公开(公告)号：CN106053409A

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201610334235.3

申请日：2016-05-18

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 张玉刚 ,  项亚 ,  赖方秾 ,  沈伟 ,  王强 ,  师进生

IPC: G01N21/64 ,  G01N1/30 ,  G01N1/28

CPC classification number: G01N21/6428 ,  G01N1/28 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明涉及一种检测红肉苹果花青苷降低猪卵巢颗粒细胞内活性氧的方法。按如下步骤操作：用丙酮浸提出红肉苹果中的花青苷，抽滤，滤液旋转蒸发至丙酮除尽，剩余液体用滤膜过滤后，4℃保存备用；体外培养猪卵巢颗粒细胞；用不同体积分数的红肉苹果花青苷和活性氧阳性对照试剂Rosup刺激猪卵巢颗粒细胞F1代6小时；给细胞装载荧光探针DCFH‑DA，收集细胞后用流式细胞仪检测。本发明方法原理可靠，操作简单，结果显示，红肉苹果花青苷能降低细胞内的活性氧水平，且随着浓度的增加效果越明显。

公开(公告)号：CN106053409B

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201610334235.3

申请日：2016-05-18

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 张玉刚 ,  项亚 ,  赖方秾 ,  沈伟 ,  王强 ,  师进生

IPC: G01N21/64 ,  G01N1/30 ,  G01N1/28

Abstract: 本发明涉及一种检测红肉苹果花青苷降低猪卵巢颗粒细胞内活性氧的方法。按如下步骤操作：用丙酮浸提出红肉苹果中的花青苷，抽滤，滤液旋转蒸发至丙酮除尽，剩余液体用滤膜过滤后，4℃保存备用；体外培养猪卵巢颗粒细胞；用不同体积分数的红肉苹果花青苷和活性氧阳性对照试剂Rosup刺激猪卵巢颗粒细胞F1代6小时；给细胞装载荧光探针DCFH‑DA，收集细胞后用流式细胞仪检测。本发明方法原理可靠，操作简单，结果显示，红肉苹果花青苷能降低细胞内的活性氧水平，且随着浓度的增加效果越明显。

公开(公告)号：CN106117175A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610495211.6

申请日：2016-06-28

Applicant: 青岛农业大学

Inventor： 张玉刚 ,  孙晓红 ,  孙欣 ,  项亚 ,  刘文莲 ,  祝军 ,  戴洪义

IPC: C07D311/62 ,  A01H4/00

CPC classification number: C07D311/62 ,  A01H4/005

Abstract: 本发明公开了一种红肉苹果组培苗生产花青苷的方法，操作步骤如下：(1)获取无菌材料、(2)初代培养获得红肉苹果组培苗、(3)继代培养获得大量红肉苹果组培苗、(4)壮苗培养、(5)花青苷的提取和粗品的制备。本发明的实验证明，利用上述方法培养的红肉苹果组培苗，其花青苷含量最高达到359.86U·g‑1FW，是室温下常规蔗糖培养基上的花青苷含量的7.8倍，分别是5年生红肉苹果结果树花后12周果皮、新叶、花后12周果肉、花的1.8、2.8、2.9、3.6倍，本发明不受时间及原材料缺乏的限制，实现利用组织培养法进行花青苷的工业化生产，为生产花青苷提供了一种新的途径。