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公开(公告)号:CN118879944A
公开(公告)日:2024-11-01
申请号:CN202411336258.9
申请日:2024-09-24
Applicant: 宁夏张裕龙谕酒庄有限公司 , 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
Abstract: 本发明属于病毒检测技术领域,涉及一种基于RT‑RAA和CRISPR/Cas13a检测葡萄卷叶病毒‑3的检测体系、试剂盒及检测方法。该检测体系,包括独立包装的RAA等温扩增体系和CRISPR/Cas13a‑LFD检测体系;RAA等温扩增体系包括基于葡萄卷叶病毒‑3核酸设计的RAA引物对,CRISPR/Cas13a‑LFD检测体系包括基于葡萄卷叶病毒‑3核酸设计的crRNA。该检测体系,可实现简便、高效、可视化检测葡萄卷叶病毒的目的,且灵敏度高、准确度高、特异性好。
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公开(公告)号:CN118844343A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202411281961.4
申请日:2024-09-13
Applicant: 宁夏张裕龙谕酒庄有限公司 , 西北农林科技大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种酿酒葡萄组培苗高效复合脱毒的方法,其属于植物病毒防治技术领域,包括以下步骤:步骤S1、携带病毒的植物材料的采集:步骤S2、将外植体消毒进行初代培养,获得无菌组培苗;步骤S3、增值生根培养:步骤S4、葡萄组培苗病毒检测:步骤S5、葡萄组培苗茎尖热处理:步骤S6、超低温脱毒:步骤S7、葡萄组培苗二次病毒检测。本发明采用热处理结合超低温脱毒技术,与传统脱毒方法相比,其脱毒效率大幅提高,可同时高效脱除不同品种的多种病毒,操作简单、快速有效,为以后的脱毒技术提供有力的参考价值,具有很好的技术效果和推广前景。
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公开(公告)号:CN118813699A
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202411163669.2
申请日:2024-08-23
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明属于园艺技术领域,且公开了农大郁香猕猴桃的遗传转化方法,包括如下步骤:将目的载体转入GV3101农杆菌并进行培养,直至OD值为0.7‑0.8,获得菌液,并将菌液摇匀;选取长势健壮良好的30天苗龄农大郁香猕猴桃组培苗,在叶片背面划3‑5道伤口,置于预培养基中预培养预设时长;将S1中摇好的菌液,通过离心设备进行离心,离心后丢弃上清,并添加等倍体积的重悬液,并通过震荡设备震荡,获得悬浮液;本发明提供了农大郁香遗传体系的最佳预培养基、共培养基、筛选培养基、生芽培养基、生根培养基配方,同时对转基因植株进行RNA、DNA、蛋白水平鉴定阳性苗,建立了一套高效准确的美味系猕猴桃遗传转化体系,对猕猴桃的分子育种具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114134246A
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202111341222.6
申请日:2021-11-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , A01G17/02 , A01H1/00 , A01H1/02
Abstract: 本发明公开了一种鉴定葡萄无核性状的KASP标记与应用,该KASP分子标记的SNP位点位于葡萄基因组PN40024第18号染色体第26889437位碱基,具有A/C多态性。本发明的KASP分子标记引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示,采用该引物组通过KASP技术进行PCR反应和荧光检测,根据FAM、HEX两种不同荧光的峰值大小,绘制聚类图,判定待测样品的基因型;若待测样品的基因型为A:C,则该葡萄表现为无核性状,若该位点基因型为C:C,葡萄种子表现为有核,以此标记开展葡萄无核分子辅助育种,可以大大提高育种进程。
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公开(公告)号:CN112126646B
公开(公告)日:2022-07-19
申请号:CN202011040617.8
申请日:2020-09-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/88
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及用于植物抗葡萄卷叶病毒‑3的sgRNA、载体、宿主细胞及方法。所述sgRNA序列的上游引物序列为SEQ ID No.2所示的gattGGTGTTGATCAATTCCGTT;所述sgRNA序列的下游引物序列为SEQ ID No.3所示的cgagAACGGAATTGATCAACACC。所述sgRNA可以用于减少植物体内葡萄卷叶病毒‑3的病毒含量,抑制葡萄卷叶病毒‑3的复制,由此提高植物抗葡萄卷叶病毒‑3的能力。
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公开(公告)号:CN119318302A
公开(公告)日:2025-01-17
申请号:CN202411751919.4
申请日:2024-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及植物组织培养技术领域,具体公开了一种葡萄幼苗下胚轴诱导体细胞胚再生体系的建立方法,包括:以无核葡萄胚挽畸形幼苗下胚轴获得的次生胚为外植体在KBN培养基中进行诱导获得胚性愈伤组织、非胚性愈伤组织和次生原胚团,次生原胚团接种于X6培养基中扩繁培养获得质量增加的次生原胚团和体细胞胚,子叶期前的体细胞胚进行二次诱导建立体细胞胚保持与扩繁的循环系统,体细胞胚接种至X3培养基中分化胚轴和胚根,转接至WPM培养基培养成苗。本发明成功诱导无核葡萄胚挽畸形幼苗下胚轴获得再生体系,且成功建立了次生原胚团保持与扩繁的循环系统,可为葡萄遗传转化提供新的受体材料。
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公开(公告)号:CN118020642A
公开(公告)日:2024-05-14
申请号:CN202410361892.1
申请日:2024-03-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种提高葡萄胚挽救育种畸形苗转化效率的方法,该方法包含:将胚挽救畸形苗接种在转化培养基中培养,将长出真叶的小苗转移至成苗培养基中培养,以获得正常苗;对未转化为正常苗的畸形苗,再进行不定芽再生途径挽救:将畸形苗切割获取胚轴,接种到诱导培养基中进行不定芽再生培养,将分化出不定芽的外植体转至成苗培养基中,以获得正常苗。本发明对无核葡萄胚挽救育种过程中产生的畸形苗提出了有效转化为正常苗的技术方案,利用两种挽救方法对无核葡萄胚挽救产生的畸形苗转化再利用,进而提高无核葡萄胚挽救育种效率,可以将胚挽救效率由原来的4~10%左右提高到25%左右,提高无核葡萄胚挽救效率。
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公开(公告)号:CN110024689A
公开(公告)日:2019-07-19
申请号:CN201910238127.X
申请日:2019-03-27
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本说明书实施例提供了一种超低温脱除葡萄卷叶病毒-3方法及用途。所述方法包括以下步骤:取葡萄枝条单茎段,消毒杀菌后,继代在初代培养基上培养,将腋芽萌发的茎段继代到增殖培养基上培养,取含有5-6片叶原基的茎尖栽到预培养基上,黑暗培养;将经过预培养基培养的茎尖在加载液中处理,之后,置于冰上,然后制成小滴;将冷冻保护剂包裹的茎尖放入液氮中,之后转移到卸载液中,进行解冻和卸载;将解冻后的茎尖移栽到恢复培养基上进行黑暗培养,得到不带葡萄卷叶病毒-3的植株。
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公开(公告)号:CN102121005B
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201010582564.2
申请日:2010-12-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/68 , C12N15/82
Abstract: 本发明涉及葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1启动子序列及其应用,采用染色体步移并结合巢式PCR技术克隆了中国野生华东葡萄白粉病转录因子基因VpRFP1全长1249bp启动子序列,包含103个TATA-box和27个CAAT-box,具有8个与植物防御反应相关的元件,14个光反应元件,5个植物激素反应元件,其他合未知的元件14个。采用农杆菌介导的瞬时转化烟草叶片分析方法,对中国野生华东葡萄抗白粉病转录因子基因VpRFP1启动子功能表明,该启动子具有较强的启动活性,并且能够积极响应病原菌的侵染及抗病信号物质,通过转基因方法提高小麦、水稻、番茄、玉米、大豆、油菜等植物的抗病能力以及抗高温能力。
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公开(公告)号:CN102120997A
公开(公告)日:2011-07-13
申请号:CN201010582600.5
申请日:2010-12-03
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种葡萄病程相关蛋白PR10-1水解RNA与抑菌活性的方法,根据中国野生葡萄病程相关蛋白基因480bp开放阅读框构建突变体K55N、E149G、Y151H,将PR10-1基因,分别插入原核表达载体pGEX-4T-1中,使其与GST标签处于同一读码框,PR10-1及其突变体融合蛋白与烟草赤星病菌的培养结果表明,PR10-1与Y151H对烟草赤星病菌的抑制效果比突变体K55N及E149G融合蛋白显著的多,这也是由于K55N及E149G中RNA酶活性有关的保守氨基酸残基被突变其RNA酶活性被降低所致。本发明所通过对所克隆的葡萄病程相关蛋白PR10-1体外RNA酶活性与抑菌活性的检测,快速验证出此葡萄病程相关基因PR10-1具有很强的抗病功能,这将加速筛选葡萄重要抗病基因资源。
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