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发明公开
一种低丰度DNA突变测序文库的构建方法审中-实审

公开(公告)号：CN111074354A

公开(公告)日：2020-04-28

申请号：CN202010017509.2

申请日：2020-01-08

Applicant: 重庆邮电大学

Inventor： 浦丹 , 舒坤贤 , 刘康雯 , 曹会勋

IPC: C40B50/06 , C12Q1/6858

Abstract: 本发明提供了一种低丰度DNA突变测序文库的构建方法，所述方法采用3'末端封闭的核苷酸单链与待测基因组杂交，使与待测基因组中的野生型序列杂交形成完全互补配对的双链DNA，而与突变型序列形成在突变位点处不能互补的双链DNA，然后加入双链特异性核酸酶消化杂交形成的完全互补配对的双链DNA，从而选择性地富集含有DNA突变的序列；富集后的DNA序列两端连接测序接头，再采用基于梯度关键变性温度的PCR进行扩增，使含不同突变类型的序列在不同关键变性温度下有效扩增，得到能成为高通量测序技术可用的DNA文库。本发明方法构建的低丰度DNA突变测序文库，可提高NGS检测低丰度样本的准确度和灵敏度。

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