一种提高病毒诱导醋栗番茄内源基因沉默效率的方法

    公开(公告)号:CN103146743B

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201210510357.5

    申请日:2012-11-18

    Inventor: 梁燕 李翠 张振才

    Abstract: 本发明公开了一种提高病毒诱导醋栗番茄内源基因沉默效率的方法,本发明综合考虑了影响VIGS沉默效率的多方面因素,通过不同接种方法与接种农杆菌菌液浓度,结合沉默效率:沉默频率、沉默效力、沉默效果,评价方法得到了醋栗番茄病毒诱导基因沉默的最优体系,适宜的接种方法与浓度提高了沉默效率。用本发明方法评价VIGS沉默效率时间短、速度快、效率高,可应用于其他植物病毒诱导基因沉默优化体系的评价,为快速验证基因功能提供了有效的方法。

    一种提高病毒诱导醋栗番茄内源基因沉默效率的方法

    公开(公告)号:CN103146743A

    公开(公告)日:2013-06-12

    申请号:CN201210510357.5

    申请日:2012-11-18

    Inventor: 梁燕 李翠 张振才

    Abstract: 本发明公开了一种提高病毒诱导醋栗番茄内源基因沉默效率的方法,本发明综合考虑了影响VIGS沉默效率的多方面因素,通过不同接种方法与接种农杆菌菌液浓度,结合沉默效率:沉默频率、沉默效力、沉默效果,评价方法得到了醋栗番茄病毒诱导基因沉默的最优体系,适宜的接种方法与浓度提高了沉默效率。用本发明方法评价VIGS沉默效率时间短、速度快、效率高,可应用于其他植物病毒诱导基因沉默优化体系的评价,为快速验证基因功能提供了有效的方法。

    诱导培养基及用其培养番茄小孢子获得愈伤组织的方法

    公开(公告)号:CN101824396A

    公开(公告)日:2010-09-08

    申请号:CN201010168471.5

    申请日:2010-05-11

    Abstract: 本发明涉及一种诱导培养基及利用该诱导培养基游离培养番茄小孢子获得愈伤组织的方法。上述诱导培养基包含有基本培养基(MS、PM或HN)、碳源(蔗糖或麦芽糖)、附加物(谷氨酰胺和/或AgNO3)和植物生长调节剂(NAA+6-BA)。本发明综合考虑了影响番茄小孢子培养的多方面因素,通过尝试多种培养基及植物生长调节剂的组合,得到了适宜小孢子生长的培养基配方,高、低温交替处理预培养的方法提高了出愈率,通过液体游离培养进一步提高了出愈率,为后续研究工作的顺利开展奠定了坚实的基础。

    一种用于鉴定番茄萼片形态的SSR分子标记、引物及应用

    公开(公告)号:CN106868159B

    公开(公告)日:2020-12-08

    申请号:CN201710165646.9

    申请日:2017-03-20

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定番茄萼片形态的SSR分子标记引物,为:正向引物:TGGAAAGAAGCAGTAGCATTG;反向引物:CAACGAACATCCTCCGTTCT。同时本发明还公开了SSR分子标记及鉴定番茄萼片形态的方法。该SSR分子标记适用于番茄外观形态种质资源的遗传评价、种质鉴定及分子标记辅助育种研究,重复性好、可靠性高。为培育出新型外观形态的番茄新品种提供行之有效的鉴定方法,从而增加鲜食番茄外观多样性及美观度,同时本发明为番茄外观形态种质资源的遗传评价提供新的依据。

    一种用于鉴定番茄萼片形态的SSR分子标记、引物及应用

    公开(公告)号:CN106868159A

    公开(公告)日:2017-06-20

    申请号:CN201710165646.9

    申请日:2017-03-20

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定番茄萼片形态的SSR分子标记引物,为:正向引物:TGGAAAGAAGCAGTAGCATTG;反向引物:CAACGAACATCCTCCGTTCT。同时本发明还公开了SSR分子标记及鉴定番茄萼片形态的方法。该SSR分子标记适用于番茄外观形态种质资源的遗传评价、种质鉴定及分子标记辅助育种研究,重复性好、可靠性高。为培育出新型外观形态的番茄新品种提供行之有效的鉴定方法,从而增加鲜食番茄外观多样性及美观度,同时本发明为番茄外观形态种质资源的遗传评价提供新的依据。

    诱导培养基及用其培养番茄小孢子获得愈伤组织的方法

    公开(公告)号:CN101824396B

    公开(公告)日:2013-04-10

    申请号:CN201010168471.5

    申请日:2010-05-11

    Abstract: 本发明涉及一种诱导培养基及利用该诱导培养基游离培养番茄小孢子获得愈伤组织的方法。上述诱导培养基包含有基本培养基(MS、PM或HN)、碳源(蔗糖或麦芽糖)、附加物(谷氨酰胺和/或AgNO3)和植物生长调节剂(NAA+6-BA)。本发明综合考虑了影响番茄小孢子培养的多方面因素,通过尝试多种培养基及植物生长调节剂的组合,得到了适宜小孢子生长的培养基配方,高、低温交替处理预培养的方法提高了出愈率,通过液体游离培养进一步提高了出愈率,为后续研究工作的顺利开展奠定了坚实的基础。

    一种用于鉴定番茄柱头颜色的dCAPS标记引物及其鉴定方法

    公开(公告)号:CN115961066A

    公开(公告)日:2023-04-14

    申请号:CN202210867332.4

    申请日:2022-07-22

    Inventor: 梁燕 黎玉顺

    Abstract: 本发明提供了一种用于鉴定番茄柱头颜色的dCAPS标记引物,包括dCAPS上游引物和dCAPS下游引物,核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑2所示。还提供了利用该标记引物鉴定番茄柱头颜色的方法,用dCAPS上游引物和dCAPS下游引物对提取的待测样品的基因组DNA进行PCR扩增反应,得到PCR产物,1.5%琼脂糖凝胶电泳检测后,然后利用内切酶BseXI对PCR产物进行酶切,得到酶切产物进行12%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染和显影观察酶切检测结果;酶切检测结果为105bp单一条带,则为黄柱头番茄单株;酶切检测结果为68bp和37bp两条带,则为纯合绿色柱头番茄单株;酶切检测结果为105bp、68bp和37bp三条带,则为杂合绿柱头番茄单株。本发明为番茄外观形态种质资源的遗传评价提供新的依据。

    一种番茄基因组总DNA提取试剂盒及其提取方法

    公开(公告)号:CN102533731A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201210016509.6

    申请日:2012-01-19

    Abstract: 本发明根据番茄的生长习性提供了一种番茄基因组总DNA提取试剂盒及其提取方法,包括以下试剂:(1)1M Tris-HCl(pH8.0);(2)0.25M EDTA(pH8.0);(3)2.5M NaCl;(4)TE(pH8.0)溶液;(5)Tris饱和酚:氯仿;(6)氯仿;(7)70%乙醇;(8)3M乙酸钠(PH=5.2);(9)无水乙醇;(10)2×CTAB提取液;(11)β-巯基乙醇;(12)异丙醇。该方法主要包括:取材冷却研磨、加缓冲液振荡后水浴抽提、放置沉淀、洗涤沉淀、风干纯化、溶解保存等步骤。本发明优化了番茄基因组DNA提取过程中番茄叶片用量、液氮研磨方法、水浴时间、洗涤以及纯化步骤等参数,可有效防止DNA的褐化,建立了一种适合大批量提取番茄幼嫩叶片基因组DNA的方法。用本发明方法提取番茄叶片的基因组DNA时间短、速度快、提取效率高,提取的DNA质量稳定,可应用于番茄种群遗传学、分子标记辅助育种等研究。

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