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公开(公告)号：CN118109512A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410524937.2
申请日：2024-04-29
Applicant: 细胞生态海河实验室 , 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/85 , C12N15/12 , A01K67/0276
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及tpi1a基因缺失斑马鱼突变体的制备方法及磷酸丙糖异构酶缺乏症斑马鱼疾病模型的构建方法，上述tpi1a基因缺失斑马鱼突变体的制备方法中tpi1a基因利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除，本发明利用CRISPR/Cas9技术首次实现在斑马鱼中特异性敲除tpi1a基因，获得可以稳定遗传的tpi1a基因缺失突变体。上述磷酸丙糖异构酶缺乏症斑马鱼疾病模型的构建方法，包括以下步骤：S100、制备斑马鱼tpi1a基因缺失突变体；S200、针对斑马鱼tpi1b基因的吗啉代寡核苷酸注射至一细胞期所述斑马鱼tpi1a基因缺失突变体胚胎中，得到磷酸丙糖异构酶缺乏症斑马鱼疾病模型，构建得到的磷酸丙糖异构酶缺乏症疾病模型不仅可用于疾病的分子机制研究，亦可以用于高通量药物筛选。
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公开(公告)号：CN116548388B
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310777135.8
申请日：2023-06-29
Applicant: 细胞生态海河实验室 , 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了标记造血干/祖细胞周期的转基因斑马鱼模型的制备方法。本发明基于荧光泛素化系统的细胞周期标记（fluorescent ubiquitination‑based cell cycle indicator,FUCCI）方法，利用造血干/祖细胞特异增强子驱动FUCCI表达，获得可稳定遗传的、特异标记造血干/祖细胞周期的斑马鱼模型。此外，本发明将FUCCI表达系统整合至Tg(cd41:eGFP)转基因品系，有利于更便捷地观察、分析造血干/祖细胞周期，可用于造血系统发育、血液系统疾病发病机制和药物筛选等方面的研究。
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公开(公告)号：CN119101705B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202411596243.6
申请日：2024-11-11
Applicant: 细胞生态海河实验室 , 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N9/22 , A01K67/0276
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种斑马鱼trmt61a母源合子突变体的制备方法，包括如下步骤：将靶向斑马鱼trmt61a基因的sgRNA和Cas9蛋白共同注射到野生型斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到trmt61a杂合合子突变体；构建pGGDestISceIEG‑4sgRNA质粒，将其与内切酶和反应缓冲液共同注射到Tg(zpc:zcas9)转基因斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到成年斑马鱼F0代；使成年斑马鱼F0代的雌性鱼与trmt61a杂合合子突变体雄鱼杂交，得到斑马鱼trmt61a母源合子突变体。该方法突破了trmt61a基因纯合突变致死的限制，实现快速制备母源合子突变体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119101705A
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202411596243.6
申请日：2024-11-11
Applicant: 细胞生态海河实验室 , 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N9/22 , A01K67/0276
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种斑马鱼trmt61a母源合子突变体的制备方法，包括如下步骤：将靶向斑马鱼trmt61a基因的sgRNA和Cas9蛋白共同注射到野生型斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到trmt61a杂合合子突变体；构建pGGDestISceIEG‑4sgRNA质粒，将其与内切酶和反应缓冲液共同注射到Tg(zpc:zcas9)转基因斑马鱼的一细胞期胚胎中，得到成年斑马鱼F0代；使成年斑马鱼F0代的雌性鱼与trmt61a杂合合子突变体雄鱼杂交，得到斑马鱼trmt61a母源合子突变体。该方法突破了trmt61a基因纯合突变致死的限制，实现快速制备母源合子突变体。
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公开(公告)号：CN116548388A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310777135.8
申请日：2023-06-29
Applicant: 细胞生态海河实验室 , 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: A01K67/027 , C12N15/85 , C12N15/89
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体公开了标记造血干/祖细胞周期的转基因斑马鱼模型的制备方法。本发明基于荧光泛素化系统的细胞周期标记（fluorescent ubiquitination‑based cell cycle indicator,FUCCI）方法，利用造血干/祖细胞特异增强子驱动FUCCI表达，获得可稳定遗传的、特异标记造血干/祖细胞周期的斑马鱼模型。此外，本发明将FUCCI表达系统整合至Tg(cd41:eGFP)转基因品系，有利于更便捷地观察、分析造血干/祖细胞周期，可用于造血系统发育、血液系统疾病发病机制和药物筛选等方面的研究。
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公开(公告)号：CN118109512B
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410524937.2
申请日：2024-04-29
Applicant: 细胞生态海河实验室 , 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/85 , C12N15/12 , A01K67/0276
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及tpi1a基因缺失斑马鱼突变体的制备方法及磷酸丙糖异构酶缺乏症斑马鱼疾病模型的构建方法，上述tpi1a基因缺失斑马鱼突变体的制备方法中tpi1a基因利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除，本发明利用CRISPR/Cas9技术首次实现在斑马鱼中特异性敲除tpi1a基因，获得可以稳定遗传的tpi1a基因缺失突变体。上述磷酸丙糖异构酶缺乏症斑马鱼疾病模型的构建方法，包括以下步骤：S100、制备斑马鱼tpi1a基因缺失突变体；S200、针对斑马鱼tpi1b基因的吗啉代寡核苷酸注射至一细胞期所述斑马鱼tpi1a基因缺失突变体胚胎中，得到磷酸丙糖异构酶缺乏症斑马鱼疾病模型，构建得到的磷酸丙糖异构酶缺乏症疾病模型不仅可用于疾病的分子机制研究，亦可以用于高通量药物筛选。
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公开(公告)号：CN116083492B
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202210929442.9
申请日：2022-08-03
Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/89 , C12N15/12 , C12N15/113 , A01K67/0276 , C12Q1/6888 , C12N15/11 , A61K49/00
Abstract: 本发明涉及基因技术工程领域，具体公开了一种csde1基因缺失斑马鱼突变体的制备及斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型的构建方法。本发明利用CRISPR/Cas9技术首次实现斑马鱼csde1基因的特异敲除，建立csde1基因缺失斑马鱼，形成稳定遗传的斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型，本发明还提供一种斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型的构建方法，构建得到的斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型可以更高效准确的用于高通量药物筛选，更能比较准确的评估药物效果以及药物毒性。
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公开(公告)号：CN116083492A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202210929442.9
申请日：2022-08-03
Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)
IPC: C12N15/89 , C12N15/12 , C12N15/113 , A01K67/027 , C12Q1/6888 , C12N15/11 , A61K49/00
Abstract: 本发明涉及基因技术工程领域，具体公开了一种csde1基因缺失斑马鱼突变体的制备及斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型的构建方法。本发明利用CRISPR/Cas9技术首次实现斑马鱼csde1基因的特异敲除，建立csde1基因缺失斑马鱼，形成稳定遗传的斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型，本发明还提供一种斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型的构建方法，构建得到的斑马鱼造血干细胞发育缺陷模型可以更高效准确的用于高通量药物筛选，更能比较准确的评估药物效果以及药物毒性。
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