公开(公告)号：CN113234670B

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202110579178.6

申请日：2021-05-26

Applicant: 西安交通大学

Inventor： 谢文俊 ,  戚瑛 ,  李晶晶 ,  张伊 ,  徐睿 ,  张玉

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明公开了一种成年小鼠心房肌细胞的分离与培养方法，本方法在心房肌细胞的不同培养阶段分别利用两种不同培养液进行培养，以增加心房肌细胞的数量与质量，在培养过程中加大了对细胞的营养与保护，大大降低了心房肌细胞的受损率。铺板培养液的应用能够使离体的心房肌细胞快速适应培养环境，提高细胞贴壁的效率；普通培养液则为心房肌细胞的后续培养提供具有稳定温度、pH及充足营养的生存条件，保持其良好的生长状态。结果表明，本发明方法能够得到高产量与高质量的成年小鼠心房肌细胞，成本低且高效稳定，分离出的心房肌细胞数量大、活力高，能在体外继续培养4‑5天，为在细胞水平上研究成年小鼠心脏生理及病理功能提供了良好的实验素材。

公开(公告)号：CN113234670A

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN202110579178.6

申请日：2021-05-26

Applicant: 西安交通大学

Inventor： 谢文俊 ,  戚瑛 ,  李晶晶 ,  张伊 ,  徐睿 ,  张玉

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明公开了一种成年小鼠心房肌细胞的分离与培养方法，本方法在心房肌细胞的不同培养阶段分别利用两种不同培养液进行培养，以增加心房肌细胞的数量与质量，在培养过程中加大了对细胞的营养与保护，大大降低了心房肌细胞的受损率。铺板培养液的应用能够使离体的心房肌细胞快速适应培养环境，提高细胞贴壁的效率；普通培养液则为心房肌细胞的后续培养提供具有稳定温度、pH及充足营养的生存条件，保持其良好的生长状态。结果表明，本发明方法能够得到高产量与高质量的成年小鼠心房肌细胞，成本低且高效稳定，分离出的心房肌细胞数量大、活力高，能在体外继续培养4‑5天，为在细胞水平上研究成年小鼠心脏生理及病理功能提供了良好的实验素材。

公开(公告)号：CN110441273A

公开(公告)日：2019-11-12

申请号：CN201910707026.2

申请日：2019-08-01

Applicant: 西安交通大学

Inventor： 谢文俊 ,  贺雯瑾 ,  张伊 ,  李晶晶 ,  戚瑛

IPC: G01N21/64

Abstract: 一种评价肌浆网钙泄漏的方法，步骤1)进行心肌细胞离体分离与培养实验并在激光共聚焦显微镜记录心肌细胞的钙活动；步骤2)对步骤1)采集的荧光图像进行标准化，再对标准化处理后的图像进行荧光强度统计，获取其幅度分布直方图；步骤3)对步骤2)中幅度分布直方图围成的曲线进行以其峰值为中心的左右不对称高斯拟合，通过原曲线及拟合曲线中心两侧的面积计算得到荧光偏差参量；步骤4)、对原始图像进行时间差分，得到流量图：对流量图重复步骤3)的操作，得到其幅度分布直方图后进行不对称高斯拟合，再通过计算得到流量偏差参量，得到两个描述肌浆网钙泄漏的新参数。本发明能够更加快速有效且准确的评价肌浆网钙泄漏水平。

公开(公告)号：CN110441273B

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN201910707026.2

申请日：2019-08-01

Applicant: 西安交通大学

Inventor： 谢文俊 ,  贺雯瑾 ,  张伊 ,  李晶晶 ,  戚瑛

IPC: G01N21/64

Abstract: 一种评价肌浆网钙泄漏的方法，步骤1)进行心肌细胞离体分离与培养实验并在激光共聚焦显微镜记录心肌细胞的钙活动；步骤2)对步骤1)采集的荧光图像进行标准化，再对标准化处理后的图像进行荧光强度统计，获取其幅度分布直方图；步骤3)对步骤2)中幅度分布直方图围成的曲线进行以其峰值为中心的左右不对称高斯拟合，通过原曲线及拟合曲线中心两侧的面积计算得到荧光偏差参量；步骤4)、对原始图像进行时间差分，得到流量图：对流量图重复步骤3)的操作，得到其幅度分布直方图后进行不对称高斯拟合，再通过计算得到流量偏差参量，得到两个描述肌浆网钙泄漏的新参数。本发明能够更加快速有效且准确的评价肌浆网钙泄漏水平。