请日：2005-12-22

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 李凡 ,  孙健 ,  陈海如 ,  李正跃 ,  王钰丽 ,  刘云龙 ,  范静华 ,  姬广海 ,  孔宝华 ,  王扬 ,  杨斌 ,  蒋小龙 ,  白松 ,  蔡红 ,  胡先奇

IPC: G01N21/64 ,  G01N21/78 ,  G01N27/447 ,  C12Q1/02 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明提供了一种同步检测百合斑驳病毒(LMoV)、百合无症病毒(LSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过提取总RNA、多重RT-PCR以及电泳检测等步骤，在同一反应管及同一个热循环条件下对百合感染的LMoV、LSV和CMV三种病毒中的1～3种进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT-PCR具有的快速、特异、灵敏的优点外，主要是实现了三种病毒同步检测，降低了成本。

公开(公告)号：CN1824800A

公开(公告)日：2006-08-30

申请号：CN200510048772.3

申请日：2005-12-27

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 李凡 ,  陈精兰 ,  陈海如 ,  李正跃 ,  孙健 ,  王钰丽 ,  刘云龙 ,  范静华 ,  王扬 ,  姬广海 ,  孔宝华 ,  蔡红 ,  杨斌 ,  蒋小龙 ,  白松

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明提供了一种免疫捕获反转录PCR检测李坏死环斑病毒(PNRSV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过抗体特异捕获抗原、RT－PCR以及电泳检测等步骤，对植物中感染的李坏死环斑病毒进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT－PCR所具有的快速、特异的优点外，主要是实现了血清学与分子生物学技术的结合，先通过病毒抗体对抗原病毒的特异吸附，将植物中低浓度的病毒进行富集，再通过PCR进行扩增，从而使检测的灵敏度和特异性得到极大的提高，并降低了病毒的漏检率。

公开(公告)号：CN118207092A

公开(公告)日：2024-06-18

申请号：CN202311404327.0

申请日：2023-10-27

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 何鹏搏 ,  何鹏飞 ,  何月秋 ,  孔宝华 ,  吴毅歆 ,  唐萍 ,  王再强

IPC: C12N1/14 ,  A01N63/38 ,  A01P3/00 ,  A01G13/00 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明公开了一种用于防控作物土传病害的菌粮、制备方法和应用，涉及农业病害防控领域，解决了现有技术中的生物防治存在用量大、成本高以及效果不能持久的问题。本发明用于防控作物土传病害的菌粮，是由木霉菌菌粉和营养组分组成的混合物，木霉菌菌粉由深绿木霉菌菌粉、哈茨木霉菌菌粉和棘孢木霉菌菌粉组成，营养组分为淀粉干粉。将本发明菌粮施用至作物根部及地里，可使木霉菌利用淀粉以及地块间地头植物残体作为营养物质大量繁殖，从而可替代工厂化生产，降低生物防治的成本和用量；木霉菌大量增殖，占领生态位，可减少化学农药用量，抑制病原真菌，有效改善根际微生物生态系结构，高效防控土传病害，具有高效、持久和安全的优势。

公开(公告)号：CN118126859A

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202311404325.1

申请日：2023-10-27

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 何月秋 ,  何鹏搏 ,  何鹏飞 ,  赵正龙 ,  罗艳莲 ,  孔宝华 ,  吴毅歆 ,  唐萍 ,  王再强 ,  亢波

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/22 ,  A01P1/00 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌L1‑21、防治蔬菜病毒病的生物制剂和应用，涉及生物防治领域。本发明的枯草芽孢杆菌L1‑21为保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15726的菌株。本发明的生物制剂包括由本发明的枯草芽孢杆菌L1‑21发酵而得到的枯草芽孢杆菌L1‑21发酵液。本发明的生物制剂用于防控茄科、葫芦科与十字花科蔬菜病毒病。本发明的枯草芽孢杆菌L1‑21具有抗逆性强、营养简单、繁殖速度快、有效活菌数量高、性能稳定，储存期长等优势。将由该枯草芽孢杆菌L1‑21发酵液制得的生物制剂用于防治蔬菜病毒病，该生物制剂对番茄斑萎病毒、番茄黄化曲叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草花叶病毒、芜菁花叶病毒、南瓜花叶病毒均具有较好的防控效果。

公开(公告)号：CN1824798A

公开(公告)日：2006-08-30

申请号：CN200510048729.7

申请日：2005-12-22

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 蔡红 ,  陈海如 ,  孔宝华 ,  范静华 ,  李凡 ,  和志娇 ,  刘涛 ,  杨根华

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种植原体PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于16SrII组植原体的检测。试剂盒包括PCR常用反应试剂，主要有PCR反应缓冲液、MgCl2、dNTPs、TaqDNA聚合酶、植原体16S rRNA基因通用引物及16SrII组植原体的特异引物。检测方法包括PCR反应及电泳检测。含有16SrII组植原体的样品电泳检测结果可观察到1500bp和990bp的二条特异扩增条带，而非16SrII组植原体的样品电泳检测结果只能观察到1500bp的扩增条带。本试剂盒使用方便，具有较高的特异性和检测灵敏度。可直接检测植原体病害样品，又可对属于16SrII组的植原体进行鉴定。