一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法

    公开(公告)号:CN111424118B

    公开(公告)日:2022-10-25

    申请号:CN202010332050.5

    申请日:2020-04-24

    Abstract: 本发明公开了一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法,包括以下步骤:提取样本总RNA;设计用于扩增西番莲中重要病毒病原黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒基因片段的特异性引物;在无RNA酶的PCR管中加入提取的西番莲植物总RNA样品1~3μg高温变性获得病毒RNA作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链;利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物;将获得的PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。本发明应用黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒特异引物可以同时在单PCR管中检测4种西番莲主要病毒,特异性、简便性、灵敏度和准确性较单一病毒或两种病毒检测有较大的优势。

    一种大批量、快速研磨植物组织的方法

    公开(公告)号:CN114075561A

    公开(公告)日:2022-02-22

    申请号:CN202111393950.1

    申请日:2021-11-23

    Abstract: 本发明属于生物化学与分子生物学技术领域,具体涉及一种大批量、快速研磨植物组织的方法。本发明将植物组织样品和灭菌的小球放入灭菌的离心管中,封闭离心管口,置于含有液氮的耐低温容器中,封闭耐低温容器口;静置1~2min后,倒出液氮,再封闭耐低温容器口,摇甩耐低温容器若干次,得研磨样品。实施例结果表明,本发明研磨方法样品损耗量小,操作时间短,简单方便,实用性强,可避免样品交叉污染,工作效率高,技术优势,提取后所得的DNA或RNA的纯度和浓度较高,提取得到的RNA中没有蛋白质、酚类及DNA的污染,提取得到的DNA中没有蛋白质、酚类及RNA的污染。

    一种同步检测番茄中五种重要病毒病原的方法

    公开(公告)号:CN113481329A

    公开(公告)日:2021-10-08

    申请号:CN202110838783.0

    申请日:2021-07-23

    Abstract: 本发明公开了一种同步检测番茄中五种重要病毒病原的方法,所述的五种重要病毒病原为番茄褐色皱纹果病毒、番茄花叶斑驳病毒、南方番茄病毒、番茄褪绿病毒、番茄斑萎病毒。本发明应用多引物复合反转录聚合酶链式反应(RT‑PCR)结合,通过提取植物总RNA、随机引物合成不同种类病毒cDNA第一链、5种病毒特异引物多重复合PCR检测,省略了单一病毒引物逆转录合成cDNA第一链和病毒核苷酸序列测定与分析等步骤,利用多重PCR的快速和灵敏性获得目的片段,为大量、快速、准确、灵敏检测各类番茄病样建立了一种科学的方法。

    一种同步检测花毛茛中五种重要病毒病原的方法

    公开(公告)号:CN112029907A

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN202010918969.2

    申请日:2020-09-04

    Abstract: 本发明公开了一种同步检测花毛茛中五种重要病毒病原的方法,所述的五种重要病毒病原为花毛茛轻花叶病毒、花毛茛隐症病毒、花毛茛白斑驳病毒、花毛茛花叶病毒和花毛茛叶片皱缩病毒。本发明应用通过提取植物总RNA或病毒RNA、随机引物合成不同种类病毒cDNA第一链、5种病毒特异引物多重复合PCR检测,省略了单一病毒引物逆转录合成cDNA第一链和病毒核苷酸序列测定与分析等步骤,利用多重PCR的快速和灵敏性获得目的片段,为大量、快速、准确、灵敏检测各类花毛茛病毒病样品建立了一种科学的方法。

    一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法

    公开(公告)号:CN111424118A

    公开(公告)日:2020-07-17

    申请号:CN202010332050.5

    申请日:2020-04-24

    Abstract: 本发明公开了一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法,包括以下步骤:提取样本总RNA;设计用于扩增西番莲中重要病毒病原黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒基因片段的特异性引物;在无RNA酶的PCR管中加入提取的西番莲植物总RNA样品1~3μg高温变性获得病毒RNA作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链;利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物;将获得的PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。本发明应用黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒特异引物可以同时在单PCR管中检测4种西番莲主要病毒,特异性、简便性、灵敏度和准确性较单一病毒或两种病毒检测有较大的优势。

    一种同步检测花毛茛中五种重要病毒病原的方法

    公开(公告)号:CN112029907B

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202010918969.2

    申请日:2020-09-04

    Abstract: 本发明公开了一种同步检测花毛茛中五种重要病毒病原的方法,所述的五种重要病毒病原为花毛茛轻花叶病毒、花毛茛隐症病毒、花毛茛白斑驳病毒、花毛茛花叶病毒和花毛茛叶片皱缩病毒。本发明应用通过提取植物总RNA或病毒RNA、随机引物合成不同种类病毒cDNA第一链、5种病毒特异引物多重复合PCR检测,省略了单一病毒引物逆转录合成cDNA第一链和病毒核苷酸序列测定与分析等步骤,利用多重PCR的快速和灵敏性获得目的片段,为大量、快速、准确、灵敏检测各类花毛茛病毒病样品建立了一种科学的方法。

    一种培养烟粉虱注灌装置

    公开(公告)号:CN205213899U

    公开(公告)日:2016-05-11

    申请号:CN201520942370.7

    申请日:2015-11-24

    Abstract: 本实用新型公开一种培养烟粉虱注灌装置。该装置设有塑料瓶、连接管、长软管、滴液软管和T形三通管。所述塑料瓶的瓶盖与连接管的一端连通且在连接处密封固定连接,连接管的另一端与长软管的一端密封连接,长软管的另一端与T形三通管的垂直管管口密封连接,滴液软管的两端分别与T形三通管的水平管两端密封连接,在滴液软管的管壁均布有2个以上的孔。本实用新型避免了虫源交叉污染、提高了工作效率,避免了手伸入养虫笼内浇灌液体时对养虫笼内烟粉虱的惊扰及烟粉虱的逸出,为准确获得实验数据提供了保障。

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