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公开(公告)号:CN117821547A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202310623395.X
申请日:2023-05-30
Applicant: 连云港冠昕医药科技有限公司 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种生物催化合成烟酰胺核糖的方法,属于生物催化反应技术领域,包括步骤S1:载体构建与克隆;取磷酸化酶(PNP)核苷酸序列用无缝克隆方式将其与载体pET28a连接得到磷酸化酶‑pET28a SEQ ID NO.1‑pET28a;步骤S2:培养取种;步骤S3:验证;步骤S4:酶的表达和提取;步骤S5:纯化;步骤S6:反应;步骤S7:测量。解决了化学方法合成烟酰胺核糖分为好几个步骤,会产生很多中间体,存在中间体分离困难的问题,导致产率不高,生产效率低下的技术问题,主要应用于生物催化合成烟酰胺核糖方面。
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公开(公告)号:CN116426550B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202310614049.5
申请日:2023-05-29
Applicant: 连云港冠昕医药科技有限公司 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及生物酶工程技术领域,特别涉及利用烟酰胺核糖激酶突变体及其重组菌高效合成β‑烟酰胺单核苷酸的方法,以下步骤:步骤1:选用核苷酸序列为SEQ ID NO.1‑6中的任意一种构建与克隆载体;步骤2:验证;步骤3:酶的表达和提取;步骤4:纯化;步骤5:反应;本发明具有以下有益效果:生产效率高、原料成本低且容易获得,利于工业化生产;收率高,产品纯度高;符合食品安全标准,安全性高;成本和质量都自主可控。
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公开(公告)号:CN116426550A
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202310614049.5
申请日:2023-05-29
Applicant: 连云港冠昕医药科技有限公司 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及生物酶工程技术领域,特别涉及利用烟酰胺核糖激酶突变体及其重组菌高效合成β‑烟酰胺单核苷酸的方法,以下步骤:步骤1:选用核苷酸序列为SEQ ID NO.1‑6中的任意一种构建与克隆载体;步骤2:验证;步骤3:酶的表达和提取;步骤4:纯化;步骤5:反应;本发明具有以下有益效果:生产效率高、原料成本低且容易获得,利于工业化生产;收率高,产品纯度高;符合食品安全标准,安全性高;成本和质量都自主可控。
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公开(公告)号:CN115094102A
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN202210605026.3
申请日:2022-05-31
Applicant: 江苏海洋大学 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
IPC: C12P17/12 , C12N9/12 , C12N9/04 , C12N11/091 , C12N11/089 , C12N11/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种固定化酶制备磷酸吡哆醛的方法,主要包括游离酶的制备,酶的固定化及填装,磷酸吡哆醛的制备反应等步骤。本发明提供的固定化酶制备磷酸吡哆醛的方法,相较于纯化学方法制备磷酸吡哆醛,条件更为温和,操作方便,所消耗的时间较短;且固定化的酶可以重复利用,环保高效,成本低廉,具有良好的工业化应用价值。
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公开(公告)号:CN118726509A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410765154.3
申请日:2024-06-14
Applicant: 江苏海洋大学 , 江苏联宇医疗器械有限公司 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种用脱乙酰酶催化高效合成氨基葡萄糖的方法,包括以下步骤:以乙酰氨基葡萄糖GlcNAc为底物,加入含有脱乙酰酶的蛋白液,在pH5.0~9.0、温度30~70℃条件下反应,即得氨基葡萄糖;所述脱乙酰酶的氨基酸序列选自SEQ ID NO.1~4。本发明通过重组表达获得了一种耐热性好、对GlcNAc转化率高的脱乙酰酶蛋白,转化率可达95%以上,实现了对氨基葡萄糖的高效生物合成。
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公开(公告)号:CN115896214A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211285283.X
申请日:2022-10-20
Applicant: 江苏海洋大学 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
Abstract: 本申请公开了一种生物催化合成假尿苷的方法,将D‑核糖与ATP在核糖激酶Ribokinase的作用下生成5‑P‑D‑核糖,而后与尿嘧啶(U)经ψ‑5'‑磷酸糖苷酶(YeiN)催化形成假尿苷中间体化合物ψMP。在上述反应后,再与CIP/AP经酶催化反应得最终产物假尿苷。本发明所述的方法,反应条件温和且收率较高,适用于工业化大规模生产,酶法生产生成有害废物少,环保且绿色友好。
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公开(公告)号:CN117384982A
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202311200976.9
申请日:2023-09-18
Applicant: 江苏海洋大学 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司 , 连云港杰瑞药业有限公司
Abstract: 本发明公开了一种磷酸吡哆醛的制备方法,包括以下步骤:(1)配制含有底物吡哆醇的反应液:将水、吡哆醇、PBS缓冲液、ATP钠盐和无水硫酸镁混合即得反应液,所述反应液的pH为4.0~7.3;(2)将步骤(1)配制的反应液和含有磷酸转移酶基因的大肠杆菌菌体混合,反应完成后即得磷酸吡哆醇溶液;(3)再经简单的化学氧化反应制得磷酸吡哆醛溶液。本发明的制备方法相较于现有的制备方法,优化了磷酸化步骤的反应条件,以吡哆醇为原料,在无水硫酸镁和辅酶(ATP钠盐)存在的条件下,直接通过发酵后的菌体制备磷酸吡哆醇,再经简单的氧化生成磷酸吡哆醛。具有成本低、操作过程简单等优点,更加适用于工业化应用。
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公开(公告)号:CN115725676A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202211581910.4
申请日:2022-12-09
Applicant: 江苏海洋大学 , 连云港博凯莱特生物科技有限公司
IPC: C12P19/40 , C12N15/70 , C12N11/089 , C12N9/10
Abstract: 本发明公开了一种修饰核苷的酶催化合成方法,具体涉及利用胸腺嘧啶核苷磷酸化酶与嘌呤核苷磷酸化酶作为生物催化剂,催化2’‑氟‑2’‑脱氧尿苷(2’F‑dU)与腺嘌呤进行转糖基化反应生成2’‑氟‑2’‑脱氧腺苷,利用生物酶催化合成修饰核苷的方法,相比化学方法大大降低了2’F‑dA的生产成本,消除了副产物处理过程中产生的环境影响。采用双酶催化反应体系,转化效率和最终产率相比化学合成有巨大优势。生产工艺简单,操作方便,是一种环境友好的绿色生物合成工艺。
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公开(公告)号:CN116376859A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310142831.1
申请日:2023-02-21
Applicant: 江苏海洋大学 , 连云港冠昕医药科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种二氢叶酸还原酶及其应用,所述二氢叶酸还原酶的氨基酸序列选自SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4。所述二氢叶酸还原酶用于体外生物合成6‑S‑四氢叶酸极大降低了生产成本,消除了副产物处理过程中产生的环境影响。且操作简单,条件温和,耗时较短,转化率和产物纯度均在86%以上,适合产业化应用。
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