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公开(公告)号:CN101186925A
公开(公告)日:2008-05-28
申请号:CN200710019050.4
申请日:2007-11-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体,本发明构建的抗乳腺炎转基因载体pCMV/CSN2-hLY-hIFA,在乳腺细胞中能高水平表达绿色荧光蛋白,在泌乳期的乳腺细胞中,由于CSN2的启动子发挥了启动作用,使转pCMV/CSN2-hLY-hIFA的乳腺细胞分泌大量的人溶菌酶和人干扰素A,在通过乳汁分离获得目的蛋白的同时又能较好的防治家畜乳腺炎。
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公开(公告)号:CN100584951C
公开(公告)日:2010-01-27
申请号:CN200710017948.8
申请日:2007-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明公开公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法,该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1),其中,在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列,将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克隆载体pGEM-3Z,合成含有Bsp14071,Nhe1,Not1,Bsu151(Cla1),Bst11071,Pf12311,Spe1,Pst1,Sac II稀少酶切位点的序列,将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间,正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点,从而便于不同基因作为同源臂插入。在基因打靶载体正选基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除正选基因。
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公开(公告)号:CN101117636A
公开(公告)日:2008-02-06
申请号:CN200710017948.8
申请日:2007-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法,该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1),其中,在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列,将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克隆载体pGEM-3Z,合成含有Bsp14071,Nhe1,Not1,Bsu151(Cla1),Bst11071,Pf12311,Spe1,Pst1,Sac II稀少酶切位点的序列,将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间,正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点,从而便于不同基因作为同源臂插入。在基因打靶载体正选基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除正选基因。
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公开(公告)号:CN101186925B
公开(公告)日:2010-05-26
申请号:CN200710019050.4
申请日:2007-11-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体,本发明构建的抗乳腺炎转基因载体pCMV/CSN2-hLY-hIFA,在乳腺细胞中能高水平表达绿色荧光蛋白,在泌乳期的乳腺细胞中,由于CSN2的启动子发挥了启动作用,使转pCMV/CSN2-hLY-hIFA的乳腺细胞分泌大量的人溶菌酶和人干扰素A,在通过乳汁分离获得目的蛋白的同时又能较好的防治家畜乳腺炎。
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