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公开(公告)号:CN113916852A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111143245.6
申请日:2021-09-28
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种血浆外泌体浓度和外泌体膜蛋白浓度的同步检测方法,包括步骤:提供磁性纳米杨梅颗粒;加CD63适配体形成AptCD63‑磁性纳米杨梅颗粒;加外泌体使其与AptCD63‑磁性纳米杨梅颗粒结合形成外泌体复合物;加三种荧光探针分别结合所述外泌体表面的EGFR、EpCAM、或嵌入外泌体脂质双分子层中;用荧光光谱仪检测三种荧光探针的荧光强度,利用荧光强度与外泌体浓度、外泌体膜蛋白EGFR浓度、外泌体膜蛋白EpCAM浓度之间的相关关系,实现对外泌体浓度及外泌体膜蛋白EGFR和EpCAM浓度的同步检测。所以,本发明提供的上述同步检测方法具有潜在的临床应用价值。
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公开(公告)号:CN110208236A
公开(公告)日:2019-09-06
申请号:CN201910575736.4
申请日:2019-06-28
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了基于脱铁铁蛋白的比率型荧光pH纳米探针的制备方法,包括以下步骤:(1)取脱铁铁蛋白加入水中,调pH至酸性使脱铁铁蛋白解聚;(2)将上述步骤(1)的溶液震荡均匀后逐滴加入由pH敏感和pH不敏感的两种染料组成的混合液,继续震荡一段时间,调节溶液pH至中性使脱铁铁蛋白重新聚合;(3)将上述步骤(2)的混合液室温震荡后过滤,取滤液,超滤离心后收集截留液,即得含有基于脱铁铁蛋白的比率型荧光pH纳米探针的溶液,4℃保存备用。本发明通过将pH敏感和pH不敏感的两种染料经简便的一步混合同时封装到脱铁铁蛋白内部空腔,构建了用于检测细胞内pH值的比率型荧光纳米探针,该探针具有制备简便、稳定性好,抗干扰能力强,细胞毒性低、生物相容性好的特点。
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公开(公告)号:CN116789163B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202310795134.6
申请日:2023-06-30
Applicant: 郑州大学
IPC: C01G3/02 , C01F17/212 , C01F17/10 , G01N27/30 , G01N27/36
Abstract: 本发明提供了一种双金属氧化物及其制备方法和信号翻转检测抗生素的应用。所述双金属氧化物为由Sc2O3和CuO组成的八面体晶体结构Sc2O3@CuO。本发明还提供一种双金属氧化物复合材料,主要由Sc2O3@CuO和吸附在Sc2O3@CuO八面体表面的纳米金颗粒组成的复合材料Sc2O3@CuO@AuNPs。本发明还提供一种光电流信号翻转型光电化学传感器,包括TiO2/ITO电极以及修饰在TiO2/ITO电极表面的发夹探针HP2、标记有生物素的辅助探针S2和信号探针,该信号探针为包裹有链霉亲和素的Sc2O3@CuO@AuNPs,探针S2打开探针HP2,使信号探针修饰至TiO2/ITO电极表面,形成光电信号与TiO2/ITO电极相反的Sc2O3@CuO@AuNPs/TiO2/ITO电极。如此,该传感器通过结合光电流方向翻转策略和酶切信号放大技术构建,能消除背景信号的干扰,增加信号输出,从而提高了检测抗生素的选择性和灵敏度。
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公开(公告)号:CN119104714A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202411210334.1
申请日:2024-08-30
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/532 , G01N21/65 , G01N33/535 , G06T7/00 , G06N20/00
Abstract: 本发明提供了一种铜绿假单胞菌的检测识别试剂及检测平台和检测方法,其主要基于核酸适配体Apt和金银核壳双层报告分子标签结构构建一种双识别表面增强拉曼光谱SERS快速检测铜绿假单胞菌PA的平台、检测识别试剂及检测方法;其中的SERS标签AuNRs‑MBA@Ag‑MBA‑Van与免疫磁性SPION‑PEI‑AuNPs‑Apt和PA可形成SPION‑PEI‑AuNPs‑Apt/PA/Van‑MBA‑Ag@MBA‑AuNRs夹心结构,通过测量该夹心结构的拉曼光谱进行定性定量检测;同时结合机器学习回归模型及其性能指标,利用检测到的拉曼信号和PA浓度构建出最佳的PA定量检测标准曲线。本发明提供的上述高灵敏双识别标签型SERS定量分析体系,具有检测范围广,检出限低,特异性好,准确度高及检测时间短等优势,从而为铜绿假单胞菌感染相关疾病的预防和临床诊断以及食品安全监测提供新的方法和技术。
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公开(公告)号:CN120005975A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510170745.0
申请日:2025-02-17
Applicant: 郑州大学
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6876 , G16B20/20 , G16B30/00
Abstract: 一种基于FEN1‑SDA‑CRISPR/Cas12a多重信号放大的单核苷酸多态性快速分型方法,其特征在于:所述单核苷酸多态性快速分型新方法包含识别、转换和检测3个步骤;其中所述识别步骤是根据野生型和突变型的序列设计Flap primer 1、Flap primer 2和Invading primer,在FEN1酶的作用下可分别产生2种不同的5’端酶切产物P1和P2;其中所述转换步骤是根据P1和P2的序列设计2条不同的SDA扩增模板,酶切产物P1和P2触发SDA扩增实现单核苷酸多态性信息快速转换成2种不同扩增产物T1和T2;其中所述检测步骤是根据T1和T2的序列分别设计crRNA1和crRNA2作为CRISPR/Cas12a反应体系的引导链,通过荧光信号的“强”和“弱”可实现单核苷酸多态性的分型。本发明解决了传统CRISPR/Cas12a反应体系无法实现单核苷酸多态性分型的问题,可用于科研分析和临床检测,具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号:CN120005973A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510170784.0
申请日:2025-02-17
Applicant: 郑州大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/6876 , G16B20/20 , G16B30/00
Abstract: 一种基于CRISPR/Cas12a逻辑门的单核苷酸多态性分型方法,通过CRISPR/Cas12a反应体系荧光信号“有”和“无”、“强”和“弱”的逻辑门输入,实现单核苷酸多态性的分型输出,其特征在于:所述单核苷酸多态性分型新方法包括目标片段扩增和CRISPR/Cas12a检测两个步骤;其中所述目标片段扩增是通过扩增引物的设计在目标位点的‑15到‑11位引入CRISPR/Cas12a的PAM识别序列TTTN,扩增产物可被CRISPR/Cas12a检测;其中所述CRISPR/Cas12a检测是应用2条能够区分野生型和突变型扩增产物的crRNA1和crRNA2作为CRISPR/Cas12a反应体系的引导链,设计新型功能化单链DNA报告探针,通过荧光信号的“有”和“无”、“强”和“弱”的逻辑门实现单核苷酸多态性分型。本发明解决了传统CRISPR/Cas12a反应体系无法实现单核苷酸多态性分型的问题,可用于科研分析和临床检测,具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号:CN118777614A
公开(公告)日:2024-10-15
申请号:CN202410764570.1
申请日:2024-06-13
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N21/64 , G01N15/14
Abstract: 本发明提供了DSA‑PPh3分子在制备循环肿瘤细胞检测试剂中的用途及检测试剂和试剂盒。所述DSA‑PPh3分子为两端修饰正电荷三苯基膦盐(TPP)基团的二苯乙烯基蒽。所述循环肿瘤细胞检测试剂包括DSA‑PPh3分子和 PolyA‑TSP‑AuNPs,DSA‑PPh3分子作为线粒体荧光探针标记待测样品中的循环肿瘤细胞;所述PolyA‑TSP‑AuNPs识别所述循环肿瘤细胞的端粒酶,并进行特异性延长,以增强肿瘤细胞和白细胞的荧光差异。因此,基于线粒体和端粒酶活性,利用本发明提供的检测试剂、试剂盒或检测系统可以实现CTCs的高对比度双锚定鉴定,可以显著提升鉴定效率,而且能够实现对富集后CTCs的无损鉴定,此外,还具有所需材料合成简单便捷,操作时间短、灵敏度高及保持细胞活性等特点。
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公开(公告)号:CN118883681A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202410943779.4
申请日:2024-07-12
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N27/327 , C12Q1/682
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR和HCR原位生成铜纳米簇的可再生生物传感器,包括(1)表面固定有共价有机骨架和羧基功能化硫化银量子点的电极;(2)链霉亲和素化的壳层二氧化硅磁珠、标记有生物素的探针DNA1、crRNA、Cas13a、带有RNA序列的DNA2;(3)铜纳米簇Cu NCs。本发明通过CRISPR/Cas13a系统和杂交链式反应双重信号放大技术,联合三螺旋DNA结构,以共价有机骨架COF和硫化银量子点的复合材料为信号源,crRNA作为捕获目标物的捕获探针,原位生成的铜纳米簇作为信号削弱分子,构建了检测circRNA的可再生生物传感器。本发明的可再生生物传感器可以只通过改变crRNA捕获探针序列来检测不同circRNA,无需改变其他核酸序列,显示出在多识别的生物分析研究中的应用前景。
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公开(公告)号:CN118655318A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410700359.3
申请日:2024-05-31
Applicant: 郑州大学
IPC: G01N33/574 , G01N21/64 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/543 , G01N33/533 , G01N33/532
Abstract: 本发明提供了一种多功能信号探针、双模式免疫传感器及构建方法和应用。基于主客体多合一的简单信号放大策略,将CQDs和BSA‑AuNPs两种客体信号分子原位包载进主体分子ZIF‑8中,构建多功能信号探针Ab2/BSA‑AuNPs/CQDs@ZIF‑8。上述多功能信号探针、目标物和捕获探针Ab1/MNPs形成夹心结构,构建双模式免疫传感器。ZIF‑8的网状结构和高孔隙率可以负载大量信号分子,高比表面积和丰富的化学活性位点可以偶联目标物的相应抗体。该信号探针由于在酸性环境下极不稳定,目标物结合分离后,通过控制缓冲溶液pH可使其水解并释放大量CQDs和BSA‑AuNPs信号分子,产生明显的荧光信号和SPR信号,从而定量检测sCD146浓度。因此,上述多功能信号探针或双模式免疫传感器或检测方法可用于检测血浆中肿瘤生物标志物。
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公开(公告)号:CN118599968A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410788619.7
申请日:2024-06-18
Applicant: 郑州大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6886 , G01N21/76 , G01N33/52
Abstract: 本发明属于小胞外囊泡检测技术领域,具体涉及基于CRISPR/Cas12a和HCR的小胞外囊泡比色/化学发光双模式传感器及其应用。该传感器包括:捕获磁珠、双胆固醇探针、发夹探针H1和H2、链霉亲和素、Cas12a、crRNA、CRISPR/Cas12a激活链(Activator)、催化磁珠、显色液和化学发光底液;捕获磁珠上偶联有肿瘤特异性蛋白适配体;双胆固醇探针能结合小胞外囊泡且其粘性末端作为触发链能与H1杂交,打开H1发夹结构,H1新暴露出的序列能与发夹探针H2杂交,打开H2发夹结构,触发杂交链式反应;催化磁珠上偶联有辅助链和T‑HRP链,催化磁珠上的催化剂能催化不同底物产生比色和化学发光两种检测信号。
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