公开(公告)号：CN117551804B

公开(公告)日：2024-11-22

申请号：CN202311516904.5

申请日：2023-11-15

Applicant: 西北农林科技大学 ,  西安黄氏生物工程有限公司

Inventor： 胡小平 ,  黄颖琪 ,  王强 ,  秦君 ,  黄卫利

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明适用于植物病原菌检测方法技术领域，提供了一种检测苹果黑星病菌的引物、试剂盒及其检测方法，检测苹果黑星病菌的RPA引物及CRISPR/Cas12a引物；检测苹果黑星病菌的试剂盒，包含上述引物、Cas12蛋白、T7转录酶、DNA聚合酶以及Cas12/13专用核酸检测试纸条。检测方法包括：利用RPA扩增产物、体外转录合成的指导RNA和FB探针建立CRISPR/Cas12a检测反应体系；反应结束后将Cas12/13专用核酸检测试纸条插入到反应管中，观察试纸条上检测线的变化；若在试纸条的测试条带上出现颜色变化，即为阳性反应，证明含有苹果黑星病菌。本发明特异性强、灵敏度高、结果准确且实用性高。

公开(公告)号：CN116479166A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310651295.8

申请日：2023-06-02

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 秦君 ,  黄颖琪 ,  廖西文 ,  胡小平 ,  商文静

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及大丽轮枝菌稳定表达的内参基因及其引物和应用。本发明以大丽轮枝菌H3基因、Tubulin基因、EF1a基因和GAPDH基因为候选基因，采用实时荧光定量PCR进行扩增，利用geNorm和NormFinder算法程序进行稳定性分析，并通过RefFinder在线分析工具进行综合分析，最后发现在大丽轮枝菌中Tubulin基因表达最为稳定。以Tubulin基因作为大丽轮枝菌荧光定量PCR检测中的内参基因能够达到校准的目的，准确定量检测大丽轮枝菌相关基因表达。

公开(公告)号：CN117551804A

公开(公告)日：2024-02-13

申请号：CN202311516904.5

申请日：2023-11-15

Applicant: 西北农林科技大学 ,  西安黄氏生物工程有限公司

Inventor： 胡小平 ,  黄颖琪 ,  王强 ,  秦君 ,  黄卫利

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明适用于植物病原菌检测方法技术领域，提供了一种检测苹果黑星病菌的引物、试剂盒及其检测方法，检测苹果黑星病菌的RPA引物及CRISPR/Cas12a引物；检测苹果黑星病菌的试剂盒，包含上述引物、Cas12蛋白、T7转录酶、DNA聚合酶以及Cas12/13专用核酸检测试纸条。检测方法包括：利用RPA扩增产物、体外转录合成的指导RNA和FB探针建立CRISPR/Cas12a检测反应体系；反应结束后将Cas12/13专用核酸检测试纸条插入到反应管中，观察试纸条上检测线的变化；若在试纸条的测试条带上出现颜色变化，即为阳性反应，证明含有苹果黑星病菌。本发明特异性强、灵敏度高、结果准确且实用性高。