-
公开(公告)号:CN113372414B
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202010540959.X
申请日:2020-06-15
Applicant: 长春理工大学
Abstract: 一种用于检测赭曲霉毒素A的荧光探针及其制备方法,属于生化技术领域,其特征是:以OTA为靶标,采用噬菌体表面随机展示十二肽库筛选出与OTA特异性结合的重组噬菌体,通过提取重组噬菌体的单链DNA进行测序及序列比对,获得了一条OTA特异性亲和配体序列,Met‑Pro‑Met‑Phe‑Lys‑His‑Arg‑Met‑Phe‑His‑Thr‑His;后通过固相多肽合成与荧光标记获得与OTA特异性结合的荧光探针,FITC‑Acp‑Met‑Pro‑Met‑Phe‑Lys‑His‑Arg‑Met‑Phe‑His‑Thr‑His。构建方法:1、特异性亲和配体的筛选;2、重组噬菌体DNA的提取及目标序列确定;3、荧光探针制备;4、建立标准检测曲线。有益效果是:1、替代OTA单克隆抗体。2、既可以定性地鉴别OTA,也检测样本中OTA的含量。
-
公开(公告)号:CN113372414A
公开(公告)日:2021-09-10
申请号:CN202010540959.X
申请日:2020-06-15
Applicant: 长春理工大学
Abstract: 一种用于检测赭曲霉毒素A的荧光探针及其制备方法,属于生化技术领域,其特征是:以OTA为靶标,采用噬菌体表面随机展示十二肽库筛选出与OTA特异性结合的重组噬菌体,通过提取重组噬菌体的单链DNA进行测序及序列比对,获得了一条OTA特异性亲和配体序列,Met‑Pro‑Met‑Phe‑Lys‑His‑Arg‑Met‑Phe‑His‑Thr‑His;后通过固相多肽合成与荧光标记获得与OTA特异性结合的荧光探针,FITC‑Acp‑Met‑Pro‑Met‑Phe‑Lys‑His‑Arg‑Met‑Phe‑His‑Thr‑His。构建方法:1、特异性亲和配体的筛选;2、重组噬菌体DNA的提取及目标序列确定;3、荧光探针制备;4、建立标准检测曲线。有益效果是:1、替代OTA单克隆抗体。2、既可以定性地鉴别OTA,也检测样本中OTA的含量。
-
公开(公告)号:CN109946273A
公开(公告)日:2019-06-28
申请号:CN201910188381.3
申请日:2019-03-13
Applicant: 长春理工大学
Abstract: 本发明提供了一种用于检测C-反应蛋白的荧光探针及其制备方法。该技术方案先采用噬菌体展示技术筛选出与其特异结合的重组噬菌体,通过提取重组噬菌体的ssDNA进行测序及序列比对,获得一条CRP特异性亲和配体序列。在此基础上,本发明基于固相多肽合成技术合成该配体,并对其进行荧光标记,从而获得与CRP特异性结合的荧光探针。用待测血清样本包被荧光酶标板,加入一定浓度荧光探针,该探针可与CRP特异性结合,随后用适宜的缓冲液洗去未结合的荧光探针,用荧光酶标仪检测其荧光强度,此时的荧光强度严格受到待测样本中CRP含量的控制。本发明为CRP的特异性识别、含量检测提供了一种全新的工具。该荧光探针既可以定性地鉴别CRP,也可以用于定量检测。
-
-