公开(公告)号：CN102533731A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201210016509.6

申请日：2012-01-19

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 梁燕 ,  孙亚东 ,  吴江敏 ,  郑戌翔

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明根据番茄的生长习性提供了一种番茄基因组总DNA提取试剂盒及其提取方法，包括以下试剂：(1)1M Tris-HCl(pH8.0)；(2)0.25M EDTA(pH8.0)；(3)2.5M NaCl；(4)TE(pH8.0)溶液；(5)Tris饱和酚：氯仿；(6)氯仿；(7)70％乙醇；(8)3M乙酸钠(PH＝5.2)；(9)无水乙醇；(10)2×CTAB提取液；(11)β-巯基乙醇；(12)异丙醇。该方法主要包括：取材冷却研磨、加缓冲液振荡后水浴抽提、放置沉淀、洗涤沉淀、风干纯化、溶解保存等步骤。本发明优化了番茄基因组DNA提取过程中番茄叶片用量、液氮研磨方法、水浴时间、洗涤以及纯化步骤等参数，可有效防止DNA的褐化，建立了一种适合大批量提取番茄幼嫩叶片基因组DNA的方法。用本发明方法提取番茄叶片的基因组DNA时间短、速度快、提取效率高，提取的DNA质量稳定，可应用于番茄种群遗传学、分子标记辅助育种等研究。

公开(公告)号：CN101824396B

公开(公告)日：2013-04-10

申请号：CN201010168471.5

申请日：2010-05-11

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 梁燕 ,  王晓静 ,  李继纲 ,  孙亚东 ,  徐加新

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明涉及一种诱导培养基及利用该诱导培养基游离培养番茄小孢子获得愈伤组织的方法。上述诱导培养基包含有基本培养基(MS、PM或HN)、碳源(蔗糖或麦芽糖)、附加物(谷氨酰胺和/或AgNO3)和植物生长调节剂(NAA+6-BA)。本发明综合考虑了影响番茄小孢子培养的多方面因素，通过尝试多种培养基及植物生长调节剂的组合，得到了适宜小孢子生长的培养基配方，高、低温交替处理预培养的方法提高了出愈率，通过液体游离培养进一步提高了出愈率，为后续研究工作的顺利开展奠定了坚实的基础。

公开(公告)号：CN101824396A

公开(公告)日：2010-09-08

申请号：CN201010168471.5

申请日：2010-05-11

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 梁燕 ,  王晓静 ,  李继纲 ,  孙亚东 ,  徐加新

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明涉及一种诱导培养基及利用该诱导培养基游离培养番茄小孢子获得愈伤组织的方法。上述诱导培养基包含有基本培养基(MS、PM或HN)、碳源(蔗糖或麦芽糖)、附加物(谷氨酰胺和/或AgNO3)和植物生长调节剂(NAA+6-BA)。本发明综合考虑了影响番茄小孢子培养的多方面因素，通过尝试多种培养基及植物生长调节剂的组合，得到了适宜小孢子生长的培养基配方，高、低温交替处理预培养的方法提高了出愈率，通过液体游离培养进一步提高了出愈率，为后续研究工作的顺利开展奠定了坚实的基础。