公开(公告)号：CN105861746A

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201610231624.3

申请日：2016-04-14

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 童德文 ,  黄勇 ,  邢娜 ,  赵晓民

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2563/137

Abstract: 本发明专利提供了一种从粪便中快速高效地富集病毒，通过特异性DNA标签偶联的金纳米颗粒放大信号，再用PCR快速检测PEDV早期感染的方法。本方法以位于PEDV全基因组中ORF1a基因为靶序列，设计特异性核酸探针，从中筛选和优化出具有高度特异性，富集病毒能力强、易于扩增和检测的2段探针，利用此2段探针分别功能化的磁性微粒和纳米金微粒，建立基于纳米微粒的PEDV特异性的PCR检测技术；同时，本技术方法实现了粪便样品裂解液与功能化磁性微粒直接进行杂交反应的技术突破，完全省略了样品核酸的纯化步骤，不仅提高了特异性和敏感性，同时进一步简化了检测步骤，缩短了检测时间。本发明提供的方法不仅省时、省力、成本低，而且可以准确提示动物病毒感染水平。

公开(公告)号：CN104862417A

公开(公告)日：2015-08-26

申请号：CN201510254430.0

申请日：2015-05-18

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 黄勇 ,  童德文 ,  赵晓民 ,  邢娜 ,  张秀娟

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

CPC classification number: Y02A50/451 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2563/137 ,  C12Q2563/143

Abstract: 本发明公开了一种基于DNA标签-PCR快速检测TGEV早期感染的方法，该方法通过特异性核酸偶联的磁性微粒从血清中快速高效地富集病毒，并在此基础上进一步通过特异性DNA标签偶联的金纳米颗粒将核酸样本信号放大，使核酸样本达到PCR检测所需的核酸模板浓度，具有省时、省力、成本低等特点；此外，本发明的检测方法因不需要经过提取RNA再反转录为cDNA，所以操作简便，成本低，易于产业化和大规模应用。