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公开(公告)号：CN103740865B
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410034604.8
申请日：2014-01-25
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种烟草花叶型病株中烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒3种病毒的检测方法。通过烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、烟草脉带花叶病毒特异性混合抗体诱捕病样中病毒，不必提取样品总RNA进行随机引物逆转录和特异性病毒引物复合PCR反应，专门针对烟草生产过程对烟草中上部叶片为害较为严重且不能从症状区分病原而建立的一种单管同时检测3种病毒中的1、2或3种不同病毒组合的方法，检测时间仅需5小时。本方法将快速、特异的免疫沉淀与灵敏的复合RT-PCR结合，同时设置健康烟草随机引物cDNA产物和相应病毒PCR特异片段阳性质粒作为阴、阳性对照，从而快速、准确、灵敏的检测田间烟草植株样品、抗病毒材料及田间环境疑似侵染源等。
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公开(公告)号：CN101824490B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN201010172289.7
申请日：2010-05-14
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明提供了一种水稻矮缩病毒的快速检测方法，其步骤包括通过水稻矮缩病毒抗体特异捕获水稻矮缩病毒、高温变性获得病毒RNA作为模板、利用水稻矮缩病毒特异性引物进行一步法反转录聚合酶链式反应one step RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳检测目的片段；该方法利用抗体的高效价及特异性，可特异快速的获得目的片段，为研究病毒的分子变异而进行的基因组序列扩增提供了快捷特异的方法，从而完善了免疫捕获RT-PCR的技术。
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公开(公告)号：CN102128929A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010592484.5
申请日：2010-12-16
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种水稻矮缩病毒三抗夹心酶联检测试剂盒，试剂盒包含阳性对照、阴性对照、水稻矮缩病毒多克隆抗体、水稻矮缩病毒单克隆抗体、酶标抗体及其它材料和药品，所说的其它材料和药品包括被缓冲液、PBST、病毒抽提缓冲液、封闭缓冲液、底物缓冲液、底物、5块酶标板及20个一次性滴管，水稻矮缩病毒多克隆抗体在分离提纯水稻矮缩病毒后，通过家兔免疫分离血清得到；所述的水稻矮缩病毒单克隆抗体在分离提纯水稻矮缩病毒后，通过小鼠免疫、细胞融合、克隆纯化得到；本发明制备的试剂盒检测灵敏度高、特异性强，可规模化生产用于水稻矮缩病的田间监测。
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公开(公告)号：CN112029907B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202010918969.2
申请日：2020-09-04
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种同步检测花毛茛中五种重要病毒病原的方法，所述的五种重要病毒病原为花毛茛轻花叶病毒、花毛茛隐症病毒、花毛茛白斑驳病毒、花毛茛花叶病毒和花毛茛叶片皱缩病毒。本发明应用通过提取植物总RNA或病毒RNA、随机引物合成不同种类病毒cDNA第一链、5种病毒特异引物多重复合PCR检测，省略了单一病毒引物逆转录合成cDNA第一链和病毒核苷酸序列测定与分析等步骤，利用多重PCR的快速和灵敏性获得目的片段，为大量、快速、准确、灵敏检测各类花毛茛病毒病样品建立了一种科学的方法。
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公开(公告)号：CN110940690A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201811105046.4
申请日：2018-09-21
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
IPC: G01N23/22 , G01N23/2202
Abstract: 本发明提供了一种黄瓜绿斑驳花叶病毒粒体的原位分离固定电子显微镜诊断方法，包括取样、切丝固定、负染色、电镜观察等步骤。整个过程仅用时十几分钟，具有快速、准确、高效等特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109929810A
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201910116016.1
申请日：2019-02-15
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种马铃薯品种会-2中马铃薯卷叶病毒毒株及其构建方法与应用。所述的马铃薯品种会-2中马铃薯卷叶病毒毒株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日：2018年11月26日，保藏编号：CGMCC No.16892。马铃薯品种会-2中马铃薯卷叶病毒（Potato virus A，PVA）毒株建立包括样品采集；病原鉴定；会-2品种中单一马铃薯卷叶病毒组培苗建立以及应用。所述的样品采集包括病害调查、样品采集、保存；包括通过带毒薯块幼芽在培养基中诱导为组培苗、在一定温度条件下保存该带有PRLV会-2品种组培苗；应用为所述的马铃薯品种会-2中马铃薯卷叶病毒毒株在检测中的应用。
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公开(公告)号：CN109929809A
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201910116012.3
申请日：2019-02-15
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种马铃薯品种丽薯6号中马铃薯S病毒毒株及其构建方法与应用。所述的马铃薯品种丽薯6号中马铃薯S病毒毒株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日：2018年11月26日，保藏编号：CGMCC No.16893。马铃薯品种丽薯6号中马铃薯S病毒（Potato virus S，PVS）毒株建立包括样品采集；病原鉴定；丽薯6号品种中单一马铃薯卷叶病毒组培苗建立以及应用。所述的样品采集包括病害调查、样品采集、保存；包括通过带毒薯块幼芽在培养基中诱导为组培苗、在一定温度条件下保存该带有PVS丽薯6号品种组培苗；应用为所述的马铃薯品种丽薯6号中马铃薯S病毒毒株在检测中的应用。
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公开(公告)号：CN115873990A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202211354813.1
申请日：2022-11-01
Applicant: 贵州省烟草公司黔西南州公司 , 贵州省烟草科学研究院 , 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种检测烟草病毒的引物组、试剂盒及方法。所述引物组由引物对A、引物对B、引物对C、引物对D四对中的一对或多对组成；所述引物组A由序列表的序列1至序列2所示的单链DNA分子组成的引物对；所述引物组B由序列表的序列3至4所示的单链DNA分子组成的引物对；所述引物组C由序列表的序列5至6所示的单链DNA分子组成的引物对；所述引物组D由序列表的序列7至8所示的单链DNA分子组成的引物对；本发明省略了单一病毒引物逆转录合成cDNA第一链和病毒核苷酸序列测定与分析等步骤，利用多重PCR的快速和灵敏性获得目的片段，为大量、快速、准确、灵敏检测烟草等植株样品建立了一种科学的方法。
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公开(公告)号：CN114075561A
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202111393950.1
申请日：2021-11-23
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明属于生物化学与分子生物学技术领域，具体涉及一种大批量、快速研磨植物组织的方法。本发明将植物组织样品和灭菌的小球放入灭菌的离心管中，封闭离心管口，置于含有液氮的耐低温容器中，封闭耐低温容器口；静置1～2min后，倒出液氮，再封闭耐低温容器口，摇甩耐低温容器若干次，得研磨样品。实施例结果表明，本发明研磨方法样品损耗量小，操作时间短，简单方便，实用性强，可避免样品交叉污染，工作效率高，技术优势，提取后所得的DNA或RNA的纯度和浓度较高，提取得到的RNA中没有蛋白质、酚类及DNA的污染，提取得到的DNA中没有蛋白质、酚类及RNA的污染。
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公开(公告)号：CN113481329A
公开(公告)日：2021-10-08
申请号：CN202110838783.0
申请日：2021-07-23
Applicant: 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所
Abstract: 本发明公开了一种同步检测番茄中五种重要病毒病原的方法，所述的五种重要病毒病原为番茄褐色皱纹果病毒、番茄花叶斑驳病毒、南方番茄病毒、番茄褪绿病毒、番茄斑萎病毒。本发明应用多引物复合反转录聚合酶链式反应（RT‑PCR）结合，通过提取植物总RNA、随机引物合成不同种类病毒cDNA第一链、5种病毒特异引物多重复合PCR检测，省略了单一病毒引物逆转录合成cDNA第一链和病毒核苷酸序列测定与分析等步骤，利用多重PCR的快速和灵敏性获得目的片段，为大量、快速、准确、灵敏检测各类番茄病样建立了一种科学的方法。
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