公开(公告)号：CN101953297A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010157445.2

申请日：2010-04-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张恩慧 ,  杨平安 ,  许念芳 ,  许忠民 ,  程永安 ,  马勇斌 ,  王小艳 ,  马青山

IPC: A01H4/00 ,  C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种促进甘蓝游离小孢子胚胎发生的方法，该方法是在含有3mL NLN-13悬浮小孢子的培养皿中直接添加秋水仙素生物碱和噻二唑苯基脲(TDZ)细胞分裂素诱导胚状体发生。具体包括下列步骤：1)分别配制秋水仙素和TDZ母液的步骤；2)分别对秋水仙素母液和TDZ母液的灭菌步骤；3)花蕾选取与消毒步骤；4)小孢子游离与纯化步骤；5)诱导胚状体步骤。该方法对常规培养无反应的甘蓝材料，能促使其出胚，对出胚的甘蓝材料，能提高其胚状体产量。

公开(公告)号：CN102204513A

公开(公告)日：2011-10-05

申请号：CN201110089092.1

申请日：2011-04-11

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张恩慧 ,  马勇斌 ,  程永安 ,  杨安平 ,  许忠民 ,  朱守亮 ,  高海娜 ,  马英夏 ,  李伟 ,  王朝阳

IPC: A01H4/00 ,  A01G9/10

Abstract: 本发明公开了一种利用甘蓝游离小孢子不定芽叶片再生DH植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：A1，胚状体不定芽诱导；A2，外植体获得：以小孢子胚状体诱导出不定芽叶片达1cm时起计算叶片生长日龄，选用生长日龄为25天的叶片作为离体培养的外植体；A3，外植体再生芽的分化诱导；A4，再生芽的生根诱导与移栽。在MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+GA31.5mg·L-1的培养基上，再生芽分化频率高达80.36％，比未添加GA3增加16.07％，再生芽分化系数为4.15。该方法在短时间内将有限的同一基因型的小孢子DH植株数量扩大32倍以上，获得足够数量同一基因型的小孢子DH群体，实现当年DH群体农艺性状田间鉴定和次年花期配合力测定。

公开(公告)号：CN101953297B

公开(公告)日：2012-09-05

申请号：CN201010157445.2

申请日：2010-04-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张恩慧 ,  杨安平 ,  许念芳 ,  许忠民 ,  程永安 ,  马勇斌 ,  王小艳 ,  马青山

IPC: A01H4/00 ,  C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种促进甘蓝游离小孢子胚胎发生的方法，该方法是在含有3mL NLN-13悬浮小孢子的培养皿中直接添加秋水仙素生物碱和噻二唑苯基脲(TDZ)细胞分裂素诱导胚状体发生。具体包括下列步骤：1)分别配制秋水仙素和TDZ母液的步骤；2)分别对秋水仙素母液和TDZ母液的灭菌步骤；3)花蕾选取与消毒步骤；4)小孢子游离与纯化步骤；5)诱导胚状体步骤。该方法对常规培养无反应的甘蓝材料，能促使其出胚，对出胚的甘蓝材料，能提高其胚状体产量。