公开(公告)号：CN106282377B

公开(公告)日：2019-09-24

申请号：CN201610855072.3

申请日：2016-09-27

Applicant: 黄埔出入境检验检疫局综合技术服务中心

Inventor： 刘二龙 ,  吕英姿 ,  卢丽 ,  许龙岩 ,  蒋湘 ,  李立霞 ,  李嘉琪 ,  杜雅萍 ,  林学勤 ,  郑高彬 ,  樊武疆 ,  林先准 ,  李培深 ,  苏彩珠 ,  唐涌

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种转基因鲑鱼AquAdvantage品系特异性实时荧光PCR检测引物、检测方法和试剂盒。本发明针对转基因鲑鱼AquAdvantage品系特异性序列(美洲绵鳚抗冻蛋白基因启动子区域与鲑鱼基因组5’端邻接区序列)设计引物和TaqMan探针，建立转基因鲑鱼实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)检测方法，利用该检测引物和检测探针，按照本发明的方法进行检测发现，其具有特异性强，灵敏度高，检测灵敏度为60拷贝，检测重复性良好，可应用于转基因鲑鱼AquAdvantage的鉴定，满足监管部门对其转基因鲑鱼正确标识的需求。

公开(公告)号：CN106282377A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610855072.3

申请日：2016-09-27

Applicant: 黄埔出入境检验检疫局综合技术服务中心

Inventor： 刘二龙 ,  吕英姿 ,  卢丽 ,  许龙岩 ,  蒋湘 ,  李立霞 ,  李嘉琪 ,  杜雅萍 ,  林学勤 ,  郑高彬 ,  樊武疆 ,  林先准 ,  李培深 ,  苏彩珠 ,  唐涌

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本 发 明公 开 了 一 种 转 基 因 鲑 鱼AquAdvantage品系特异性实时荧光PCR检测引物、检测方法和试剂盒。本发明针对转基因鲑鱼AquAdvantage品系特异性序列(美洲绵鳚抗冻蛋白基因启动子区域与鲑鱼基因组5’端邻接区序列)设计引物和TaqMan探针，建立转基因鲑鱼实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)检测方法，利用该检测引物和检测探针，按照本发明的方法进行检测发现，其具有特异性强，灵敏度高，检测灵敏度为60拷贝，检测重复性良 好，可应用于转基因鲑鱼AquAdvantage的鉴定，满足监管部门对其转基因鲑鱼正确标识的需求。

公开(公告)号：CN104561262B

公开(公告)日：2017-04-19

申请号：CN201410631661.4

申请日：2014-11-11

Applicant: 黄埔出入境检验检疫局综合技术服务中心

Inventor： 刘二龙 ,  卢丽 ,  吕英姿 ,  蒋湘 ,  唐婕 ,  樊武疆 ,  姚柏辉 ,  王定国 ,  林惠娇 ,  郑高彬 ,  林学勤 ,  秦焯敏

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了转基因苜蓿草J101品系Taqman实时荧光定量PCR检测用引物和探针及检测方法。本发明针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的转基因苜蓿草品系J101，根据5’端邻接区序列设计引物和探针，成功建立了转基因苜蓿草J101品系特异性实时荧光定量PCR检测方法。结果表明，本发明建立的J101品系特异性实量荧光定量PCR检测方法的标准曲线相关系数、扩增效率及重复性良好，检测最低DNA浓度为16pg，相当于10拷贝转基因苜蓿草J101基因组DNA，定量检测最低DNA浓度为80pg，相当于50拷贝的J101基因组DNA，能够快速、准确、稳定的用于J101品系定性和/或定量检测。

公开(公告)号：CN104745685B

公开(公告)日：2017-11-03

申请号：CN201510034609.5

申请日：2015-01-23

Applicant: 黄埔出入境检验检疫局综合技术服务中心

Inventor： 刘二龙 ,  吕英姿 ,  卢丽 ,  蒋湘 ,  樊武疆 ,  姚柏辉 ,  王定国 ,  苏彩珠 ,  唐婕 ,  林惠娇 ,  郑高彬 ,  林学勤 ,  符其娇 ,  秦焯敏

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了转基因苜蓿草J101品系特异性环介导等温扩增检测用引物及检测方法和应用。所述引物的序列分别如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.6所示。本发明针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的美国孟山都公司转基因苜蓿草品系J101，首次提供了一组特异性引物，以BstDNA聚合酶启动环介导等温扩增。通过对LAMP检测体系的优化，成功建立了苜蓿草J101品系特异性LAMP快速检测体系，操作简单，特异性强，灵敏度高，检测结果准确，检测最低拷贝数为10，能够快速、准确、地对转基因苜蓿草J101成分进行检测分析和鉴定。

公开(公告)号：CN105803092A

公开(公告)日：2016-07-27

申请号：CN201610294571.X

申请日：2016-05-04

Applicant: 黄埔出入境检验检疫局综合技术服务中心

Inventor： 刘二龙 ,  卢丽 ,  吕英姿 ,  刘津 ,  蒋湘 ,  李嘉琪 ,  杜雅萍 ,  林学勤 ,  郑高彬

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/114 ,  C12Q2561/113

Abstract: 本发明公开了转基因苜蓿草KK179?2品系特异性实时荧光PCR检测引物、探针、检测试剂盒和检测方法。本发明基于转基因苜蓿草KK179?2的5’端外源插入片段与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计检测引物和探针，建立了转基因苜蓿草KK179?2品系特异性实时定量荧光PCR检测方法，该检测方法定量检测下限为20copy/μL的转基因苜蓿草品系KK179?2基因组DNA，建立的标准曲线线性相关系数(R2)为0.99，扩增效率E为105％，重复性好，具有特异性好、灵敏度高、稳定性强，快速准确并可定量检测的优点，适用对转基因苜蓿草KK179?2进行品系特异性筛查，可为我国出入境口岸对进境转基因苜蓿草的监管提供有力技术支撑。