公开(公告)号：CN118441022A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410666947.X

申请日：2024-05-28

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 李强 ,  黄洁 ,  崇钰 ,  王保通

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种基于RPA‑LFD的小麦矮腥黑穗病菌可视化快速检测方法，该方法为：提取小麦麦穗菌瘿冬孢子DNA，得到样品DNA；以S1中得到的样品DNA为模版，按照胶体金试纸条型DNA恒温快速扩增试剂盒的说明书配置反应液，反应液为：冻干粉，A buffer 29.4μL，10μmol·L‑1正向引物TCKRPA‑F 2μL，10μmol·L‑1反向引物TCKRPA‑R 2μL，0.1μmol·L‑1nfo探针0.6μL，核酸模板2μL,ddH2O 11.5μL，B buffer2.5μL；在温度为38℃的恒温金属浴中反应10min，反应结束后，吸取10μL反应产物加入超纯水稀释至100μL，取50μL稀释后的反应产物滴于加样孔，5分钟内观察质控线与检测线判断检测结果。本发明利用RPA‑LFD对小麦矮腥黑穗病菌进行高效准确的鉴定，利用RPA技术简化检验检疫流程，使检测结果可视化、实际操作简便化。