一种快速高效的小麦条锈菌RNA提取方法

    公开(公告)号:CN103589714B

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201310548719.4

    申请日:2013-11-08

    Inventor: 胡小平 马丽杰

    Abstract: RNA(Ribonucleic acid)在活体生物细胞内普遍存在,是生物的遗传信息中间载体,参与DNA的转录和蛋白质的合成。随着环境因子发生改变,RNA会在第一时间作出反应,离体RNA或者死亡细胞的RNA极易降解。因此,RNA被作为检测当前有活性微生物状态的第一指标。提取完整的、高质量的小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)夏孢子RNA是进一步开展转录组学、条锈菌存活数量监测等研究的基础。建立的小麦条锈菌RNA提取方法涉及的关键技术包括试验材料完全转移、防止氧化等。保障小麦条锈菌完全转移及提高研磨效果的关键预处理溶液是pH为8.0的0.01M Tris‑HCl;涉及的防止氧化的主要成分有1%SDS(W∶V)、1%∶‑巯基乙醇(V∶V)和16%PVP(W∶V)。

    小麦条锈菌17号生理小种的分子检测方法

    公开(公告)号:CN103555824B

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201310416116.9

    申请日:2013-09-08

    Abstract: 本发明公开了一种小麦条锈菌17号生理小种的分子检测方法。采用RAPD分子标记转化为SCAR分子标记的方法,获得了17号生理小种的特异性引物(上游引物5’-TTCCCCCGCTGTCT,下游引物5’-GTTGAGCGGGGGAA),经过PCR扩增反应(反应条件:94℃,5min,1循环;94℃,30s,60℃,1min,72℃,90s,35循环;72℃7min1循环)、2%琼脂糖凝胶电泳,可获得约1000bp的特异性条带。因此,本发明可用于从分子水平快速鉴别和区分小麦条锈菌17号生理小种,为开展小麦条锈病分子流行学研究奠定了基础。

    一种快速高效的小麦条锈菌RNA提取方法

    公开(公告)号:CN103589714A

    公开(公告)日:2014-02-19

    申请号:CN201310548719.4

    申请日:2013-11-08

    Inventor: 胡小平 马丽杰

    Abstract: RNA(Ribonucleic acid)在活体生物细胞内普遍存在,是生物的遗传信息中间载体,参与DNA的转录和蛋白质的合成。随着环境因子发生改变,RNA会在第一时间作出反应,离体RNA或者死亡细胞的RNA极易降解。因此,RNA被作为检测当前有活性微生物状态的第一指标。提取完整的、高质量的小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)夏孢子RNA是进一步开展转录组学、条锈菌存活数量监测等研究的基础。建立的小麦条锈菌RNA提取方法涉及的关键技术包括试验材料完全转移、防止氧化等。保障小麦条锈菌完全转移及提高研磨效果的关键预处理溶液是pH为8.0的0.01M Tris-HCl;涉及的防止氧化的主要成分有1%SDS(W∶V)、1%β-巯基乙醇(V∶V)和16%PVP(W∶V)。

    小麦条锈菌17号生理小种的分子检测方法

    公开(公告)号:CN103555824A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310416116.9

    申请日:2013-09-08

    CPC classification number: C12Q1/04 C12Q1/686 C12Q2535/139 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明公开了一种小麦条锈菌17号生理小种的分子检测方法。采用RAPD分子标记转化为SCAR分子标记的方法,获得了17号生理小种的特异性引物(上游引物5’-TTCCCCCGCTGTCT,下游引物5’-GTTGAGCGGGGGAA),经过PCR扩增反应(反应条件:94℃,5min,1循环;94℃,30s,60℃,1min,72℃,90s,35循环;72℃7min1循环)、2%琼脂糖凝胶电泳,可获得约1000bp的特异性条带。因此,本发明可用于从分子水平快速鉴别和区分小麦条锈菌17号生理小种,为开展小麦条锈病分子流行学研究奠定了基础。

Patent Agency Ranking