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公开(公告)号:CN118883681A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202410943779.4
申请日:2024-07-12
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N27/327 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR和HCR原位生成铜纳米簇的可再生生物传感器,包括(1)表面固定有共价有机骨架和羧基功能化硫化银量子点的电极;(2)链霉亲和素化的壳层二氧化硅磁珠、标记有生物素的探针DNA1、crRNA、Cas13a、带有RNA序列的DNA2;(3)铜纳米簇Cu NCs。本发明通过CRISPR/Cas13a系统和杂交链式反应双重信号放大技术,联合三螺旋DNA结构,以共价有机骨架COF和硫化银量子点的复合材料为信号源,crRNA作为捕获目标物的捕获探针,原位生成的铜纳米簇作为信号削弱分子,构建了检测circRNA的可再生生物传感器。本发明的可再生生物传感器可以只通过改变crRNA捕获探针序列来检测不同circRNA,无需改变其他核酸序列,显示出在多识别的生物分析研究中的应用前景。
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公开(公告)号:CN118599968A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410788619.7
申请日:2024-06-18
Applicant: 郑州大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6886 , G01N21/76 , G01N33/52
Abstract: 本发明属于小胞外囊泡检测技术领域,具体涉及基于CRISPR/Cas12a和HCR的小胞外囊泡比色/化学发光双模式传感器及其应用。该传感器包括:捕获磁珠、双胆固醇探针、发夹探针H1和H2、链霉亲和素、Cas12a、crRNA、CRISPR/Cas12a激活链(Activator)、催化磁珠、显色液和化学发光底液;捕获磁珠上偶联有肿瘤特异性蛋白适配体;双胆固醇探针能结合小胞外囊泡且其粘性末端作为触发链能与H1杂交,打开H1发夹结构,H1新暴露出的序列能与发夹探针H2杂交,打开H2发夹结构,触发杂交链式反应;催化磁珠上偶联有辅助链和T‑HRP链,催化磁珠上的催化剂能催化不同底物产生比色和化学发光两种检测信号。
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公开(公告)号:CN117925834A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202311871077.1
申请日:2023-12-29
Applicant: 郑州大学
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6825 , C12Q1/682 , G01N27/327 , G01N27/48 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于医学检测技术领域,涉及CRISPR光电流极性翻转生物传感器及其在联合检测lncRNAs中的应用。传感器包括:(1)表面固定有硫化镉量子点的电极,硫化镉量子点表面修饰有标记巯基的单链DNA S3;(2)氨基化的壳层二氧化硅磁珠、标记有生物素和羧基的发夹探针HP2、crRNA、Cas13a、带有RNA序列的发夹HP1、Mg2+;目标lncRNA与crRNA的部分序列互补配对;HP1被CRISPR/Cas13a非特异性切割,产生两条DNAzyme步行足S1和S1’,S1和S1’在Mg2+辅助下形成双向DNAzyme步行器,切割HP2产生单链DNA S2;S2与S3的碱基互补配对;(3)链霉亲和素修饰的氮掺杂碳‑铜/氧化亚铜。
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公开(公告)号:CN113640266B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202110918246.7
申请日:2021-08-11
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种用于细胞中铁蛋白储存和释放铁的检测方法,包括以下操作步骤:S1:对细胞毒性进行考察的步骤;S2:功能铁蛋白的表征测试步骤;S3:功能铁蛋白的性能考察步骤;S4:溶液中铁离子进、出铁蛋白的检测步骤;S5:细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测。通过上述方式,本发明通过简单的混合构建功能铁蛋白的方式,在对溶液中铁离子进/出铁蛋白检测的基础上,进一步将其用于细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测,从而为铁蛋白储存和释放铁的研究以及铁相关疾病的诊断和治(56)对比文件Cuiping Han et al..Highly fluorescent carbon dots as selective andsensitive “ on-off-on” probes for iron(III) ion and apoferritin detection andimaging in living cells.Biosensors andBioelectronics.2016,第83卷全文.Gunther Jutz et al..Ferritin: AVersatile Building Block forBionanotechnology.Chem.Rev..2015,第115卷全文.Stephan Tetter and DonaldHilvert.Enzyme Encapsulation by aFerritin Cage.Angew.Chem.Int.Ed..2017,第56卷全文.Cuiping Han et al..Highly fluorescent carbon dots as selective andsensitive “ on-off-on” probes for iron(III) ion and apoferritin detection andimaging in living cells.Biosensors andBioelectronics.2016,第83卷全文.Leiliang He et al. .Apoferritin-basedtunable nano-indicator for intracellularpH sensing: Regulating responseperformances and minimizing effects ofsystem flctuations.Sensors & Actuators:B. Chemical .2020,第323卷全文.林庆梅,乔玉欢,黄河清.铁蛋白反应器储存有毒金属离子的初步研究.厦门大学学报(自然科学版).1999,(第06期),全文.杨彩云等.铁蛋白表面修饰及其应用.化学进展.2016,(第01期),全文.王琪;王蓓蓓;马美湖;蔡朝霞.荧光纳米材料应用于蛋白质分析的研究进展.食品科学.2015,(第05期),全文.刘文营;张建;童军茂;赵广华.铁蛋白脱铁机制的建立及脱铁前后光谱变化的研究.光谱学与光谱分析.2011,(第09期),全文.
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公开(公告)号:CN113640266A
公开(公告)日:2021-11-12
申请号:CN202110918246.7
申请日:2021-08-11
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种用于细胞中铁蛋白储存和释放铁的检测方法,包括以下操作步骤:S1:对细胞毒性进行考察的步骤;S2:功能铁蛋白的表征测试步骤;S3:功能铁蛋白的性能考察步骤;S4:溶液中铁离子进、出铁蛋白的检测步骤;S5:细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测。通过上述方式,本发明通过简单的混合构建功能铁蛋白的方式,在对溶液中铁离子进/出铁蛋白检测的基础上,进一步将其用于细胞内铁蛋白储存和释放铁的可视化原位检测,从而为铁蛋白储存和释放铁的研究以及铁相关疾病的诊断和治疗提供新的方法和技术手段。
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公开(公告)号:CN118795006B
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202410774133.8
申请日:2024-06-17
Applicant: 郑州大学第三附属医院(河南省妇幼保健院)
IPC: G01N27/327 , G01N27/48
Abstract: 本发明公开了一种差分信号策略检测土霉素的光电化学传感方法,包括FeCu‑BMO及Fe2O3@CuO纳米球的制备、氯化银立方体的制备及土霉素检测方法的构建,本发明制备了双金属有机骨架FeCu‑MOF,将其氧化物作为光电活性材料,利用适配体对土霉素的特异性识别和氯化银纳米立方体上的辅助链与适配体的结合,由于土霉素的位阻效应和氯化银的猝灭作用,通过两个连续且相关的事件计算差分信号,构建了一种新型光电化学传感器,用于检测土霉素,提高土霉素与传感器的特异性结合,实现对土霉素的高灵敏度检测,差分信号策略的检测限为5nmo l/L,较单一事件光电化学传感器22nmo l/L的检出限更低,同时,传感器具备优秀的选择特异性、稳定性和重现性,适用于不同场景下的土霉素残留检测需求。
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公开(公告)号:CN118777614A
公开(公告)日:2024-10-15
申请号:CN202410764570.1
申请日:2024-06-13
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N21/64 , G01N15/14
Abstract: 本发明提供了DSA‑PPh3分子在制备循环肿瘤细胞检测试剂中的用途及检测试剂和试剂盒。所述DSA‑PPh3分子为两端修饰正电荷三苯基膦盐(TPP)基团的二苯乙烯基蒽。所述循环肿瘤细胞检测试剂包括DSA‑PPh3分子和 PolyA‑TSP‑AuNPs,DSA‑PPh3分子作为线粒体荧光探针标记待测样品中的循环肿瘤细胞;所述PolyA‑TSP‑AuNPs识别所述循环肿瘤细胞的端粒酶,并进行特异性延长,以增强肿瘤细胞和白细胞的荧光差异。因此,基于线粒体和端粒酶活性,利用本发明提供的检测试剂、试剂盒或检测系统可以实现CTCs的高对比度双锚定鉴定,可以显著提升鉴定效率,而且能够实现对富集后CTCs的无损鉴定,此外,还具有所需材料合成简单便捷,操作时间短、灵敏度高及保持细胞活性等特点。
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公开(公告)号:CN115219569A
公开(公告)日:2022-10-21
申请号:CN202210711574.4
申请日:2022-06-22
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N27/26 , G01N27/27 , G01N27/30 , G01N27/327
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种人工酶检测肿瘤细胞的传感器及其制备方法和应用。该传感器包括捕获电极、循环肿瘤细胞、信号放大器和底物;捕获电极为负载有捕获抗体的电极;信号放大器为人工酶‑检测抗体共轭物,人工酶催化底物得到沉淀物,沉淀物为电子受体且沉积在电极表面,检测抗体和捕获抗体均为循环肿瘤细胞表面抗原的特异性抗体。上述传感器是基于人工酶的高纳米酶活性催化沉淀、竞争吸收光能和消耗电子供体以及免疫夹心反应,进行光电流信号放大设计,利用上述传感器能够实现检测循环肿瘤细胞,并具有灵敏度高、选择性高、重现性好、稳定性高等优点。
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公开(公告)号:CN116789163B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202310795134.6
申请日:2023-06-30
Applicant: 郑州大学
IPC: C01G3/02 , C01F17/212 , C01F17/10 , G01N27/30 , G01N27/36
Abstract: 本发明提供了一种双金属氧化物及其制备方法和信号翻转检测抗生素的应用。所述双金属氧化物为由Sc2O3和CuO组成的八面体晶体结构Sc2O3@CuO。本发明还提供一种双金属氧化物复合材料,主要由Sc2O3@CuO和吸附在Sc2O3@CuO八面体表面的纳米金颗粒组成的复合材料Sc2O3@CuO@AuNPs。本发明还提供一种光电流信号翻转型光电化学传感器,包括TiO2/ITO电极以及修饰在TiO2/ITO电极表面的发夹探针HP2、标记有生物素的辅助探针S2和信号探针,该信号探针为包裹有链霉亲和素的Sc2O3@CuO@AuNPs,探针S2打开探针HP2,使信号探针修饰至TiO2/ITO电极表面,形成光电信号与TiO2/ITO电极相反的Sc2O3@CuO@AuNPs/TiO2/ITO电极。如此,该传感器通过结合光电流方向翻转策略和酶切信号放大技术构建,能消除背景信号的干扰,增加信号输出,从而提高了检测抗生素的选择性和灵敏度。
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公开(公告)号:CN119104714A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202411210334.1
申请日:2024-08-30
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/532 , G01N21/65 , G01N33/535 , G06T7/00 , G06N20/00
Abstract: 本发明提供了一种铜绿假单胞菌的检测识别试剂及检测平台和检测方法,其主要基于核酸适配体Apt和金银核壳双层报告分子标签结构构建一种双识别表面增强拉曼光谱SERS快速检测铜绿假单胞菌PA的平台、检测识别试剂及检测方法;其中的SERS标签AuNRs‑MBA@Ag‑MBA‑Van与免疫磁性SPION‑PEI‑AuNPs‑Apt和PA可形成SPION‑PEI‑AuNPs‑Apt/PA/Van‑MBA‑Ag@MBA‑AuNRs夹心结构,通过测量该夹心结构的拉曼光谱进行定性定量检测;同时结合机器学习回归模型及其性能指标,利用检测到的拉曼信号和PA浓度构建出最佳的PA定量检测标准曲线。本发明提供的上述高灵敏双识别标签型SERS定量分析体系,具有检测范围广,检出限低,特异性好,准确度高及检测时间短等优势,从而为铜绿假单胞菌感染相关疾病的预防和临床诊断以及食品安全监测提供新的方法和技术。
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