公开(公告)号：CN116063581A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202310126072.X

申请日：2023-02-15

Applicant: 首都医科大学宣武医院

Inventor： 郝峻巍 ,  刘亮 ,  徐芳 ,  赵淑芳

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/85 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明涉及一种GFAP抗原、GFAP抗原表达基因、GFAP抗原表达载体及用途，GFAP抗原由GFAP蛋白和GFAP蛋白羧基端的多聚化蛋白基序构成，本发明构建了GFAP抗原的真核表达载体，并创造性地在GFAP蛋白的羧基端引入多聚化的融合表达蛋白基序，能够促进GFAP蛋白在体内发生蛋白相变。本发明发现添加多聚化的蛋白基序能够让GFAP蛋白由野生型的弥散状变成更加致密的聚集结构，局部增加了GFAP的抗原蛋白浓度并使得阳性信号呈现独特的聚集形态，其中以四聚化的GFAP‑Tetramer质粒的聚集效果尤其明显；本发明在GFAP蛋白的四聚化的基础上引入了mCherry荧光蛋白能够进行双荧光检测，与现有的免疫荧光检测法相比，本发明提供的检测方法进一步增加了检测灵敏度和特异性，使检测结果判读更加明确。